2010年版藥典一部附錄Ⅺ

1 拼音

2010 nián bǎn yào diǎn yī bù fù lù Ⅺ

《中華人民共和國藥典》2010年版一部 附錄Ⅺ

2 附錄Ⅺ A溶液顏色檢查法

藥物溶液的顏色及其與規定顏色的差異能在一定程度上反映藥物的純度。本法系將藥物溶液的顏色與規定的標準比色液相比較，或在規定的波長處測定其吸光度，以檢查其顏色。品種項下規定的“無色或幾乎無色”，其“無色”係指供試品溶液的顏色與所用溶劑相同，“幾乎無色”係指淺於用水稀釋1倍後的相應色調1號標準比色液。

2.1 第一法

除另有規定外，取各品種項下規定量的供試品，加水溶解，置於25ml的納氏比色管中，加水稀釋至10ml。另取規定色調和色號的標準比色液10ml，置於另一25ml的納氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察；供試品管呈現的顏色與對照管比較，不得更深。如供試品管呈現的顏色與對照管的顏色深淺非常接近或色調不盡一致，使目視觀察無法辨別二者的深淺時，應改用第三法（色差計法）測定，並將其測定結果作爲判定依據。

2.1.1 比色用重鉻酸鉀液

精密稱取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀0.4000g，置500ml量瓶中，加適量水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。每Iml溶液中含0.800mg的K₂Cr₂O₇。比色用硫酸銅液 取硫酸銅約32.5g，加適量的鹽酸溶液（1→40）使溶解成500ml，精密量取10ml，置碘量瓶中，加水50ml、醋酸4ml與碘化鉀2g，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加澱粉指示液2ml，繼續滴定至藍色消失。每1ml硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當於24.97mg的CuSO₄·5H₂O。根據上述測定結果，在剩餘的原溶液中加適量的鹽酸溶液（1→40），使每1ml溶液中含62.4mg的CuSO₄·5H₂O，即得。

2.1.2 比色用氯化鈷液

取氯化鈷約32.5g，加適量的鹽酸溶液（1→40）使溶解成500ml，精密量取2ml，置錐形瓶中，加水200ml，搖勻，加氨試液至溶液由淺紅色轉變至綠色後，加醋酸醋酸鈉緩衝液（pH6.0）10ml，加熱至60℃，再加二甲酚橙指示液5滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05 mol/L）滴定至溶液顯黃色。每1ml乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05mol/L）相當於11.90mg的CoCl₂·6H₂O。根據上述測定結果，在剩餘的原溶液中加適量的鹽酸溶液（1→40），使每1ml溶液中含59.5mg的CoCl₂·6H₂O，即得。

2.1.3 各種色調標準貯備液的製備

按表I精密量取比色用氯化鈷液、比色用重鉻酸鉀液、比色用硫酸銅液與水，搖勻，即得。

表1 各種色調標準貯備液的配製

各種色調色號標準比色液的製備 按表2精密量取各色調標準貯備液與水，搖勻，即得。

表2各種色調色號標準比色液的配製

2.2 第二法

除另有規定外，取各品種項下規定量的供試品，加水溶解使成10ml，必要時濾過，濾液照分光光度法於規定波長處測定，吸光度不得超過規定值。

2.3 第三法（色差計法）

本法是通過色差計直接測定溶液的透射三刺激值，對其顏色進行定量表述和分析的方法。當目視比色法較難判定供試品與標準比色液之間的差異時，應考慮採用本法進行測定與判斷。供試品與標準比色液之間的顏色差異，可以通過分別比較它們與水之間的色差值來得到，也可以通過直接比較它們之間的色差值來得到。

現代顏色視覺理論認爲，在人眼視網膜上有三種感色的錐體細胞，分別對紅、綠、藍三種顏色敏感。顏色視覺過程可分爲兩個階段：第一階段，視網膜上三種獨立的錐體感色物質，有選擇地吸收光譜不同波長的輻射，同時每一物質又可單獨產生白和黑的反應，即在強光作用下產生白的反應，無外界刺激時產生黑的反應；第二階段，在神經興奮由錐體感受器向視覺中樞的傳導過程中，這三種反應又重新組合，最後形成三對對立性的神經反應，即紅或綠、黃或藍、白或黑的反應。最終在大腦皮層的視覺中樞產生各種顏色感覺。

自然界中的每種顏色都可以用選定的、能刺激人眼中三種受體細胞的紅、綠、藍三原色，按適當比例混合而成。由此引入一個新的概念——三刺激值，即在給定的三色系統中與待測色達到色匹配所需要的三個原刺激量，分別以X、Y、Z表示。通過對衆多具有正常色覺的人體（稱爲標準觀察者，即標準眼）進行廣泛的顏色比較試驗，測定了每一種可見波長（400～760nm）的光引起每種錐體刺激的相對數量的色匹配函數，這些色匹配函數分別用（λ）、（λ）、（λ）來表示。把這些色匹配函數組合起來，描繪成曲線，就叫做CIE色度標準觀察者的光譜三刺激值曲線（圖1）。

圖1 CIE 1931色度標準觀察者的光譜三刺激值曲線（10°視場）

色匹配函數和三刺激值間的關係以下列方程表示；

式中 K爲歸化係數；

S（λ）爲光源的相對光譜功率分佈；

P（λ）爲物質色的光譜反射比或透射比；

（λ）、（λ）、（λ）爲標準觀察者的色匹配函數；

d（λ）爲波長間隔，一般採用10nm或5nm。

當某種顏色的三刺激值確定之後，則可用其計算出該顏色在一個理想的三維顏色空間中的座標，由此推導出許多組的顏色方程（稱爲表色系統）來定義這一空間。如：CIE1931-XYZ表色系統，CIE1964補充標準色度系統，CIE1976 L^*a^*b^*色空間（CIELab均勻色空間），Hunter表色系統等。

