口服福氏宋內菌痢疾雙價活疫苗

1 拼音

kǒu fú fú shì sòng nèi jūn lì jí shuāng jià huó yì miáo

2 英文參考

Dysentery Vaccine (Live) of S.flexneri and S.sonnei，Oral[2010年版藥典]

3 口服福氏宋內菌痢疾雙價活疫苗藥典標準

3.1 品名

3.1.1 中文名

口服福氏宋內菌痢疾雙價活疫苗

3.1.2 漢語拼音

Koufu Fushi Songneijun Liji Shuangjia Huoyimiao

3.1.3 英文名

Dysentery Vaccine （Live） of S.flexneri and S.sonnei，Oral

3.2 定義、組成及用途

本品系用表達福氏2a和宋內志賀菌雙價菌體抗原的FS菌株，經培養收集菌體後，加入穩定劑凍乾製成。用於預防細菌性痢疾。

3.3 1 基本要求

生產和檢定用設施、原材料及輔料、水、器具、動物等應符合“凡例”的有關要求。

3.4 2 製造

3.4.1 2.1 菌種

生產用菌種應符合“生物製品生產檢定用菌毒種管理規程”的有關規定。

3.4.1.1 2.1.1  名稱及來源

採用重組技術構建的、能表達福氏2a和宋內志賀菌菌體抗原的FS菌株。

3.4.1.2 2.1.2  種子批的建立

應符合“生物製品生產檢定用菌毒種管理規程”的有關規定。

3.4.1.3 2.1.3  種子批的傳代

工作種子批菌種自啓開後至疫苗生產，傳代應不超過5代。

3.4.1.4 2.1.4  種子批的檢定

3.4.1.4.1 2.1.4.1  培養特性

FS株在固體瓊脂上培養後生長裏無色半透明光滑的菌落。

3.4.1.4.2 2.1.4.2  染色鏡檢

應爲革蘭氏陰性桿菌。

3.4.1.4.3 2.1.4.3  生化反應

發酵葡萄糖、甘露醇，遲緩發酵半乳糖，但不產氣；不發酵乳糖、麥芽糖、蔗糖；無動力（2010年版藥典三部附錄XIV）。

3.4.1.4.4 2.1.4.4  血清學試驗

（1）玻片凝集試驗

取35～37℃培養18～20小時的培養物，與相應的福氏志賀菌羣3、4，Ⅱ型參考血清和宋內志賀菌Ⅰ相參考血清，分別進行玻片凝集試驗，均應在1分鐘內出現凝集反應。

（2）定量凝集試驗

取35～37℃培養18～20小時的培養物，以滅菌PBS（pH7.2～7.4）稀釋成1.0×10⁹/ml的菌懸液，分別與福氏志賀菌羣3、4，Ⅱ型參考血清和宋內志賀茵Ⅰ相參考血清做定量凝集試驗，充分混合後置35～37℃過夜，以肉眼可見凝集之血清最高稀釋度爲凝集效價，凝集效價應不低於參考血清原效價之半。

3.4.1.4.5 2.1.4.5  豚鼠角結膜毒力試驗

選用體重300～350g豚鼠（Hartely）2只，取35～37℃培養18～20小時的菌苔一接種環（直徑3mm，約含5×10¹⁰個活菌）塗布於豚鼠角結膜，連續觀察7天，不得出現任何炎症反應。

3.4.1.4.6 2.1.4.6  免疫力試驗

選用體重14～16g小鼠40只，分爲4組，每組10只，其中兩組爲免疫組，每隻皮下注射總菌2.5×10⁹，另兩組爲生理氯化鈉溶液對照組。共注射3次，每次間隔3天。於末次注射後第14天，用福氏2a和宋內志賀菌菌株50LD₅₀，分別攻擊免疫組和對照組各一組，觀察3天，保護率應大於70%。

3.4.1.4.7 2.1.4.7  免疫原性試驗

將FS株接種於厚金格爾（簡稱厚氏）斜面或其他適宜培養基，35～37℃培養18～20小時，刮取菌苔於滅菌的PBS  （pH7.2～7.4）中，稀釋至一定濃度，經耳靜脈免疫體重2kg左右的家兔3只，每次0.5ml，免疫4次，間隔5～7天，4次注射的劑量分別含菌2.5×10⁸、5.0×10⁸、1.0×10⁹、2.0×10⁹，於末次注射後10～14天採血做定量凝集試驗，測血清抗體效價。免疫血清對福氏2a型志賀菌的凝集效價不低於1：1280，對宋內志賀菌效價應不低於1：320，2/3家兔血清之凝集效價達到上述要求即爲合格。

