2 山楂葉提取物藥典標準
2.1 品名
Shanzhaye Tiquwu
HAWTHORN LEAVE EXTRACT
2.2 來源
本品爲薔薇科植物山裏紅Crataegus pinnatifidaBge. var. major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的乾燥葉經加工製成的提取物。
2.3 製法
取山楂葉,粉碎成粗粉,加50%乙醇提取兩次(55~60℃),每次2小時,第一次加10倍量,第二次加8倍量,濾過,合併濾液,回收乙醇至濾液無醇味,用等量水稀釋,通過D101大孔吸附樹脂柱,依次用水及不同濃度的乙醇洗脫,收集相應.的洗脫液,回收乙醇,濃縮至相對密度約1.10(60℃)的清膏,噴霧乾燥,即得。
2.4 性狀
本品爲淺棕色至黃棕色的粉末;氣特異,味苦,有引溼性。
2.5 鑑別
取本品5mg,用甲醇2ml溶解,濾過,濾液作爲供試品溶液。另取牡荊素鼠李糖苷對照品,加甲醇製成每1ml含1mg的溶液,作爲對照品溶液。照薄層色譜法(2010年版藥典一部附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述兩種溶液各2~3μl,分別點於同一硅膠GF254薄層板上,以乙酸乙酯—甲醇—水(25:5:3)爲展開劑,展開,取出,晾乾,置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。
2.6 檢查
乾燥失重 取本品1g,精密稱定,置乾燥至恆重的稱量瓶中,在硫酸乾燥器中乾燥24小時,減失重量不得過2.0%(2010年版藥典一部附錄Ⅸ G)。
2.7 特徵圖譜
照高效液相色譜法(2010年版藥典一部附錄Ⅵ D)測定。
2.7.1 色譜條件與系統適用性試驗
以十八烷基硅烷鍵合硅膠爲填充劑;以四氫呋喃—甲醇—乙腈—乙酸—水(38:3:3:4:152)爲流動相;檢測波長爲330nm。理論板數按牡荊素鼠李糖苷峯計算應不低於2500。
2.7.2 參照物溶液的製備
取牡荊素鼠李糖苷對照品適量,精密稱定,加60%乙醇製成每1ml含100μg的溶液,即得。
2.7.3 供試品溶液的製備
取本品50mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加60%乙醇溶解並稀釋至刻度,即得。
2.7.4 測定法
分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,記錄色譜圖,即得。
供試品特徵圖譜中應呈現4個特徵峯,與參照物峯相應的峯爲S峯,計算各特徵峯與S峯的相對保留時間,應在規定值的±5%範圍之內。相對保留時間規定值爲:0.76(峯1)、1.00(峯S)、1.55(峯2)、1.94(峯3)。
對照特徵圖譜
峯1:牡荊素葡萄糖苷 峯S:牡荊素鼠李糖苷 峯2:牡荊素峯3:金絲桃苷
2.7.5 積分參數
斜率靈敏度爲5,峯寬爲0.04,最小峯面積爲10,最小峯高爲S峯峯高的1%。
2.8 含量測定
2.8.1 總黃酮
2.8.1.1 對照品溶液的製備
取蘆丁對照品適量,精密稱定,加乙醇製成每1ml含蘆丁0.20mg的溶液(必要時超聲處理使溶解),即得。
2.8.1.2 標準曲線的製備
精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml,分別置25ml量瓶中,各加水至6ml,加5%亞硝酸鈉溶液1ml,使混勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁溶液1ml,搖勻,放置6分鐘,加氫氧化鈉試液10ml,再加水至刻度,搖勻,放置15分鐘,以相應的試劑爲空白,照紫外—可見分光光度法(2010年版藥典一部附錄Ⅴ A),以500nm的波長處測定吸光度,以吸光度爲縱座標,濃度爲橫座標,繪製標準曲線。
2.8.1.3 測定法
取本品0.15g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入稀乙醇25ml,密塞,搖勻,超聲處理5分鐘,放置3小時以上,濾過,精密量取續濾液2ml,置25ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,作爲供試品溶液。精密量取供試品溶液2ml,置25ml量瓶中,照標準曲線的製備項下的方法,自“加水至6ml”起,依法測定吸光度,同時精密量取供試品溶液2ml,置25ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,作爲空白溶液。從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量,計算,即得。
本品按乾燥品計算,含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計,不得少於80. 0%。
2.8.2 牡荊素鼠李糖苷
照高效液相色譜法(2010年版藥典一部附錄Ⅵ D)測定。色譜條件與系統適用性試驗 同[特徵圖譜]項下。
2.8.2.1 對照品溶液的製備
取牡荊素鼠李糖苷對照品適量,精密稱定,加60%乙醇製成每1ml含100μg的溶液,即得。
2.8.2.2 供試品溶液的製備
取本品50mg,精密稱定,置50ml量瓶中,加60%乙醇溶解並稀釋至刻度,即得。
2.8.2.3 測定法
分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定.即得。
本品按乾燥品計算,含牡荊素鼠李糖苷(C27H30O14)不得少於8.8%。
2.9 貯藏
2.10 版本
《中華人民共和國藥典》2010年版