爲便於理解和比對，人們通常採用CIELab均勻色空間來表示顏色及色差。該色空間由直角座標 L^*a^*b^*構成。在三維色座標系的任一點都代表一種顏色，其與參比點之間的幾何距離代表兩種顏色之間的色差（圖2和圖3）。相等的距離代表相同的色差值。用儀器法對供試品溶液與其規定的標準比色液的顏色進行比較時，需比較的參數就是空白對照液的顏色和供試溶液或其規定的標準比色液顏色在均勻色空間中的差值。

圖2 L^*a^*b^*色品圖

圖3 L^*a^*b^*色空間和色差△E*

在CIELab均勻色空間中，三維色座標L^*a^*b^*與三刺激值X、y、Z和色差之間的關係如下：明度指數L^*=116×（Y/Y_n）^1/3-16色品指數a^*=500×[（X/Xn）^1/3-（Y/Yn）^1/3]

色品指數b^*=200×[（Y/Y_n）^1/3-（Z/Zn）^1/3]

以上公式僅適用於X/Xn、Y/Yn、Z/Zn>0.008856時。式中 X、y、Z爲待測溶液的三刺激值；

Xn、Yn、Zn爲完全漫反射體的三刺激值；

△E*爲供試品溶液與標準比色液的色差；

△L*爲供試品溶液與標準比色液的明度指數之差，其中△L*爲正，表示供試品溶液比標準比色液顏色亮（鮮豔）；

△a*、△b*爲供試品溶液色與標準比色液色的色品指數之差，其中△a*、△b*爲正，表示供試品比標準比色液顏色更深（飽和）。

色差計的工作原理簡單地說即是模擬人眼的視覺系統，利用儀器內部的模擬積分光學系統，把光譜光度數據的三刺激值進行積分而得到顏色的數學表達式，從而計算出L*、a*、b*值及對比色的色差。圖4爲色差計光學系統示意圖。在儀器使用的標準光源與日常觀察供試品所使用光源光譜功率分佈一致（比如晝光），其光電響應接收條件與標準觀察者的色覺特性一致（比如10°視場）的條件下，用儀器方法測定顏色，不但能夠精確、定量地測定顏色和色差，而且比目測法更爲科學客觀，且不隨時間、地點、人員變化而發生變化。

圖4色差計光學系統

2.4 1．對儀器的一般要求

使用的測色儀器一般爲光電積分型色差計，照明觀察條件爲o/d條件或d/o條件，D65光源照明，10°視場，可直接測出三刺激值X、Y、Z，並能直接計算給出L^*、a^*、b^*和△E^*及供試品溶液的色調色號。

因溶液的顏色隨着被測定溶液的液層厚度而變，所以除另有規定外，測量透射色時，應使用1cm厚度液槽。

爲保證測量的可靠性，應定期對儀器進行全面的檢定。在每次測量時，要用無彩色物質如水或空氣對儀器進行校準，並規定它在所有波長下的透射率均爲1.000。

室溫時，在D65爲光源、10°視場條件下，水或空氣的三刺激值分別爲：

X=94.81；Y=100.00；Z=107.32

2.5 2．測定法

除另有規定外，用水對儀器進行校準，取按各品種項下規定的方法分別製得的供試品溶液和標準比色液，置儀器上進行測定，供試品溶液與水的色差值△E*應不超過相應色調的標準比色液與水的色差值△E*。

如品種項下規定的色調有兩種，且供試品溶液的實際色調介於兩種規定色調之間，且難以判斷更傾向何種色調時，將測得的供試品溶液與水的色差值（△E*）與兩種色調標準比色液與水的色差值的平均值[△E*≤（△E_s1^*十△E_s2^*）/2]比較，不得更深。

3 附錄Ⅺ B粒度測定法

本法用於測定製劑的粒子大小或限度。

3.1 第一法（顯微鏡法）

本法中的粒度，系以顯微鏡下觀察到的長度表示。

目鏡測微尺的標定 照顯微鑑別法（2010年版藥典一部附錄Ⅱ C）標定。

3.1.1 測定法

除另有規定外，取供試品，用力搖勻[黏度較大者可按品種項下的規定加適量甘油溶液（1→2）稀釋]，照該劑型或品種項下的規定取供試品，置載玻片上，覆以蓋玻片（注意防止氣泡混入），輕壓使顆粒分佈均勻；半固體可直接塗於載玻片上。立即在50～100倍顯微鏡下檢視蓋玻片全部視野，應無凝聚現象，並不得檢出該劑型或品種項下規定的50μm及50μm以上的粒子。再在200～500倍顯微鏡下檢視該劑型或品種項下規定的視野內的總粒數及規定大小的粒數，計算所佔百分比。

3.2 第二法（篩分法）

3.2.1 1．單篩分法

除另有規定外，取供試品10g，稱定重量，置規定的藥篩中，篩上加蓋，並在篩下配有密合的接收容器，按水平方向旋轉振搖至少3分鐘，並不時在垂直方向輕叩篩。取篩下的顆粒及粉末，稱定重量，計算所佔百分比。