3.4.1.4.8 2.1.4.8  質粒DNA檢測

用Kado-Liu法提取FS培養物的質粒DNA，經0.8%瓊脂糖凝膠電泳法檢測應呈該菌株典型的質粒圖譜。應有分子質量爲49MD（百萬道爾頓）和74MD的兩條大質粒帶及另兩條小質粒帶。

3.4.1.5 2.1.5  菌種保存

種子批應凍幹保存於8℃以下。

3.4.2 2.2 原液

3.4.2.1 2.2.1  生產用種子

工作種子批菌種檢定合格後可使用2年，但每次生產前必須檢查全部特性，合格後方可使用。

啓開凍幹工作種子批菌種，用滅菌PBS （pH7.2～7.4）或厚氏肉水復甦後鋪種厚氏斜面或接種厚氏液體培養基，置35～37℃培養18～20小時；第2～3代菌種採用厚氏液體培養基或厚氏斜面，35～37℃培養6～8小時。由此製備生產用種子。

3.4.2.2 2.2.2  生產用培養基

採用厚氏液體培養基或其他適宜培養基。

3.4.2.3 2.2.3  接種和培養

將純菌檢查合格的種子液接種於培養罐內，初始濃度達4×10⁸/ml以上爲宜，在適宜的溫度培養。培養過程中應取樣鏡檢，發現污染即廢棄。

3.4.2.4 2.2.4  收穫

在細菌對數生長期末時收穫菌體，離心後將菌體混懸於已滅菌的穩定劑中，製成原液。

3.4.2.5 2.2.5  原液檢定

按3.1項進行。

3.4.3 2.3 半成品

3.4.3.1 2.3.1  配製

將原液用含5%蔗糖、0.5%明膠的磷酸鹽緩衝液稀釋至1.0×10¹¹/ml，即爲半成品。

3.4.3.2 2.3.2  半成品檢定

按3.2項進行。

3.4.4 2.4 成品

3.4.4.1 2.4.1  分批

應符合“生物製品分批規程”規定。

3.4.4.2 2.4.2  分裝及凍幹

應符合“生物製品分裝和凍幹規程”規定。分裝後立即凍幹，凍幹過程中製品溫度不超過30℃。乾燥完畢後立即進行真空或充氮封口。

3.4.4.3 2.4.3  規格

復溶後每瓶1ml。含菌1.0×10¹¹，其中活菌數應不低於2.0×10¹⁰。

3.4.4.4 2.4.4  包裝

應符合“生物製品包裝規程”的規定。

3.5 3 檢定

3.5.1 3.1 原液檢定

3.5.1.1 3.1.1  純菌檢查

供試品接種於厚氏斜面，於35～37℃培養48小時，應無雜菌生長。

3.5.1.2 3.1.2  濃度測定

按“中國細菌濁度標準”測定濃度。

3.5.2 3.2 半成品檢定

3.5.2.1 3.2.1  純菌檢查

按3.1.1項進行。

3.5.2.2 3.2.2  活菌率測定

根據“中國細菌濁度標準”比濁濃度將供試品稀釋至總菌1.0×10¹¹/ml;採用平皿計數法檢測活菌數，活菌率應不低於25%。

3.5.3 3.3 成品檢定

除裝量差異和水分測定外，應按製品標示量加入滅菌PBS （pH7.2～7.4），復溶後進行其餘各項檢定。

3.5.3.1 3.3.1  鑑別試驗

將本品接種厚氏斜面，置35～37℃培養18～20小時後，取菌苔分別用福氏志賀菌羣3、4及Ⅱ型血清和宋內志賀菌Ⅰ相血清做玻片凝集試驗，應出現明顯凝集反應。

3.5.3.2 3.3.2  物理檢查

3.5.3.2.1 3.3.2.1  外觀

應爲乳白色或淡黃色的疏鬆體，加入滅菌PBS後應在1分鐘內溶解。

3.5.3.2.2 3.3.2.2  裝量差異

依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅰ A），應符合規定。

3.5.3.3 3.3.3  水分

應不高於3.0%（2010年版藥典三部附錄Ⅶ D）。

3.5.3.4 3.3.4  純茵檢查

按3.1.1項進行。

3.5.3.5 3.3.5  活菌數測定

採用平皿計數法檢測活菌數，應不低於2.0×10¹⁰/ml。

3.5.3.6 3.3.6  免疫原性試驗

取本品1瓶復溶後，接種於厚氏斜面，置35～37℃培養18～20小時，刮取菌苔予滅菌PBS （pH7.2～7.4），按2.1.4.7項進行。每10批製品抽檢1批進行本試驗。

