尿6-酮-前列素F1a

1 拼音

niào 6-tóng -qián liè sù F1a

2 英文參考

Urine 6 - keto - Prostaglandin F1a

3 概述

前列腺素是一組由20個碳原子組成的不飽和脂肪酸，最早發現於精液中，故名爲前列腺素（prostaglandin，PG）。PG由一個五碳環結構和兩條側鏈構成。其結構分爲A，B，C，D，E，F，G，H，I等類型，字母右下角的阿拉伯數字表示PG分子側鏈所含雙鍵數目，如PGE₁和PGE₂。凡PG五碳環上的取代基在環平面以下者標以α，如PGF₁α，若在環平面以上則標以β，如PGF₂β。不同類型的PG，其生物學作用亦不同。目前研究較多的有PGE₁，PGE₂，PGF₂α，PGA₂，PGI₂，TXA₂和TXB₂，其中尤以前列環素（PGI₂）和血栓素（TXA₂）的研究最爲廣泛。

PG廣泛存在於哺乳動物及人的各種重要組織和體液中。在血管壁、血小板、肺、腎、胃腸、腦和生殖系統等部位含量較豐富。PG的半衰期僅1～5min。6-酮-PGF₁α是PGI₂的穩定代謝產物。PG是在局部產生而又在局部起作用的一類激素。PG的生理作用極爲廣泛複雜，各型PG對不同組織和細胞呈現完全不同的作用。PG與心血管、生殖、中樞神經、呼吸、消化、泌尿系、血小板功能、炎症反應，免疫調節，以及腫瘤轉移等均有一定的關係。PGI₂能擴張血管，降低周圍血管阻力，增加器官血流量，並有排鈉利尿作用，從而使血壓降低。

4 尿6-酮-前列素F1a的醫學檢查

4.1 檢查名稱

尿6-酮-前列素F1a

4.2 分類

體液和排泄物檢查 > 尿液檢查

4.3 化驗取材

尿液

4.4 尿6-酮-前列素F1a的測定原理

（1）[³H]-標記測定法：1976年Moncada發現一種由內皮細胞釋放具有強烈抗血小板聚集和舒張血管的類前列腺素物質，稱之爲前列環素（prostacyclin PGI₂）。正常生理狀態下，PGI₂和TXA₂在血漿中的濃度保持相對恆定。平衡失調與心、腦血管疾病發病關係密切。PGI₂很不穩定，生物半衰期約2～3min。迅速轉化爲6-酮前列腺素F_1a。故測定6-酮前列素F_1a完全可以代表PGI₂的水平。生物樣品中的6-酮前列腺素F_1a經提取和純化，和[³H]-標記物共同競爭性的與特異抗體結合，根據競爭抑制基本理論，從標準曲線上查出樣品中的濃度。

（2）[¹²⁵I]-標記測定法：6-酮-前列腺素F_1a經偶聯劑反應和TME結合，再以氯胺T法標記¹²⁵I。樣品中的待測物和標記物共同競爭性的與特異性抗體結合，從標準競爭抑制劑量反應曲線上得出樣品中的濃度。

4.5 試劑

（1）[³H]-標記測定法：

①抗血清：以6-酮前列腺素F_1a-BSA結合物爲免疫原，注射家兔得到抗血清。滴度爲1∶12500臨用前用PBS稀釋。

②[³H]-6-酮前列腺素F_1a：英國Amersham公司產品，高比放射活性5.55TBq（150Ci）/mmol。放－20℃保存。臨用取37kBq（1μCi）加至10.5ml PBS中。

③標準6-酮前列腺素F_1a（400ng/ml）用90%乙腈配製，分裝每安瓶50μl，放－20℃保存。

④標準6-酮前列腺素F_1a工作液  取上標準液10μl（4ng）於10mm×100mm管中，氮氣吹乾。加1ml PBS溶解。另取試管6只，各加PBS 0.5ml，依次作倍比稀釋。此係列標準液200μl含12.5～800pg，臨用前配製。

⑤分離劑、閃爍液和PBS的配製同[³H]-TXB₂標記測定法。

（2）[¹²⁵I]-標記測定法：

①6-酮-前列腺素F_1a-TME的合成：取6-酮-前列腺素F_1a1mg溶於200μl二甲基甲酰胺中，加三正丁胺2μl爲A液。另取二甲基甲酰胺100μl，加氯甲酸異丁酯2μl爲B液。再取TME 1.3mg溶於200μl二甲基甲酰胺中，加三正丁胺1μl爲C液，將A、B液混合放冰浴中15min，再加入C液，在室溫下反應2～3h。氮氣吹乾。殘渣溶於少量甲醇中，點在硅膠G板上，展開液爲正庚烷∶乙酸乙酯∶甲酸∶水（5∶11∶2∶1）。將R_f值爲0.06處區帶刮下，用無水乙醇提取兩次。分裝每瓶約含2.5μg，氮氣吹乾，放－20℃保存。