3.2.2 2．雙篩分法

除另有規定外，取供試品30g，稱定重量，置規定的藥篩中，保持水平狀態過篩，左右往返，邊篩動邊輕叩3分鐘。取不能通過小號篩和能通過大號篩的顆粒及粉末，稱定重量，計算所佔百分比。

4 附錄Ⅺ C可見異物檢查法

可見異物是指存在於注射劑、服用液體制劑中，在規定條件下目視可以觀測到的不溶性物質，其粒徑或長度通常大於50μm。注射劑、眼用液體制劑應在符合藥品生產質量管理規範（GMP）的條件下生產，產品在出廠前應採用適宜的方法逐一檢查並同時剔除不合格產品。臨用前，也在自然光下目視檢查（避免陽光直射），如有可見異物，不得使用。

可見異物檢查法有燈檢法和光散射法。一般常用燈檢法，也可採用光散射法。燈檢法不適用的品種，如用深色透明容器包裝或液體色澤較深（一般深於各標準比色液7號）的品種可選用光散射法。

實驗室檢測時應避免引入可見異物。當製備注射用無菌粉末和無菌原料藥供試品溶液時，或供試品溶液的容器不適於檢測（如不透明、不規則形狀容器等），需轉移至適宜容器中時，均應在100級的潔淨環境（如層流淨化臺）中進行。

用於本試驗的供試品，必須按規定隨機抽樣。

4.1 第一法（燈檢法）

燈檢法應在暗室中進行。

4.1.1 檢查裝置

如下圖所示。

圖 燈檢法示意

A．帶有遮光板的日光燈光源（光照度可在1000～4000lx範圍內調節）；

B．不反光的黑色背景；

C．不反光的白色背景和底部（供檢查有色異物）；D．反光的白色背景（指遮光板內側）。

4.1.2 檢查人員條件

遠距離和近距離視力測驗，均應爲4.9或4.9以上（矯正後視力應爲5.0或5.0以上）；應無色盲。檢查法

4.1.3 溶液型、乳狀液及混懸型製劑

除另有規定外，取供試品20支（瓶），除去容器標籤，擦淨容器外壁，必要時將藥液轉移至潔淨透明的適宜容器內；置供試品於遮光板邊緣處，在明視距離（指供試品至人眼的清晰觀測距離，通常爲25cm），分別在黑色和白色背景下，手持供試品頸部輕輕旋轉和翻轉容器使藥液中可能存在的可見異物懸浮（但應避免產生氣泡），輕輕翻搖後即用目檢視，重複3次，總時限爲20秒。供試品裝量每支（瓶）在10ml及10ml以下的，每次檢查可手持2支（瓶）。

4.1.4 注射用無菌粉末

除另有規定外，取供試品5支（瓶），用適宜的溶劑及適當的方法使藥粉全部溶解後，按上述方法檢查。配帶有專用溶劑的注射用無菌粉末，應先將專用溶劑按溶液型製劑檢查合格後，再用以溶解注射用無菌粉末。

4.1.5 無菌原料藥

除另有規定外，按抽樣要求稱取各品種製劑項下的最大規格量5份，分別置潔淨透明的適宜容器內，用適宜的溶劑及適當的方法使藥物全部溶解後，按上述方法檢查。

注射用無菌粉末及無菌原料藥所選用的適宜溶劑應無可見異物。如爲水溶性藥物，一般使用不溶性微粒檢查用水（參見2010年版藥典一部附錄Ⅸ R不溶性微粒檢查法）進行溶解製備；如爲其他溶劑，則應在各品種項下中作出規定。溶劑量應確保藥物溶解完全並便於觀察。

注射用無菌粉末及無菌原料藥溶解所用的適當方法應與其製劑使用說明書中注明的臨牀使用前處理的方式相同。如除振搖外還需其他輔助條件，則應在各品種項下中作出規定。用無色透明容器包裝的無色供試品溶液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應爲1000～1500lx;用透明塑料容器包裝或用棕色透明容器包裝的供試品溶液或有色供試品溶液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應爲2000～3000lx;混懸型供試品或乳狀液，檢查時被觀察樣品所在處的光照度應增加至約4000lx。

4.1.6 結果判定

各類注射劑、眼用液體制劑 在靜置一定時間後輕輕旋轉時均不得檢出煙霧狀微粒柱，且不得檢出金屬屑、玻璃屑、長度或最大粒徑超過2mm的纖維和塊狀物等明顯可見異物。微細可見異物（如點狀物、2mm以下的短纖維和塊狀物等）如有檢出，除另有規定外，應分別符合下列規定：

4.1.6.1 溶液型靜脈用注射液、注射用濃溶液

20支（瓶）檢查的供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物的供試品僅有1支（瓶），應另取20支（瓶）同法複試，均不得檢出。

4.1.6.2 溶液型非靜脈用注射液

被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，應另取20支（瓶）同法複試，初、複試的供試品中，檢出微細可見異物的供試品不得超過2支（瓶）。

4.1.6.3 溶液型滴眼劑

被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，應另取20支（瓶）同法複試，初、複試的供試品中，檢出微細可見異物的供試品不得超過3支（瓶）。

4.1.6.4 混懸型、乳狀液型注射液及滴眼劑

被檢查的20支（瓶）供試品中，均不得檢出金屬屑、玻璃屑、色塊、纖維等明顯可見異物。

臨用前配製的溶液型和混懸型滴眼劑，除另有規定外，應符合相應的可見異物規定。

4.1.6.5 注射用無菌粉末

被檢查的5支（瓶）供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，每支（瓶）供試品中檢出微細可見異物的數量應符合下表的規定；如有1支（瓶）不符合規定，另取10支（瓶）同法複試，均應符合規定。

