3 概述
尿素(Urea,ure)是哺乳動物蛋白質分解代謝的終產物。在肝臟通過鳥氨酸循環合成,主要由腎臟排泄。由於尿素的分子量小又易於溶解,擴散力極大,故腦脊液、漿膜腔積液、唾液、汗液中的尿素濃度基本一致。血尿素濃度主要受腎功能和蛋白質攝入量和分解代謝情況的影響。目前臨牀實驗室測定尿素最常用的方法有二乙酰-肟法,酶偶聯紫外分光光度法和鄰苯二甲醛法。
4 尿尿素的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿尿素的測定原理
二乙酰-肟與強酸作用生成二乙酰,後者與尿素在酸性條件下,縮合成紅色的二嗪衍生物。試劑中的硫氨脲和硫酸鎘具有增色和穩定作用。
4.5 試劑
(1)酸性試劑:加蒸餾水約100ml於1000ml三角燒瓶中,然後加入濃硫酸44ml及85%磷酸66ml,冷至室溫後,加入硫氨脲50mg及硫酸鎘(CdSO4·8H2O)2g,充分溶解後用蒸餾水稀釋至1000ml,置棕色試劑瓶中放冰箱保存,此試劑可穩定6個月。
(2)二乙酰-肟溶液:稱取二乙酰-肟20g,加蒸餾水約900ml,溶解後,用蒸餾水稀釋至1000ml,置棕色瓶中放冰箱保存,可穩定6個月。
(3)尿素標準應用液(70mmol/L):精確稱取乾燥純尿素0.420g,溶於20ml無氨蒸餾水中。並加至100ml加0.1g疊氮鈉防腐,放冰箱可穩定6個月。
(4)尿素標準應用液(7.0mmol/L):取10ml尿素標準應用液,用無氨蒸餾水稀釋至100ml即可。
4.6 操作方法
(1)試管分別標明空白管“B”、測定管“U”、標準管“S”。
(2)分別於測定管加血漿(清)20μl,標準管加標準應用液20μl,空白管加蒸餾水20μl。
(3)各加酸性試劑3ml、二乙酰-肟試劑3ml。
(4)充分混勻,煮沸加熱10min,取出、冷卻。
(5)520nm波長,空白管調零比色、讀取標準管及測定管吸光度。
4.7 正常值
2.0~7.1mmol/L。
4.8 化驗結果臨牀意義
(1)增高:
①腎臟疾病:如急性腎衰、慢性腎炎、腎動脈硬化、慢性腎盂腎炎、腎結核、腎腫瘤晚期等,腎功能輕度受損時,BUN可無變化。當60%~70%有效腎單位受損時,BUN才增高。因此BUN測定不能作爲早期腎功能受損的指標,但對腎功能衰竭,尤其是尿毒症診斷有特殊價值,並可判斷病情,估計預後。根據BUN測定結果可判斷腎功能衰竭的程度。A.腎功能衰竭代償期:Ccr下降,血Cr正常,BUN正常或輕度升高(<9mmol/L)。B.腎功能衰竭失代償期(氮質血癥期或尿毒症前期):Ccr明顯下降(<0.83ml/s),血Cr增高(>90mmol/L),BUN中度升高>9mmol/L)。C.尿毒症期:Ccr<0.33ml/s,血Cr>445μmol/L,BUN>20mmol/L。
②腎前性或腎後性因素引起尿量顯著減少或尿閉,如劇烈嘔吐、腹瀉引起的脫水、水腫、腹水、循環功能衰竭,以及尿路結石、前列腺肥大、腫瘤等引起的尿路梗阻。
③體內蛋白質分解過多,如大面積燒傷、大手術以後,上消化道出血、甲狀腺功能亢進及急性傳染病等。此時BUN增高,而其他腎功能試驗結果大致正常。
(2)降低:臨牀較少見。主要系肝實質受損,生成減少。如急性黃色肝萎縮、肝硬化、中毒性肝炎,嚴重貧血等。
4.9 附註
(1)尿素不能直接與二乙酰-肟反應,加入二乙酰-肟和強酸的目的是生成能與之反應二乙酰。加入Fe3+(或Cd2+)是爲消除反應過程中生成的羥胺的干擾,硫氨脲可使反應的敏感度提高20倍。以前許多書刊介紹的方法是將二乙酰-肟與硫氨脲配在一起,但兩者可生成針狀黃色物質,用硫氨脲配在酸試劑中克服了這一缺點。
(2)酸濃度與吸光度呈正相關,故酸濃度要準確。所用試管口徑,放人沸水中的傾斜角度要儘量一致,水液麪要在試管內液麪之上,煮沸時間以放入試管重新沸騰計。最好每次測定標準和質控。觀察尿素動態變化時,應囑患者恆定食入蛋白,並空腹採血。樣本不能立即分析時,可提取血清(或血漿)於密封樣杯中,置4℃存放可穩定7天。結果大於20mmol/L時,樣本改爲10μl,結果乘以2。
(3)此法雖然加入硫氨脲和鎘離子,在一定程度上增進了顯色強度和色澤穩定性,但仍有褪色現象(每小時約5%),所以,煮沸加熱顯色冷卻後,應及時比色。
(4)所用20μl加樣器務必校正無誤後方可使用。
(5)血漿(清)中尿酸、肌酐、氨基酸等含氮物對本試驗無干擾,溶血可能結果偏高,黃疸可能結果偏低。
(6)血漿(清)尿素含量與進食的蛋白質含量有密切的關係。在高蛋白飲食時,血漿(清)中的尿素含量可明顯升高,而低蛋白飲食時,則含量顯著降低。