3 丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒(酶聯免疫法)藥典標準
3.1 品名
3.1.1 中文名
3.1.2 漢語拼音
Bingxing Ganyan Bingdu KangtiZhenduan Shijihe (Meilianmianyifa)
3.1.3 英文名
Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis C Virus (ELISA)
3.2 定義、組成及用途
本品系用丙型肝炎病毒(HCV)抗原包被的微孔板和酶標記抗人IgG及其他試劑製成,應用間接酶聯免疫法原理檢測人血清或血漿樣品中的HCV抗體。
3.3 1 基本要求
生產和檢定用設施、原材料及輔料、水、器具、動物等應符合“凡例”的有關要求。
3.4 2 製造
3.4.1 2.1 專用原材料
3.4.1.1 2.1.1 HCV抗原
選用重組蛋白抗原或人工合成肽抗原,應包括結構區和非結構區。抗原的分子量、活性、純度應符合要求。
3.4.1.2 2.1.2 抗人IgG
可使用抗人IgG單克隆抗體或多克隆抗體。抗體的純度、活性應符合要求。
3.4.1.3 2.1.3 辣根過氧化物酶(或其他適宜標記的酶)
辣根過氧化物酶的RZ值應不低於3.0,其他標記用酶應符合相應的要求。
3.4.1.4 2.1.4 陽性對照用血清或血漿
3.4.1.5 2.1.5 陰性對照用血清或血漿
3.4.1.6 2.1.6 微孔板
CV(%)應不高於10%。
3.4.2 2.2 製備程序
3.4.2.1 2.2.1 包被抗原的純化
採用適宜的方法純化抗原,純化後抗原的分子量、純度、活性應符合要求。純化後的抗原於低溫下保存。
3.4.2.2 2.2.2 抗人IgG的純化
採用適宜的方法純化抗體,純化後抗體的純度、活性應符合要求。純化後的抗體於低溫下保存。
3.4.2.3 2.2.3 酶標記抗體的製備
抗體純化及檢定方法同2.2.2項,採用常規過碘酸鈉-乙二醇或其他適宜方法進行辣根過氧化物酶或其他酶標記,酶標記抗體應符合3.1.1~3.1.4項和3.1.7項要求,加入適當的保護劑後於低溫下保存。
3.4.2.4 2.2.4 包被抗原濃度和酶標記抗體濃度的選定
3.4.2.5 2.2.5 包被抗原板的製備
採用最佳包被濃度的抗原包被微孔板孔,經封閉、乾燥和密封等處理後,於2~8℃保存。對包被抗原板須抽樣進行檢定,應符合3.1.1~3.1.4項和3.1.7項要求。
3.4.2.6 2.2.6 陽性對照
選用HCV抗體檢測爲陽性的5份以上人血清或血漿混合,經60℃、1小時處理,除菌過濾,於2~8℃保存。
3.4.2.7 2.2.7 陰性對照
選用HCV抗體檢測爲陰性的5份以上人血清或血漿混合,經60℃、1小時處理,除菌過濾,於2~8℃保存。
3.4.2.8 2.2.8 反應時間的設置
檢測過程中加入檢測樣本後反應時間應不低於60分鐘,加入酶結合物後反應時間應不低於30分鐘,加入顯色液後顯色時間應不低於30分鐘。
3.4.3 2.3 半成品檢定
按3.1項進行。
3.4.4 2.4 成品
3.4.4.1 2.4.1 分批
3.4.4.2 2.4.2 分裝與凍幹
應符合“生物製品分裝和凍幹規程”,分裝或凍幹後保存於2~8℃。
3.4.4.3 2.4.3 規格
應爲經批准的規格。
3.4.4.4 2.4.4 包裝
3.5 3 檢定
3.5.1 3.1 半成品檢定
3.5.1.1 3.1.1 陰性參考品符合率
用國家參考品或經國家參考品標化的參考品進行檢定,應符合要求。
3.5.1.2 3.1.2 陽性參考品符合率
用國家參考品或經國家參考品標化的參考品進行檢定,應符合要求。
3.5.1.3 3.1.3 最低檢出限
用國家參考品或經國家參考品標化的參考品進行檢定,應符合要求。
3.5.1.4 3.1.4 精密性
用國家參考品或經國家參考品標化的參考品進行檢定,CV (%)應不大於15% (n=10)。
3.5.1.5 3.1.5 無菌檢查
依法檢查(2010年版藥典三部附錄Ⅻ A)含有蛋白質成分的液體組分,半成品加防腐劑分裝後,對留樣進行無菌檢查,採用直接接種法,應符合規定。
3.5.1.6 3.1.6 水分
凍幹組分水分應不高於3.0%(2010年版藥典三部附錄Ⅶ D)。
3.5.1.7 3.1.7 穩定性試驗
試劑各組分子37℃放置至少3天(有效期爲6個月),應符合3.1.1~3.1.4項要求。
3.5.2 3.2 成品檢定
3.5.2.1 3.2.1 物理檢查
3.5.2.1.1 3.2.1.1 外觀
液體組分應澄清;凍幹組分應呈白色或棕色疏鬆體。
3.2.1.2 溶解時間
凍幹組分應在3分鐘內溶解。
3.5.2.2 3.2.2 陰性參考品符合率
按3.1.1項進行。
3.5.2.3 3.2.3 陽性參考品符合率
按3.1.2項進行。
3.5.2.4 3.2.4 最低檢出限
按3.1.3項進行。
3.5.2.5 3.2.5 精密性
按3.1.4項進行。
3.5.2.6 3.2.6 穩定性試驗
3.6 4 保存及有效期
3.7 5 使用說明
3.8 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版