配帶有專用溶劑的注射用無菌粉末，專用溶劑應符合相應的溶液型注射液的規定。

4.1.6.6 無菌原料藥

5份檢查的供試品中，均不得檢出明顯可見異物。如檢出微細可見異物，每份供試品中檢出微細可見異物的數量應符合下表的規定；如有1份不符合規定，另取10份同法複試，均應符合規定。

既可靜脈用也可非靜脈用的注射劑應執行靜脈用注射劑的標準。

4.2 第二法（光散射法）

當一束單色激光照射溶液時，溶液中存在的不溶性物質使入射光發生散射，散射的能量與不溶性物質的大小有關。本方法通過對溶液中不溶性物質引起的光散射能量的測量，並與規定的閾值比較，以檢查可見異物。

不溶性物質的光散射能量可通過被採集的圖像進行分析。設不溶性物質的光散射能量爲E，經過光電信號轉換，即可用攝像機採集到一個錐體高度爲H，直徑爲D的相應立體圖像。散射能量E爲D和H的一個單調函數，即E=f（D,H）。同時，假設不溶性物質的光散射強度爲q，攝像曝光時間爲T，則又有E=g（q,T）。由此可以得出圖像中的D與q、T之間的關係爲D=w（q,T），也爲一個單調函數關係。在測定圖像中的D值後，即可根據函數曲線計算出不溶性物質的光散射能量。

4.2.1 儀器裝置和檢測原理

儀器由旋瓶裝置、激光光源、圖像採集器、數據處理系統和終端顯示系統組成，並配有自動上瓶和下瓶裝置。

供試品通過上瓶裝置被送至旋瓶裝置，旋瓶裝置應能使供試品沿垂直中軸線高速旋轉一定時間後迅速停止，同時激光光源發出的均勻激光束照射在供試品上；當藥液渦流基本消失，瓶內藥液因慣性繼續旋轉，圖像採集器在特定角度對旋轉

藥液中懸浮的不溶性物質引起的散射光能量進行連續攝像，採集圖像不少於75幅；數據處理系統對採集的序列圖像進行處理，然後根據預先設定的閾值自動判定超過一定大小的不溶性物質的有無，或在終端顯示器上顯示圖像供人工判定，同時記錄檢測結果，指令下瓶裝置自動分檢合格與不合格供試品。儀器校準儀器應具備自動校準功能，在檢測供試品前須採用標準粒子進行校準。

除另有規定外，分別用粒徑爲40μm和60μm的標準粒子對儀器進行標定。根據標定結果得到曲線方程並計算出與粒徑50μm相對應的檢測像素值。

當把檢測像素參數設定爲與粒徑50μm相對應的數值時，對60μm的標準粒子溶液測定3次，應均能檢出。

4.2.2 檢查法

溶液型注射液 除另有規定外，取供試品20支（瓶），除去不透明標籤，擦淨容器外壁，置儀器上瓶裝置上，根據儀器的使用說明書選擇適宜的測定參數，啓動儀器，將供試品檢測3次並記錄檢測結果。凡儀器判定有1次不合格者，須用燈檢法作進一步確認。用深色透明容器包裝或液體色澤較深等燈檢法檢查困難的品種不用燈檢法確認。

4.2.2.1 注射用無菌粉末

除另有規定外，取供試品5支（瓶），用適宜的溶劑及適當的方法使藥物全部溶解後，按上述方法檢查。

4.2.2.2 無菌原料藥

除另有規定外，稱取各品種製劑項下的最大規格量5份，分別置潔淨透明的專用玻璃容器內，用適宜的溶劑及適當的方法使藥物全部溶解後，按上述方法檢查。

設置檢測參數時，一般情況下取樣視窗的左右邊線和底線應與瓶體重合，上邊線與液麪的彎月面成切線；旋轉時間的設置應能使液麪漩渦到底，以能帶動固體物質懸浮並消除氣泡；靜置時間的設置應儘可能短，但不能短於液麪漩渦消失的時間，以避免氣泡干擾並保證攝像啓動時固體物質仍在轉動；嵌瓶鬆緊度參數與瓶底直徑（mm）基本相同，可根據安瓿質量調整，如瓶體不平正，轉動時瓶體搖動幅度較大，氣泡易產生，則應將嵌瓶鬆緊度調大以減小搖動，但同時應延長旋轉時間，使漩渦仍能到底。

4.2.3 結果判定

同燈檢法。

5 附錄Ⅺ D電感耦合等離子體質譜法

本法是以等離子體爲離子源的一種質譜型元素分析方法。主要用於進行多種元素的同時測定，並可與其他色譜分離技術聯用，進行元素價態分析。

樣品由載氣（氬氣）引入霧化系統進行霧化後，以氣溶膠形式進入等離子體中心區，在高溫和惰性氣氛中被去溶劑化、汽化解離和電離，轉化成帶正電荷的正離子，經離子採集系統進入質譜儀，質譜儀根據質荷比進行分離，根據元素質譜峯強度測定樣品中相應元素的含量。

本法靈敏度高，適用於各類藥品從痕量到微量的元素分析，尤其是痕量重金屬元素的測定。

5.1 1．儀器的一般要求

電感耦合等離子體質譜儀由樣品引入系統、電感耦合等離子體（ICP）離子源、接口、離子透鏡系統、四極杆質量分析器、檢測器等構成，其他支持系統有真空系統、冷卻系統、氣體控制系統、計算機控制及數據處理系統等。

