2 英文參考
hemoglobin[WS/T 476—2015 營養名詞術語]
3 概述
血紅蛋白(hemoglobin)是人體血液中一類紅色含鐵的攜氧蛋白質[1]。包括脫氧血紅蛋白、氧合血紅蛋白、硫化血紅蛋白、碳氧血紅蛋白和高鐵血紅蛋白[1]。
血紅蛋白是血紅素和珠蛋白構成的綴合蛋白質,是脊椎動物血液的有色成分。每個血紅蛋白分子由4個血紅素基團與珠蛋白構成,每個血紅素又由4個吡咯環組成,在環中央有一個鐵原子。血紅蛋白主要功能是運輸氧,也有維持血液酸鹼平衡的作用。血紅素是含2價鐵的卟啉化合物。血紅蛋白中的鐵在二價狀態時,可與氧呈可逆性結合(氧合血紅蛋白);如果鐵氧化爲三價狀態,血紅蛋白則轉變爲高鐵血紅蛋白,就失去了載氧能力。鐵有6個配位鍵,其中4個與血紅素的環狀結構相連,並與之處在同一平面中。另2個配位鍵中的一個與蛋白質部分相連,還有1個則連接氧。珠蛋白含有4個亞基(α2β2),每個亞基連接1個血紅素輔基。人和許多動物血紅蛋白α鏈(含141個氨基酸殘基)和β鏈(含146個氨基酸殘基)的氨基酸序列已確定,也已用X射線衍射結構分析測定其四級結構(見蛋白質)。血紅蛋白基因的點突變導致異常血紅蛋白的產生。已發現數百種異常血紅蛋白,其中只有一小部分引起疾病發生,最常見也最瞭解的疾病是鐮刀形紅細胞貧血病。
血紅蛋白的四級結構對其運氧功能有重要意義。它能從肺攜帶氧經由動脈血運送給組織,又能攜帶組織代謝所產生的二氧化碳經靜脈血送到肺再排出體外。現知它的這種功能與其亞基結構的兩種狀態有關,在缺氧的地方(如靜脈血中)亞基處於鉗制狀態,使氧不能與血紅素結合,所以在需氧組織裏可以快速地脫下氧;在含氧豐富的肺裏,亞基結構呈鬆弛狀態,使氧極易與血紅素結合,從而迅速地將氧運載走。亞基結構的轉換使呼吸功能高效進行。
5 血紅蛋白的醫學檢查
測定血紅蛋白含量使用的方法有四種:①比色法。這是臨牀上使用最廣泛的方法,它可分爲目視比色和光電比色兩類,後者根據所用的稀釋液不同,再分爲氰化高鐵血紅蛋白法、鹼化血紅蛋白法、酸化血紅蛋白及氧合血紅蛋白法。良好的稀釋液必須能使血中所有的血紅蛋白都轉變爲一種穩定的血紅蛋白衍生物,以便能測出血中血紅蛋白總量。氰化高鐵血紅蛋白法基本上具備了這個優點,它能使除了硫化血紅蛋白(正常人血中極少)以外的所有血紅蛋白都變成穩定的氰化高鐵血紅蛋白。所以用這種方法測得的結果準確,重複性好。因此氰化高鐵血紅蛋白法已成爲國際上測定血紅蛋白的標準方法。血紅蛋白目視比色法準確性差,國外已被淘汰。但該法簡便,經濟,目前仍在有些基層醫療單位使用。②測鐵法。③測氧法。此二方法複雜,不適於常規使用。④比重法。該法準確性差。
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 取材
5.4 血紅蛋白的測定原理
血紅蛋白(Hb)被高鐵氰化鉀氧化爲高鐵血紅蛋白(Hi)再與氰化鉀作用,形成穩定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白(HiCN),比色測定。
5.5 試劑
(1)稀釋液:高鐵氰化鉀200mg,氰化鉀50mg,磷酸二氫鉀140mg,置1L容量瓶中,加水溶解,再加入TritonX-100或國產乳化劑OP,0.5~1.0ml,加水至刻度,校正pH值爲7.0~7.4,棕色瓶貯存,置室內暗處可穩定數月。
(2)標準曲線:取市售HiCN標準液四支,50、100、150、200g/L(已稀釋爲1∶251)在540nm,光徑1.0cm,讀取吸光度,以標準液參考值爲橫座標,以吸光度爲縱座標,繪製標準曲線。
5.6 操作方法
取血液20μl,加入稀釋液5ml中,混勻,靜置5min後用分光光度計或比色計測定,於540nm波長,或綠色濾光片,用水校正吸光度爲零點,測吸光度計算或查標準曲線,即得結果。
5.7 正常值
男性:130~170g/L;女性:110~150g/L;新生兒:170~200g/L;兒童:
120~150g/L。
5.8 化驗結果臨牀意義
(1)生理性增加:新生兒,高原居住等。
5.9 附註
HicN是目前血紅蛋白各種測定法中最準確的方法,除Hbs、HbC外其他血紅
蛋白均可轉化成HiCN,本文介紹試劑爲國際血液學標準化委員會(ICSH)所推薦。由於HiCN的毫摩爾吸光係數得到國際公認,故可用經嚴格校準的高級分光光度計根據吸光係數直接計算,此種計算並非檢驗科常規方法。其計算公式如下:
表示540nm測得吸光度,251爲血液稀釋倍數,11.0爲Hb分子單體毫摩爾吸光係數,1.0是光徑,16114.5是單體分子量,除1000即由毫克(mg)換算爲克(g)。
稀釋液應貯存於棕色玻璃瓶中,不得貯存於塑料瓶中,否則氰離子吸附於塑料瓶壁,使測定結果偏低。
稀釋液含氰化鉀,切勿用口吸液。測定後廢液應加入等量水稀釋,並按每升加次氯酸鈉溶液35ml,混勻,敞開容器,放置一夜後排入下水道。
血紅蛋白測定尚有多種方法,目前所報道的方法均未建立本身的標準物,採用此類方法務請慎重,須以HiCN法爲參考法進行評價後方可使用。尤須注意現在市售血紅蛋白質控液均爲HiCN法質控液,用於其他方法會有明顯偏倚。
5.10 相關疾病
6 參考資料
- ^ [1] 中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會.WS/T 476—2015 營養名詞術語[Z].2015-12-29.