3 概述
尿素（Urea，ure）是哺乳動物蛋白質分解代謝的終產物。在肝臟通過鳥氨酸循環合成，主要由腎臟排泄。由於尿素的分子量小又易於溶解，擴散力極大，故腦脊液、漿膜腔積液、唾液、汗液中的尿素濃度基本一致。血尿素濃度主要受腎功能和蛋白質攝入量和分解代謝情況的影響。目前臨牀實驗室測定尿素最常用的方法有二乙酰-肟法，酶偶聯速率法。
4 血清尿素醫學檢查
4.1 分類
4.2 取材
4.3 原理
（1）二乙酰-肟法：二乙酰-肟與強酸作用生成二乙酰，後者與尿素在酸性條件下，縮合成紅色的二嗪衍生物。試劑中的硫氨脲和硫酸鎘具有增色和穩定作用。
（2）酶偶聯速率法：尿素在尿素酶作用下水解成NH4＋和CO2，NH4＋、NADH和α-酮戊二酸在穀氨酸脫氫酶作用下生成CO2、穀氨酸和NAD＋。由於NADH被氧化成NAD＋，在340nm吸光度降低，其吸光度降低值與尿素濃度成正比。
4.4 試劑
（1）二乙酰-肟法：
①酸性試劑：加蒸餾水約100ml於1000ml三角燒瓶中，然後加入濃硫酸44ml及85%磷酸66ml，冷至室溫後，加入硫氨脲50mg及硫酸鎘（CdSO4·8H2O）2g，充分溶解後用蒸餾水稀釋至1000ml，置棕色試劑瓶中放冰箱保存，此試劑可穩定6個月。
②二乙酰-肟溶液：稱取二乙酰-肟20g，加蒸餾水約900ml，溶解後，用蒸餾水稀釋至1000ml，置棕色瓶中放冰箱保存，可穩定6個月。
③尿素標準應用液（70mmol/L）：精確稱取乾燥純尿素0.420g，溶於20ml無氨蒸餾水中。並加至100ml，加0.1g疊氮鈉防腐，放冰箱可穩定6個月。
④尿素標準應用液（7.0mmol/L）：取10ml尿素標準應用液，用無氨蒸餾水稀釋至100ml即可。
（2）酶偶聯速率法：目前各廠家所產試劑盒並不完全相同。緩衝液多用0.1mol/L（pH7.5±0.1）的磷酸鹽緩衝液。α-酮戊二酸5mmol/L，NADH 3.5mmol/L，尿素酶15000U/L，穀氨酸脫氫酶2000U/L，ADP 2mmol/L。
4.5 操作方法
4.5.1 二乙酰-肟法
①試管分別標明空白管“B”、測定管“U”、標準管“S”。
②分別於測定管加血漿（清）20μl，標準管加標準應用液20μl，空白管加蒸餾水20μl。
③各加酸性試劑3ml、二乙酰-肟試劑3ml。
④充分混勻，煮沸加熱10min，取出、冷卻。
⑤520nm波長，空白管調零比色、讀取標準管及測定管吸光度。
附註：
①尿素不能直接與二乙酰-肟反應，加入二乙酰-肟和強酸的目的是生成能與之反應二乙酰。加入Fe3＋（或Cd2＋）是爲消除反應過程中生成的羥胺的干擾，硫氨脲可使反應的敏感度提高20倍。以前許多書刊介紹的方法是將二乙酰-肟與硫氨脲配在一起。但兩者可生成針狀黃色物質，用硫氨脲配在酸試劑中克服了這一缺點。
②酸濃度與吸光度呈正相關，故酸濃度要準確。所用試管口徑，放入沸水中的傾斜角度要儘量一致，水液麪要在試管內液麪之上，煮沸時間以放入試管重新沸騰計。最好每次測定標準和質控。觀察尿素動態變化時，應囑患者恆定食入蛋白，並空腹採血。樣本不能立即分析時，可提取血清（或血漿）於密封樣杯中，置4℃存放可穩定7天。結果大於20mmol/L時，樣本改爲10μl，結果乘以2。
③此法雖然加入硫氨脲和鎘離子，在一定程度上增進了顯色強度和色澤穩定性，但仍有褪色現象（每小時約5%），所以，煮沸加熱顯色冷卻後，應及時比色。
④所用20μl加樣器務必校正無誤後方可使用。
⑤血漿（清）中尿酸、肌酐、氨基酸等含氮物對本試驗無干擾，溶血可能結果偏高，黃疸可能結果偏低。
⑥血漿（清）尿素含量與進食的蛋白質含量有密切的關係。在高蛋白飲食時，血漿（清）中的尿素含量可明顯升高，而低蛋白飲食時，則含量顯著降低。
4.5.2 酶偶聯速率法
試劑樣品比爲70∶1，37℃，340nm，延滯時間30s，讀數時間30s。具體分析條件可據試劑盒和儀器的介紹確定，最好每次定標。
附註：
①該法最常出現的問題是試劑失效或反應系統被污染。試劑中最不穩定的是NADH和穀氨酸脫氫酶。在分析過程中應注意以下幾個方面：如用血漿則不能用含氟化合物或NH4＋的抗凝劑，前者可抑制尿素酶活性，後者則可參與反應。
②試劑空白吸光度應大於1.2A，否則說明NADH被氧化。同種試劑、儀器，在分析條件不變的情況下，測定得F值應相對恆定，否則說明試劑失效。
③復溶試劑勿振動，以免酶變性失活。必須用無氨水復溶試劑。試劑杯、樣品杯、反應杯要無氨、潔淨、無酸鹼污染，應每次定標，並跟測質控血清。
4.6 正常值
（1）二乙酰-肟法：2.0～7.1mmol/L。
（2）酶偶聯速率法：2～7.1mmol/L。
4.7 臨牀意義
（1）增高：
①腎臟疾病：如急性腎衰、慢性腎炎、腎動脈硬化、慢性腎盂腎炎、腎結核、腎腫瘤晚期等，腎功能輕度受損時，BUN可無變化。當60%～70%有效腎單位受損時，BUN才增高。因此BUN測定不能作爲早期腎功能受損的指標，但對腎功能衰竭，尤其是尿毒症診斷有特殊價值，並可判斷病情，估計預後。根據BUN測定結果可判斷腎功能衰竭的程度。A.腎功能衰竭代償期：Ccr下降，血Cr正常。BUN正常或輕度升高（＜9mol/L）。B.腎功能衰竭失代償期（氮質血癥期或尿毒症前期）：Ccr明顯下降（＜0.83ml/s），血Cr增高（＞90mmol/L），BUN中度升高（＞9mmol/L）。C.尿毒症期：Ccr＜0.33ml/s，血Cr＞445μmol/L，BUN＞20mmol/L。
②腎前性或腎後性因素引起尿量顯著減少或尿閉，如劇烈嘔吐、腹瀉引起的脫水、水腫、腹水、循環功能衰竭，以及尿路結石、前列腺肥大、腫瘤等引起的尿路梗阻。
③體內蛋白質分解過多，如大面積燒傷、大手術以後，上消化道出血、甲狀腺功能亢進及急性傳染病等。此時BUN增高，而其他腎功能試驗結果大致正常。
（2）降低：臨牀較少見。主要系肝實質受損，生成減少。如急性黃色肝萎縮、肝硬化、中毒性肝炎，嚴重貧血等。