5.1.1 樣品引入系統

按樣品的狀態不同分爲液體、氣體或固體進樣，通常採用液體進樣方式。樣品引入系統主要由樣品提升和霧化兩個部分組成。樣品提升部分一般爲蠕動泵，也可使用自提升霧化器。要求蠕動泵轉速穩定，泵管彈性良好，使樣品溶液勻速泵入，廢液順暢排出。霧化部分包括霧化器和霧化室。樣品以泵入方式或自提升方式進入霧化器後，在載氣作用下形成小霧滴並進入霧化室，大霧滴碰到霧化室壁後被排除，只有小霧滴可進入等離子體離子源。要求霧化器霧化效率高，霧化穩定性高，記憶效應小，耐腐蝕；霧化室應保持穩定的低溫環境，並應經常清洗。常用的溶液型霧化器有同心霧化器、交叉型霧化器等；常見的霧化室有雙通路型和旋流型。實際應用中宜根據樣品基質、待測元素、靈敏度等因素選擇合適的霧化器和霧化室。

5.1.2 電感耦合等離子體離子源

電感耦合等離子體的“點燃”，需具備持續穩定的高純氬氣流（純度應不小於99.99%）、炬管、感應圈、高頻發生器、冷卻系統等條件。樣品氣溶膠被引入等離子體離子源，在6000～10000K的高溫下，發生去溶劑、蒸發、解離、原子化、電離等過程，轉化成帶正電荷的正離子。測定條件如射頻功率，氣體流量，炬管位置，蠕動泵流速等工作參數可以根據供試品的具體情況進行優化，使靈敏度最佳，干擾最小。

5.1.3 接口系統

接口系統的功能是將等離子體中的樣品離子有效地傳輸到質譜儀。其關鍵部件是採樣錐和截取錐，平時應經常清洗，並注意確保錐孔不損壞，否則將影響儀器的檢測性能。

5.1.4 離子透鏡系統

位於截取錐後面高真空區的離子透鏡系統的作用是將來自截取錐的離子聚焦到質量過濾器，並阻止中性原子進入和減少來自ICP的光子通過量。離子透鏡參數的設置應適當，要注意兼顧低、中、高質量的離子都具有高靈敏度。

5.1.5 四極杆質量分析器

質量分析器通常爲四極杆質量分析器，可以實現質譜掃描功能。四極杆的作用是基於在四根電極之間的空間產生一隨時間變化的特殊電場，只有給定m/z的離子才能獲得穩定的路徑而通過極棒，從另一端射出。其他離子則將被過分偏轉，與極棒碰撞，並在極棒上被中和而丟失，從而實現質量選擇。測定中應設置適當的四極杆質量分析器參數，優化質譜分辨率和響應並校準質量軸。

5.1.6 檢測器

通常使用的檢測器是雙通道模式的電子倍增器，四極杆系統將離子按質荷比分離後引入檢測器，檢測器將離子轉換成電子脈衝，由積分線路計數。雙模式檢測器採用脈衝計數和模擬兩種模式，可同時測定同一樣品中的低濃度和高濃度元素。檢測低含量信號時，檢測器使用脈衝模式，直接記錄撞擊到檢測器的總離子數量；當離子濃度較大時，檢測器則自動切換到模擬模式進行檢測，以保護檢測器，延長使用壽命。測定中應注意設置適當的檢測器參數，以優化靈敏度，對雙模式檢測信號（脈衝和模擬）進行歸一化校準。

5.1.7 其他支持系統

真空系統由機械泵和分子渦輪泵組成，用於維持質譜分析器工作所須的真空度，真空度應達到儀器使用要求值。冷卻系統包括排風系統和循環水系統，其功能是排出儀器內部的熱量，循環水溫度和排風口溫度應控制在儀器要求範圍內。氣體控制系統運行應穩定，氬氣的純度應不小於99.99%。

5.2 2．干擾和校正

電感耦合等離子體質譜法測定中的干擾大致可分爲兩類：一類是質譜型干擾，主要包括同質異位素、多原子離子、雙電荷離子等；另一類是非質譜型干擾，主要包括物理干擾、基體效應、記憶效應等。

干擾的消除和校正方法有優化儀器參數、內標校正、干擾方程校正、碰撞反應池技術、稀釋校正、標準加入法等。

5.3 3．供試品溶液的製備

所用試劑一般是酸類，包括硝酸、鹽酸、過氧化氫、高氯酸、硫酸、氫氟酸，以及混合酸如王水等，純度應爲優級純。其中硝酸引起的干擾最小，是樣品製備的首選酸。所用水應爲去離子水（電阻率應不小於18MΩ）。

5.3.1 供試品溶液

製備時應同時製備試劑空白，標準溶液的介質和酸度應與供試品溶液保持一致。

5.3.2 固體樣品

除另有規定外，稱取樣品適量（0.1～3g），結合實驗室條件以及樣品基質類型選用合適的消解方法。消解方法有敞口容器消解法、密閉容器消解法和微波消解法。微波消解法所需試劑少，消解效率高，對於降低試劑空白值、減少樣品製備過程中的污染或待測元素的揮發損失以及保護環境都是有益的，可作爲首選方法。樣品消解後根據待測元素含量定容至適當體積後即可進行質譜測定。

