短棒狀桿菌菌苗

1 拼音

duǎn bàng zhuàng gǎn jūn jūn miáo

2 註解

^[1]本品系用具有免疫調節及抑瘤等活性的厭氧棒狀桿菌經培養後製成懸液，加甲醛殺菌，以無菌緩衝生理鹽水稀釋而成。用於惡性腫瘤及其他疾病的免疫治療。

3 短棒狀桿菌菌苗製造及檢定規程

3.1 菌種

1.1　菌種來源

製造菌苗用的菌種採用厭氧短棒狀桿菌H75010或其他經試驗證明安全有效的菌株。生產用菌種和檢定用血清，由中國藥品生物製品檢定所分發或經同意。

1.2　菌種檢定

1.2.1　培養特性

檢定菌種用碎肉半流體、肝硫乙醇酸鈉培養基或其他適宜培養基。本菌應爲革蘭氏陽性短棒狀菌，有異染顆粒。

1.2.2　生化反應

應發酵葡萄糖，不發酵棉子糖、麥芽糖、蔗糖，液化明膠，靛基質、硝酸鹽反應陽性。

1.2.3　血清學試驗

應屬Ⅰ型。Ⅰ型血清由中國藥品生物製品檢定所供應或經同意。

1.2.4　脾激活試驗

用體重18～20g純種小白鼠（C₃H、615或C57BL），試驗及對照各10只，雌雄各半。試驗組每隻腹腔注射菌液0.5ml（15億菌），對照組注射同量生理鹽水，14天處死小白鼠，分別稱體重、脾重、計算脾指數，其指數應不低於2.0。

脾指數=試驗組脾重（mg）/總體重（g）÷對照組總脾重（mg）/總體重（g）

1.2.5　抑瘤試驗（艾氏腹水癌）

用體重18～20g純種小白鼠（C3H、615、C57BL或K-LACA），試驗及對照組各10只。雌雄各半，每隻腹腔注射活的瘤細胞100萬/0.2ml（用傳代5～8天非血性腹水）。試驗組於注射瘤細胞前1天及攻瘤後次日起，連續腹腔注射菌液0.25ml（15億）3～5次，每次間隔1天，對照組同時注射同量生理鹽水，由對照組小白鼠全部因癌性腹水死亡起點計算試驗組小白鼠存活率，觀察期最長30天，其存活率應不低於70%。

1.2.6　毒性試驗

小白鼠及分組要求同1.2.4項，稱總體重，試驗組每隻小白鼠腹腔注射0.5ml菌液（15億），對照組注射同量生理鹽水，觀察1周，到期稱總體重，不得較試驗前減輕或死亡。

1.3　菌種保存

菌種應凍幹，置2～8℃保存。

3.2 菌苗製造

2.1　製造用培養基

可用蛋白腖、肝或酵母透析液培養基或其他適宜培養基。

2.2　原液製造

2.2.1　接種

連續2～4次傳代的種子液接種於大瓶或培養罐，36～37℃厭氧培養4～6天。

2.2.2　採集

到期之培養物採集前逐瓶或逐罐鏡檢，有雜菌污染者廢棄。

2.2.3　殺菌

採集之菌體加入不超過0.5%(ml/ml)甲醛溶液，殺菌48小時後進行無菌試驗，不得有任何菌生長。

2.2.4　菌液洗滌

無菌試驗合格的菌液經離心沉澱後，用新鮮無菌生理鹽水洗滌3次，其最後一次用無菌生理鹽水做成懸液，加溫60～65℃1小時，逐瓶做無菌試驗，合格後合併。

2.2.5　原液合併

無菌試驗合格的菌液合併成批，放2～8℃保存。

2.3　原液檢定

2.3.1　鏡檢

菌形正常，至少觀察10個視野，應無雜菌。

2.3.2　無菌試驗

按《生物製品無菌試驗規程》進行。

2.3.3　濃度測定

按中國細菌濁度標準測定。

2.3.4　毒性試驗

按1.2.6項進行。

2.3.5　脾激活試驗

除脾指數應不低於1.5個，餘同1.2.4項。

2.3.6　抑瘤試驗

同1.2.5項。樣品應先按2.6項加溫處理。

2.4　菌液稀釋

2.4.1　稀釋

根據2.3.3項測定的原液濃度用無菌磷酸鹽緩衝液生理鹽水（pH7.2～7.4）稀釋成每ml含菌體60億±的菌苗。

2.4.2　分批

同一天由同一批原液稀釋的菌苗作爲1批，如1批有數瓶，應分亞批。

2.4.3　檢定

稀釋的菌苗應逐瓶做無菌試驗。

2.5　分裝

經2.4.3項檢定合格的菌苗在充分搖勻下分裝。

2.6　加熱處理

分裝安瓿後立即60℃±2℃加熱30分鐘。

3.3 成品檢定

3.1　理化檢定

菌苗應爲乳白色懸液，pH6.6～7.2，無異味，無搖不散的菌塊及異物。

甲醛含量不得超過0.006%（ml/ml）。

3.2　無菌試驗

按《生物製品無菌試驗規程》進行。

3.3　脾激活試驗

按2.3.5項進行

3.4　抑瘤試驗

按1.2.5項進行（檢定合格的原液在半年內分裝者，成品可不再作3.3～3.5項檢定）。

3.　5　濃度測定

按2.3.3項測定，每ml應含菌體60億±10%。

3.6　安全試驗

用18～20g白小鼠5只，每隻皮下注射菌苗0.5ml，觀察7日，不得有局部膿腫或死亡。

3.4 保存與效期

應保存於2～8℃。自原液採集之日起效期爲2年半。

4 短棒狀桿菌菌苗使用說明書

本品系用具有免疫調節及抑瘤等活性的厭氧短棒狀桿菌經培養後製成懸液，加甲醛殺菌，以無菌緩衝生理鹽水稀釋製成。本品爲乳白色懸液，無異味，無搖不散的菌塊及異物，每ml含菌體60億。

主要用於癌性胸水，結合手術治療早、中期肺癌。並可合理配合常規治療方法進行乳腺癌、鼻咽癌、晚期肺癌、黑色素瘤以及癌症的體表轉移竈等的治療。本菌苗對牛皮癬（銀屑病）、再生障礙性貧血、女陰白斑、感染性哮喘等也有一定療效。

4.1 劑量

濃度60億/ml菌苗，　初次注射0.5～1.0ml，以後可酌情逐次增加0.5ml，直至2ml。肌內、腔內及多點注射可酌情增量，最多4.0ml（皮下不宜超過2.0ml）。

4.2 用法

一般爲皮下或肌內注射。腔內注射以氯化鈉注射液進行適當稀釋。瘤內或瘤周採用上述劑量，多點注射以減輕局部反應，女陰白斑等可在患部塗抹，每日1次，每次1.0～2.0ml，症狀減輕，可根據需要，延長用藥間隔。

4.3 副作用

注射局部常有腫痛、硬結，持續約兩週，有時出現一過性發熱。胸腔注射可有一過性反應加重及發熱，可對症處理。

4.4 注意事項

1.發熱38℃以上，重症心血管病人，肝、腎功能異常者禁用。

2.治療前後，宜作血、尿常規及免疫指標等檢查，出現常規或免疫指標持續下降者停用，注射後當日勿過度疲勞。

3.用前須充分搖勻，有搖不散凝塊時勿用。

4.5 保存

保存於2～8℃暗處。

5 參考資料

1. ^ [1] ．"《中國生物製品規程》"．