②6-酮-前列腺素F_1a-TME¹²⁵I標記：碘化標記技術同TXB₂法，反應液點在硅膠G板上，展開液爲乙酸乙酯∶冰醋酸∶正庚烷∶水（22∶4∶10∶20）。將R_f值0.24處刮下，經無水乙醇提取，放－20℃保存。臨用前用PBS稀釋至100μl約10000cpm。

③抗血清：同[³H]標記測定法。

④標準液：同[³H]標記測定法。

⑤PR分離劑：取Tris-NaN₃-PEG液（含MW6000PEG140g/L）20ml，加蒸餾水70ml，混合後再加羊抗兔IgG血清3～4ml，正常兔血清0.5ml，加水至100ml。

4.6 操作方法

（1）[³H]-標記測定法：

①樣品的採集，提取同TXB₂測定法。

②取8mm×70mm玻璃試管，T管加PBS0.4ml，NSB管加PBS 0.3ml，S₀管加PBS 0.2ml。S_1～7標準工作液0.2ml，測定管加待測樣品0.2ml。

③除T管和NSB管外，其餘各管加抗血清0.1ml，放4℃ 8～12h。

④所有各管均加[³H]-標記物0.1ml。放4℃ 8～12h。

⑤除T管外，各加分離劑0.1ml，快速混勻1min，放4℃ 15min，離心3500r/min（4℃）15min。

⑥將上清液全部傾出至預先加有12ml閃爍液的計數瓶中，混勻，放12h後在液體閃爍測量儀上按預先編制的程序測量，直接劃出標準曲線、有關參數和樣品管的6-酮-前列腺素F_1a值。然後再換算成ng/L。

（2）[¹²⁵I]-標記測定法：

①取10mm×100mm塑料管，按表1加入樣品和試劑。

②加入PR試劑後，充分混合，放4℃ 30min，離心（3500r/min）15min。減壓吸去全部上清液。在γ免疫計數器上測量各管放射性。

③以B/B₀logit爲縱座標，標準管濃度爲橫座標，經直線迴歸處理在Logit對數座標紙上繪製標準曲線。依樣品管的B/B₀Logit值，從標準曲線上查得樣品管相對應濃度。再換算成濃度ng/L。

4.7 正常值

（1）[³H]-標記測定法：

尿液641.5±234.6pg/min尿

（2）[¹²⁵I]-標記測定法：健康成人17名，均經查體無心、腦和腎臟疾病，測定結果爲146.94±11.78ng/L。同時和[³H]標記法進行對照測定。兩法結果經統計學處理，無顯著性差異。

4.8 化驗結果臨牀意義

6-酮-PGF₁α水平變化見於：①心血管系：動脈粥樣硬化患者血漿6-酮-PGF₁α下降，TXB₂增加，糖尿病，高脂血症有類似變化。TXA₂/PGI₂比值升高易於導致血小板聚集，血栓形成，促進動脈硬化和冠心病。由出血、損傷和內毒素引起的休克動物血漿中6-酮-PGF₁α水平增高。②慢性腎衰患者尿中TXB₂和6-酮-PGF₁α下降。腎內PG對調節腎血流有重要意義，腎血管性高血壓、腎病綜合徵和Batter徵患者尿中有顯著變化。③PG對生殖系特別是與排卵過程、黃體轉歸、甾體合成，子宮活動，以及卵子與精子的運行有密切關係。孕婦PGI濃度升高，並對血管緊張素Ⅱ的加壓效應的敏感性減弱可能與胎盤PGI合成增多有關。④炎症反應：如接觸性皮炎患者皮膚洗出液中PGE和PGF的含量比無炎症皮膚高10倍。炎症滲出液中也含有PGI₂和TXB₂。注入外源性PGE和PGI₂等表現出強烈的紅、腫、熱痛等炎症反應。PG合成酶抑制劑有良好的抗炎效果、亦說明PG類物質在炎症發生中起着重要作用。⑤腫瘤轉移，惡性腫瘤患者動脈組織中PGI₂較良性腫瘤患者少，半衰期變短。PGI₂和TXB₂的產生，可能阻止腫瘤細胞侵襲血小板進而黏附在血管表面。抑制血小板TXA₂生成和增加血管內皮細胞PGI₂生成的因素有腫瘤轉移作用。

4.9 附註

（1）本法使用高比放射活性[³H]-標記物，採用免疫結合非平衡法，靈敏度較高，最小檢出值6.25～12.5pg/管。

（2）向正常血漿中加6-酮-前列腺素F_1a100，500pg/ml，回收率88.5%～98.5%，批內CV5.5%～10.5%，批間CV 10.5%～15.1%。

4.10 相關疾病

糖尿病、高脂血症、血栓形成、腎血管性高血壓、腎病綜合徵、接觸性皮炎