5.3.3 液體樣品

根據樣品的基質、有機物含量和待測元素含量等情況，可選用直接分析、稀釋或濃縮後分析、消化處理後分析等不同的測定方式。

5.4 4．測定法

對待測元素，目標同位素的選擇一般需根據待測樣品基體中可能出現的干擾情況，選取干擾少，丰度較高的同位素進行測定；有些同位素需採用干擾方程校正；對於干擾不確定的情況亦可選擇多個同位素測定，以便比較。常用測定方法包括：

5.4.1 （1）標準曲線法

在選定的分析條件下，測定待測元素不少於三個不同濃度的標準系列溶液（標準溶液的介質和酸度應與供試品溶液一致），以選定的分析峯的響應值爲縱座標，濃度爲橫座標，繪製標準曲線，計算迴歸方程，相關係數應不低於0.99。測定供試品溶液，從標準曲線或迴歸方程中查得相應的濃度，計算樣品中各待測元素的含量。

在同樣的分析條件下進行空白試驗，根據儀器介紹的要求扣除空白干擾。

附 內標校正的標準曲線法

在每個樣品（包括標準溶液、供試品溶液和試劑空白）中添加相同濃度的內標（ISTD）元素，以標準溶液待測元素分析峯響應值與內標元素參比峯響應值的比值爲縱座標，濃度爲橫座標，繪製標準曲線，計算迴歸方程。利用供試品中待測元素分析峯響應值和內標元素參比峯響應值的比值，扣除試劑空白後，從標準曲線或迴歸方程中查得相應的濃度，計算樣品中各待測元素的含量。使用內標可有效地校正響應信號的波動，內標校正的標準曲線法爲最常用的測定法。

選擇內標時應考慮如下因素：待測樣品中不含有該元素；與待測元素質量數接近；電離能與待測元素電離能相近；元素的化學特性。內標的加入可以在每個樣品和標準溶液中分別加入，也可通過蠕動泵在線加入。

5.4.2 （2）標準加入法

取同體積的供試品溶液4份，分別置4個同體積的量瓶中，除第1個量瓶外，在其他3個量瓶中分別精密加入不同濃度的待測元素標準溶液，分別稀釋至刻度，搖勻，製成系列待測溶液。在選定的分析條件下分別測定，以分析峯的響應值爲縱座標，待測元素加入量爲橫座標，繪製標準曲線，將標準曲線延長交於橫座標，交點與原點的距離所相應的含量，即爲供試品取用量中待測元素的含量，再以此計算供試品中待測元素的含量。此法僅適用於第（1）法中標準曲線呈線性並通過原點的情況。

6 附錄Ⅺ E電感耦合等離子體原子發射光譜法

本法是以等離子體爲激發光源的原子發射光譜分析方法，可進行多元素的同時測定。

樣品由載氣（氬氣）引入霧化系統進行霧化後，以氣溶膠形式進入等離子體的中心通道，在高溫和惰性氣氛中被充分蒸發、原子化、電離和激發，使所含元素發射各自的特徵譜線。根據各元素特徵譜線的存在與否，鑑別樣品中是否含有某種元素（定性分析）；由特徵譜線的強度測定樣品中相應元素的含量（定量分析）。

本法適用於各類藥品從痕量到常量的元素分析，尤其適用於礦物類中藥、營養補充劑等的元素定性定量測定。

6.1 1．儀器的一般要求

電感耦合等離子體原子發射光譜儀由樣品引入系統、電感耦合等離子體（ICP）光源、色散系統、檢測系統等構成，並配有計算機控制及數據處理系統、冷卻系統、氣體控制系統等。

6.1.1 樣品引入系統

按樣品狀態不同分爲液體或固體進樣，通常採用液體進樣方式。樣品引入系統主要由樣品提升和霧化兩個部分組成。樣品提升部分一般爲蠕動泵，也可使用自提升霧化器。要求蠕動泵轉速穩定，泵管彈性良好，使樣品溶液勻速泵人，廢液順暢排出。霧化部分包括霧化器和霧化室。樣品以泵入方式或自提升方式進入霧化器後，在載氣作用下形成小霧滴並進入霧化室，大霧滴碰到霧化室壁後被排除，只有小霧滴可進入等離子體源。要求霧化器霧化效率高，霧化穩定性高，記憶效應小，耐腐蝕；霧化室應保持穩定的低溫環境，並應經常清洗。常用的溶液型霧化器有同心霧化器、交叉型霧化器等；常見的霧化室有雙通路型和旋流型。實際應用中宜根據樣品基質、待測元素、靈敏度等因素選擇合適的霧化器和霧化室。

6.1.2 電感耦合等離子體（ICP）光源

電感耦合等離子體光源的“點燃”，需具備持續穩定的純氬氣流、炬管、感應圈、高頻發生器、冷卻系統等條件。樣品氣溶膠被引入等離子體光源，在6000～10000K的高溫下，發生去溶劑、蒸發、解離、激發、電離、發射譜線。根據光路採光方向，可分爲水平觀察ICP光源和垂直觀察ICP光源；雙向觀察ICP光源可實現垂直／水平雙向觀察。實際應用中宜根據樣品基質、待測元素、波長、靈敏度等因素選擇合適的觀察方式。

