4 血清甘-鵝去氧膽酸醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 原理
血清中甘-鵝去氧膽酸(CDCG)與血漿蛋白相結合,用乙醇沉澱蛋白質並提取CDCG,和試劑中125Ⅰ-組胺-CDCG競爭性與抗體結合,根據競爭抑制基本原理,從標準曲線得出血清中CDCG濃度。
4.5 試劑
(1)抗血清的製備:取甘-鵝去氧膽酸(CDCG)和BSA,經EDC偶聯作爲免疫原,免疫於新西蘭雄兔(2.0~2.5kg),6個月後獲得優質抗血清(詳見甘-膽酸測定)。
(2)125Ⅰ-組胺-CDCG的製備:取CDCG和鹽酸組胺,經EDC的作用合成組胺-CDCG。用氯胺T氧化法標記。硅膠紙層析分離純化(詳見甘-膽酸測定)。
(3)0.05%Tween-PBS:取0.1mol/L KH2PO4 16ml,0.1mol/L Na2HPO4 84ml,NaCl 8.5g,明膠1g,Tween20 0.5ml,加水至1000ml。
(4)標準CDCG液:精稱取CDCG302μg溶於100ml無水乙醇中。工作標準液爲5~320pmol/ml,各取100μl至管中,蒸乾。
(5)300g/L:PEG液。
4.6 操作方法
(1)血清用無水乙醇稀釋50倍,離心去蛋白,吸取0.1ml,蒸乾。另取含不同濃度的CDCG標準管若干爲系列標準管。
(2)操作程序見表1。
放4℃後離心(3500r/min)15min,去上清液,測沉澱物(B)放射性。
(3)以LogitB/B0:對標準管含量的對數值計算直線迴歸方程,根據此方程計算樣品量。
4.7 正常值
國內有人報道121名正常對照者的空腹血清CDCG X±SD爲3.01±1.5nmol/ml,95%正常範圍爲0.46~5.9nmol/ml。男、女分別爲3.23±1.52nmol/ml和2.8±1.45nmol/ml。
CG/CDCG的比值爲0.34~1.22。
4.8 臨牀意義
CDCG是人體內膽汁酸主要成分之一,其理化性質和代謝途徑與CG相似。
(1)急性病毒性肝炎起病最初期,ALT和BiL尚未達到高峯時,CDCG和CG已急劇上升,表明血清CDCG和CG測定有助於早期診斷急性病毒性肝炎,其明顯升高的機制除因肝細胞對其攝取、排泌障礙外,可能與肝內膽汁鬱滯有關。
(2)慢性肝炎時,血清CDCG的含量仍增高,觀察CG/CDCG的比值更有價值。CG/CDCG比值持續<1提示預後不良。CG/CDCG>1或有上升趨勢,提示預後較好或肝功能有改善。慢性肝病CG/CDCG比值以肝硬化最低,其次慢性遷延性肝炎最低。這提示CDCG升高的幅度和CG/CDCG比值減低的程度與肝損傷的嚴重性有關。
4.9 附註
測定苷氨膽酸與苷鵝脫氧膽酸的比值可能具有診斷價值,因爲約80%肝細胞疾病患者該比值<1,而80%膽汁鬱積性疾病患者該比值>1。