氰化高鐵Hb測定法

1 概述

Hb測定大致分爲：①根據Hb分子組成，測定總Hb法（全血鐵法）；②根據血液物理特性測Hb（比重法、折射儀法）；③根據Hb與O₂可逆性結合的特性測Hb（血氣分折法）；④根據Hb衍生物光譜特點進行的定量測定等4大類，其中有些方法簡單易行，而得到長期廣泛應用（如沙利法），但隨着技術的進步和研究的深入，缺點日漸顯著，逐漸被淘汰。爲統一Hb測定方法，1966年國際血液學標準化委員會推薦氰化高鐵Hb測定法作爲Hb測定標準法。1978年國際臨牀化學聯合會和世界病理學會聯合發表的國際性文件中重申了HiCN法。

2 別名

氰化高鐵Hb測定法

3 分類

臨牀血液檢查 > 紅細胞

4 取材

血液

5 氰化高鐵血紅蛋白測定法的原理

血液在Hb轉化液中溶血後，除SHb外各種Hb均可被高鐵氰化鉀氧化爲高鐵Hb再與CN^-結合生成穩定的棕紅色氰化高鐵Hb。HiCN最大波峯在540nm,最小吸收峯爲504nm。特定標準條件下，毫摩爾消光係數爲44L·mmol^－1·cm。因此，根據標本的吸光度，即可測定Hb濃度。

在沒有符合WHO標準的分光光度計的條件下，亦可用HiCN參考液制標準曲線，或計算出換算常數，間接計算Hb濃度（g/L）。

HiCN的消光係數是44mmol^－1·cm^－1，可根據下列公式進行計算Hb濃度：

A/44×64458（mg）/1000×251＝A×367.7＝Hb（g/L）

式中A是在540nm處HiCN吸光度，64458mg是Hb的毫克分子量，1000是將毫克轉換爲克，251是實驗時血液的稀釋倍數。但使用367.7這一常數是有條件的，是基於在儀器、比色杯、試劑及操作均嚴格的要求下。才能直接使用。

6 試劑

KCN。

7 操作方法

HiCN法。

8 正常值

成年男性（120～170）g/L；成年女性（110～150）g/L；新生兒（170～220）g/L。

9 化驗結果臨牀意義

（1）增多：

①生理性變化：新生兒、高山地區居民、劇烈體力勞動或體育運動、超力型人等。

②病理性變化：

A.紅細胞增多症（繼發性或相對性）：大量脫水所致血液濃縮（劇烈嘔吐、頻繁腹瀉、多汗、多尿、嚴重灼傷、長期禁食者）、機體長期缺氧（紫紺型先天性心臟病、肺源性心臟病、慢性高山病、嚴重肺氣腫）、慢性一氧化化碳中化碳中毒等。

B.真性紅細胞增多症。

（2）減少：

①生理性變化：妊娠中、後期的稀血癥。

②病理性變化：

A.失血性貧血：內臟出血、血友病、血小板減少性紫癜等。

B.溶血性貧血：先天性溶血性貧血（地中海貧血、蠶豆病、先天性非球形紅細胞貧血、先天性溶血性黃疸等），後天獲得性貧血（自身免疫性溶血性貧血、新生兒溶血病、陣發性睡眠性血紅蛋白尿、紅細胞碎片綜合徵、藥物性溶血性貧血：奎寧、奎尼丁、非那西丁等，毒物性溶血性貧血：苯、鉛、砷等，感染性溶血性貧血）等。

C.造血不良性貧血：缺鐵性貧血、惡性貧血、營養不良性貧血、再生障礙性貧血等。

10 附註

HiCN法具有操作簡單、顯色快且穩定（顯色後如何存得當可6年不退色），除SHb外各種Hb均可檢測、讀取吸光度後可直接定值等優點。決定測定結果準確的關鍵在於儀器的校正。在實際工作中，使用的分光光度計很難達到標準要求，往往通過K值來校正結果，定期地檢查K值十分重要。

HiCN法被列爲Hb測定的國際參考方法。但在實際應用中尚存在一些問題，其致命點是KCN是劇毒，管理使用不當可造成公害，此外高白細胞和高球蛋白血癥可致試劑混濁，以及HbCO轉化較慢的問題也未完全解決。

11 相關疾病

脫水、腹瀉、肺氣腫、一氧化碳中毒、真性紅細胞增多症、血小板減少性紫癜、溶血性貧血、黃疸、新生兒溶血病、陣發性睡眠性血紅蛋白尿、缺鐵性貧血、再生障礙性貧血