6.1.3 色散系統

電感耦合等離子體原子發射光譜的單色器通常採用光柵或棱鏡與光柵的組合，光源發出的複合光經色散系統分解成按波長順序排列的譜線，形成光譜。

6.1.4 檢測系統

電感耦合等離子體原子發射光譜的檢測系統爲光電轉換器，它是利用光電效應將不同波長光的輻射能轉化成電信號。常見的光電轉換器有光電倍增管和固態成像系統兩類。固態成像系統是一類以半導體硅片爲基材的光敏元件製成的多元陣列集成電路式的焦平面檢測器，如電荷耦合器件（CCD）、電荷注入器件（CID）等，具有多譜線同時檢測能力，檢測速度快，動態線性範圍寬，靈敏度高等特點。檢測系統應保持性能穩定，具有良好的靈敏度、分辨率和光譜響應範圍。

6.1.5 冷卻和氣體控制系統

冷卻系統包括排風系統和循環水系統，其功能是排出儀器內部的熱量。循環水溫度和排風口溫度應控制在儀器要求範圍內。氣體控制系統運行應穩定，氬氣的純度應不小於99.99%。

6.2 2．干擾和校正

電感耦合等離子體原子發射光譜法測定中通常存在的干擾大致可分爲兩類：一類是光譜干擾，主要包括連續背景和譜線重疊干擾等；另一類是非光譜干擾，主要包括化學干擾、電離干擾、物理干擾等。

干擾的消除和校正通常可採用空白校正、稀釋校正、內標校正、背景扣除校正、干擾係數校正、標準加入等方法。

6.3 3．供試品溶液的製備

所用試劑一般是酸類，包括硝酸、鹽酸、過氧化氫、高氯酸、硫酸、氫氟酸，以及混合酸如王水等，純度應不低於優級純。其中硝酸引起的干擾最小，是供試品溶液製備的首選酸。所用水應爲去離子水（電導率應小於0.056μS/cm）。

供試品溶液製備時應同時製備試劑空白，標準溶液的介質和酸度應與供試品溶液保持一致。

6.3.1 固體樣品

除另有規定外，稱取樣品適量（0.1～3g），結合實驗室條件以及樣品基質類型選用合適的消解方法。消解方法一般有敞口容器消解法、密閉容器消解法和微波消解法。微波消解法所需試劑少，消解效率高，對於降低試劑空白值、減少樣品製備過程中的污染或待測元素的揮發損失以及保護環境都是有益的，可作爲首選方法。樣品消解後根據待測元素含量定容至適當體積後即可進行測定。

6.3.2 液體樣品

根據樣品的基質、有機物含量和待測元素含量等情況，可選用直接分析、稀釋或濃縮後分析、消化處理後分析等不同的測定方式。

6.4 4．測定法

分析譜線的選擇原則一般是選擇干擾少，靈敏度高的譜線；同時應考慮分析對象：對於微量元素的分析，採用靈敏線，而對於高含量元素的分析，可採用較弱的譜線。

6.4.1 定性鑑別

根據原子發射光譜中各元素固有的一列特徵譜線的存在與否可以確定供試品中是否含有相應的元素。元素特徵光譜中強度最大的譜線稱爲元素的靈敏線。在供試品光譜中，某元素靈敏線的檢出限即爲相應元素的檢出限。

6.4.2 定量測定

6.4.2.1 （1）標準曲線法

在選定的分析條件下，測定不少於三個不同濃度的待測元素的標準系列溶液（標準溶液的介質和酸度應與供試品溶液一致），以分析線的響應值爲縱座標，濃度爲橫座標，繪製標準曲線，計算迴歸方程。除另有規定外，相關係數應不低於0.99。測定供試品溶液，從標準曲線或迴歸方程中查得相應的濃度，計算樣品中各待測元素的含量。在同樣的分析條件下進行空白試驗，根據儀器介紹的要求扣除空白干擾。

附 內標校正的標準曲線法

在每個樣品（包括標準溶液、供試品溶液和試劑空白）中添加相同濃度的內標（ISTD）元素，以標準溶液待測元素分析線的響應值與內標元素參比線響應值的比值爲縱座標，濃度爲橫座標，繪製標準曲線，計算迴歸方程。利用供試品中待測元素分析線的響應值和內標元素參比線響應值的比值，從標準曲線或迴歸方程中查得相應的濃度，計算樣品中含待測元素的含量。

內標元素及參比線的選擇原則如下：

內標元素的選擇 外加內標元素在分析試樣中應不存在或含量極微可忽略，如樣品基體元素的含量較穩時，亦可用該基體元素作內標；內標元素與待測元素應有相近的特性；同族元素，具相近的電離能。

參比線的選擇 激發能應儘量相近；分析線與參比線的波長及強度接近；無自吸現象且不受其他元素干擾；背景應儘量小。

6.4.2.2 （2）標準加入法

取同體積的供試品溶液4份，分別置4個同體積的量瓶中，除第1個量瓶外，在其他3個量瓶中分別

精密加入不同濃度的待測元素標準溶液，分別稀釋至刻度，搖勻，製成系列待測溶液。在選定的分析條件下分別測定，以分析線的響應值爲縱座標，待測元素加入量爲橫座標，繪製標準曲線，將標準曲線延長交於橫座標，交點與原點的距離所相應的含量，即爲供試品取用量中待測元素的含量，再以此計算供試品中待測元素的含量。

