3 概述
骨髓是人體最重要的造血器官，通過抽取骨髓進行骨髓象檢查，可診斷造血系統疾病（如白血病、再生障礙性貧血、多發性骨髓瘤等）和判斷預後；協助診斷某些疾病（如多種惡性腫瘤的骨轉移、骨髓增生症、貧血等），也可提高某些疾病（如瘧疾、黑熱病、紅斑狼瘡等）的診斷率。骨髓細胞增生程度是在顯微鏡下觀察骨髓液塗片中有細胞核的細胞（包括有核幼紅細胞）與無細胞核的成熟紅細胞的比例，以判斷骨髓細胞的生成情況和指導診斷原發於造血系統的疾病。有核細胞越多，說明骨髓細胞增生程度越高。
4 骨髓增生程度的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 骨髓增生程度的測定原理
採用骨髓小粒豐富，製片厚薄均勻的塗片，經瑞氏-姬姆薩混合染色後於顯微鏡下檢查細胞質和量的變化。
4.5 試劑
（1）瑞氏染色液：瑞氏染粉1g，置潔淨乾燥的研鉢內，加甘油3～5ml，研磨片刻，使瑞氏染粉充分溶解，加甲醇約50ml，繼續研磨片刻後，收集上層染液；殘餘部分再加甲醇50ml研磨，再收集上層染液，重複幾次後，用甲醇沖洗研鉢，倒入同一瓶內，最後加甲醇至500ml。開始幾周應經常振搖染色液。染色液存放的時間越長，染色效果也越佳。此外，研磨時染粉內應先加甘油，以免染粉在研磨過程中結成塊，更易溶解。染粉未經研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。
（2）姬姆薩濃縮染液：將姬姆薩染粉3.8g放入純甘油250ml中，置60℃水浴2h，溶解後加60℃預熱的甲醇250ml混勻，於室溫，棕色瓶內保存，配後數天即可使用，可長期保存。
（3）pH6.5磷酸鹽緩衝液：磷酸二氫鉀1.5g，磷酸氫二鈉1.0g，加蒸餾水到5000ml。最後糾正pH6.5。
（4）姬姆薩稀釋液：取姬姆薩溶液50ml，加pH6.5磷酸鹽緩衝液到500ml，混勻。此液爲姬姆薩應用液，可直接作塗片復染用。作瑞氏稀釋液時，取此液10～20ml加蒸餾水至100ml，混勻即可。
4.6 操作方法
（1）骨髓取材：取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或後嵴等。兩歲以內小孩最好用脛骨，成人常取髂後上棘，此部位穿刺方便，病人也易接受。穿刺前要求嚴格消毒，杜絕細菌感染，除穿刺室紫外線消毒和皮膚消毒外，還應注意穿刺包和手套消毒時間有否過期。戴手套要熟練，避免手套接觸未消毒物品。穿刺針進入髓腔時常有脫空感，吸取前針筒內應留有1ml左右的空隙，否則髓液很快進入針筒空隙而無法取出。針筒內若有水份也要用消毒紗布擦乾，以免溶解細胞。吸液量一般控制在0.2ml左右，因吸量過多，易被外周血稀釋。部分病人幹抽或吸出量太少時，不要將針頭立即拔出，可邊抽邊調節針頭深淺，或邊抽邊緩慢外移針頭，最後將針頭內可能殘留的髓液儘量推出、製片，以減少病人痛苦。
（2）塗片：骨髓取出後應立即注在一塊斜放的玻片上，使多餘的外周血自然下流，用推片刮取上部較多小粒的髓液在另一干淨玻片上推片。玻片最好事先經稀硝酸液浸泡後用水沖洗，然後用蒸餾水浸泡，應避免用鐵鏽的烤箱烘烤或用鐵絲筐盛放，以減少由鐵劑污染而造成的鐵染色假陽性。同時，做過細菌檢查的玻片，最好不要再用於骨髓片檢查。
（3）染色：選兩塊小粒較多、厚薄均勻的骨髓片，自然乾燥後在較厚的頭端髓膜上寫上病人姓名、日期及“BM”標記。加瑞氏染色液8～12滴，用吸球吹吸並使其佈滿整張塗片，約半分鐘後加姬姆薩稀釋液5～10滴，再用吸球吹吸氣，使兩液充分混勻，若有金黃色油膜出現，染色效果更佳。染色時間一般爲10～20min，夏天可縮短些、冬天則可延長些。沖洗時應平放玻片讓流水緩慢沖洗。另外，因手拿玻片處可能會有染料殘留，應更換手拿位置再予沖洗。染色太淡的塗片，可用姬姆薩稀釋液復染3min；着色太深時，可用瑞氏染液滴加於塗片上，立即沖洗即可。各實驗室最好能摸索出自己的染色經驗，儘量做到一次性染色成功。沒有姬姆薩染液的單位，可用蒸餾水加少量天青（或美藍）代替，但染色效果沒有前者好。染好的塗片要自然乾燥，切忌加熱烘幹，否則細胞退色而影響觀察。
4.7 正常值
爲增生活躍，有核細胞佔成熟紅細胞的0.0l～0.10。（通常分爲五級：增生極度活躍、增生明顯活躍、增生活躍、增生降低、增生極度降低）。
4.8 化驗結果臨牀意義
（1）增生極度降低：見於典型的再生障礙性貧血。
（2）增生降低：見於再生障礙性貧血和極少數低增生性白血病、腫瘤、白血病等化療中骨髓被抑制時。
（3）增生活躍：見於健康人、非原發於造血系統的疾病及早期淋巴瘤、多發性骨髓瘤、尚未出現造血系統紊亂的血液病以及少數不典型的白血病、貧血、細菌感染。
（4）增生明顯活躍：見於各類型增生性貧血（外周血液檢查見紅細胞、血紅蛋白下降，而骨髓中細胞增生），如缺鐵性貧血、溶血性貧血、巨幼細胞貧血、急性失血等，藥物引起的骨髓反應，細菌感染，不典型的急、慢性白血病，骨髓增生性疾病，脾功能亢進等。
（5）增生極度活躍：見於各類典型的急、慢性白血病和各種骨髓增生性疾病，以及某些生物活性製劑治療後等。
4.9 附註
（1）骨髓增生程度分級：增生極度活躍：成熟紅細胞與有核細胞之比爲1∶1；增生明顯活躍：成熟紅細胞與有核細胞之比爲10∶1；增生活躍：成熟紅細胞與有核細胞之比爲20∶l。增生降低：成熟紅細胞與有核細胞之比爲50∶1；增生極度降低：成熟紅細胞與有核細胞之比爲300∶1。（若成熟紅細胞與有核細胞之比，介於上下兩級之間，一般按上一級報告。）
（2）骨髓增生程度的檢查結果受骨髓穿刺部位、骨髓液是否稀釋、細胞計數數量和檢查者技術水平等多種主觀、客觀因素的影響，必要時需多個部位，多次檢查，才能確定。