3.5.3.7 3.3.7  豚鼠角結膜毒力試驗

按2.1.4.5項進行。

3.5.3.8 3.3.8  安全試驗

選用體重18～22g小鼠5只，並分別稱重；每隻灌服1.0×10¹⁰的菌量，觀察7天，小鼠應健存、體重增加。如不符合上述要求，可用10只小鼠複試1次。

3.5.4 3.4 稀釋劑檢定

每袋稀釋劑含碳酸氧鈉0.1～0.2g、維生素C鈉鹽0.05～0.1g、甜蜜素0.05～0.1g。加滅菌注射用水50ml溶解後測定。

3.5.4.1 3.4.1  pH值

應爲7.5～8.5（2010年版藥典三部附錄Ⅴ A）

3.5.4.2 3.4.2  微生物限度檢查

依法檢查（2010年版藥典三部附錄Ⅻ G），應符合規定。

3.6 4 保存、運輸及有效期

於2～8℃避光保存和運輸。自生產之日起，有效期爲12個月。

3.7 5 使用說明

應符合“生物製品包裝規程”規定和批准的內容。

口服福氏宋內菌痢疾雙價活疫苗使用說明

【藥品名稱】

通用名稱：口服福氏宋內菌痢疾雙價話疫苗

英文名稱：Dysentery Vaccine （Live） of S.flexneri andS.sonnei，Oral

漢語拼音：Koufu Fushi Songneijun Liji Shuangjia Huoyimiao

【成分和性狀】

本品系用可表達福氏2a和宋內志賀菌雙價菌體抗原的FS菌株，經培養收穫菌體，加入穩定劑凍乾製成。爲乳白色或略帶黃色的疏鬆體。

有效成分：重組痢疾FS菌株活菌體。

輔料：應列出全部批准的輔料成分。

【接種對象】

各年齡組人員均可服用本品。

【作用與用途】

服用本疫苗後，可使機體產生免疫應答。用於預防細菌性痢疾。

【規格】

每瓶1ml，含菌1.0×10¹¹，活菌數不低於2.0×10¹⁰。

【免疫程序和劑量】

全程免疫3次，每次間隔5～7天，成人首次服用1瓶，第2次、第3次各2瓶；6～l3歲兒童服成人半量；5歲以下兒童服成人1/3量。

用50ml涼開水溶解1包稀釋劑，製成稀釋液。開啓疫苗瓶，用所附吸管吸取稀釋液少許，加入到疫苗瓶內，將復溶後的本品移入稀釋液中，混勻後服用。

【不良反應】

常見不良反應：

（1）一過性輕度嘔吐、腹瀉，多數情況下2～3天自行消失。

（2）服用疫苗後可出現一過性發熱反應。其中大多數爲輕度發熱反應，持續1～2天可自行緩解，一般不需處理；對於中度發熱反應或發熱時間超過48小時者，可給予對症處理。

罕見不良反應：

（1）嚴重發熱反應：應給予對症處理，以防高熱驚厥。

（2）持續嘔吐、腹瀉超過3天及腹瀉次數超過5次／天以上，應給予對症處理。

極罕見不良反應：

服用疫苗後72小時內可能出現過敏性皮疹，應及時就診。

【禁忌】

（1）已知對該疫苗的任何成分過敏者。

（2）患急性疾病、嚴重慢性疾病、慢性疾病的急性發作期和發熱者。

（3）免疫缺陷、免疫功能低下或正在接受免疫抑制治療者。

（4）妊娠期婦女。

【注意事項】

（1）本品嚴禁注射！

（2）以下情況者慎用：家族和個人有驚厥史者、患慢性疾病者、過敏體質者、哺乳期婦女。

（3）本品與抗生素同時應用時可能影響疫苗的免疫效果。

（4）勿用熱水服用，以保證疫苗免疫效果。

（5）本品應在空腹或半空腹時服用。

（6）急、慢性胃腸道疾患者應暫緩使用。

（7）本品爲減毒活疫苗，不推薦在該疾病流行季節使用。

（8）本品與其他活疫苗的使用間隔至少1個月。

（9）嚴禁凍結。

【貯藏】

於2～8℃避光保存和運輸。

【包裝】

【有效期】

12個月。

【執行標準】

【批准文號】

【生產企業】

企業名稱：

生產地址：

郵政編碼：

電話號碼：

傳真號碼：

網  址：

3.8 版本

《中華人民共和國藥典》2010年版