7 附錄Ⅺ F滲透壓摩爾濃度測定法

生物膜，例如人體的細胞膜或毛細血管壁，一般具有半透膜的性質，溶劑通過半透膜由低濃度溶液向高濃度溶液擴散的現象稱爲滲透，阻止滲透所需施加的壓力，即爲滲透壓。在涉及溶質的擴散或通過生物膜的液體轉運各種生物過程中，滲透壓都起着極其重要的作用。因此，在製備注射劑、眼用液體制劑等藥物製劑時，必須關注其滲透壓。處方中添加了滲透壓調節劑的製劑，均應控制其滲透壓摩爾濃度。

靜脈輸液、營養液、電解質或滲透利尿藥（如甘露醇注射液）等製劑，應在藥品介紹上標明其滲透壓摩爾濃度，以便臨牀醫生根據實際需要對所用製劑進行適當的處置（如稀釋）。正常人體血液的滲透壓摩爾濃度範圍爲285～310mOsmol/kg，0.9%氯化鈉溶液或5%葡萄糖溶液的滲透壓摩爾濃度與人體血液相當。

溶液的滲透壓，依賴於溶液中溶質粒子的數量，是溶液的依數性之一，通常以滲透壓摩爾濃度（Osmolality）來表示，它反映的是溶液中各種溶質對溶液滲透壓貢獻的總和。

滲透壓摩爾濃度的單位，通常以每千克溶劑中溶質的毫滲透壓摩爾來表示，可按下列公式計算毫滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：

式中，n爲一個溶質分子溶解或解離時形成的粒子數。在理想溶液中，例如葡萄糖n=1，氯化鈉或硫酸鎂n=2，氯化鈣n=3，枸櫞酸鈉n=4。

在生理範圍及稀溶液中，其滲透壓摩爾濃度與理想狀態下的計算值偏差較小；隨着溶液濃度的增加，與計算值比較，實際滲透壓摩爾濃度下降。例如0.9%氯化鈉注射液，按上式計算，毫滲透壓摩爾濃度是2×1000×9/58.4=308mOsmol/kg，而實際上在此濃度時氯化鈉溶液的”稍小於2，其實際測得值是286mOsmol/kg；複雜混合物，如水解蛋白注射液的理論滲透壓摩爾濃度不容易計算，因此通常採用實際測定值表示。

7.1 1．滲透壓摩爾濃度的測定

通常採用測量溶液的冰點下降來間接測定其滲透壓摩爾濃度。在理想的稀溶液中，冰點下降符合△T_f=K_f·m的關係，式中，△T_f爲冰點下降，K_f爲冰點下降常數（當水爲溶劑時爲1.86），m爲重量摩爾濃度。而滲透壓符合P_o=K_o·m的關係，式中，P_o爲滲透壓，K_o爲滲透壓常數，m爲溶液的重量摩爾濃度。由於兩式中的濃度等同，故可以用冰點下降法測定溶液的滲透壓摩爾濃度。

7.1.1 儀器

採用冰點下降的原理設計的滲透壓摩爾濃度測定儀通常由製冷系統、用來測定電流或電位差的熱敏探頭和振盪器（或金屬探針）組成。測定時將測定探頭浸入供試溶液的中心，並降至儀器的冷卻槽中。啓動製冷系統，當供試溶液的溫度降至凝固點以下時，儀器採用振盪器（或金屬探針）誘導溶液結冰，自動記錄冰點下降的溫度。儀器顯示的測定值可以是冰點下降的溫度，也可以是滲透壓摩爾濃度。

7.1.2 標準溶液的製備

取基準氯化鈉試劑，於500～650℃乾燥40～50分鐘，置乾燥器（硅膠）中放冷至室溫。根據需要，按表中所列數據精密稱取適量，溶於1kg水中，搖勻，即得。表 滲透壓摩爾濃度測定儀校正用標準溶液

7.1.3 供試品溶液

供試品如爲液體，通常可直接測定；如其滲透壓摩爾濃度大於700mOsmol/kg或爲濃溶液，可用適宜的溶劑（通常爲注射用水）稀釋至表中測定範圍內；如爲固體（如注射用無菌粉末），可採用藥品標籤或介紹中的規定溶劑溶解並稀釋至表中測定範同內。需特別注意的是，溶液經稀釋後，粒子間的相互作用與原溶液有所不同，一般不能簡單地將稀釋後的測定值乘以稀釋倍數來計算原溶液的滲透壓摩爾濃度。例如，甘露醇注射液、氨基酸注射液等高滲溶液和注射用無菌粉末可用適宜的溶劑（如注射用水）溶解、稀釋後測定，並在各品種項下規定具體的溶解或稀釋方法。

7.1.4 測定法

按儀器介紹操作，首先取適量新沸放冷的水調節儀器零點，然後由表中選擇兩種標準溶液（供試品溶液的滲透壓摩爾濃度應介於兩者之間）校正儀器，再測定供試品溶液的滲透壓摩爾濃度或冰點下降值。

7.2 2．滲透壓摩爾濃度比的測定

供試品溶液與0.9% （g/ml）氯化鈉標準溶液的滲透壓摩爾濃度比率稱爲滲透壓摩爾濃度比。用滲透壓摩爾濃度測定儀分別測定供試品溶液與0.9%（g/ml）氯化鈉標準溶液的滲透壓摩爾濃度OT與Os，方法同滲透壓摩爾濃度測定法，並用下列公式計算滲透壓摩爾濃度比：

滲透壓摩爾濃度比=O_T/O_S

滲透壓摩爾濃度比的測定用標準溶液的製備 精密稱取經500～650℃乾燥40～50分鐘並置乾燥器（硅膠）中放冷的基準氯化鈉0.900g，加水使溶解並稀釋至100ml，搖勻，即得。