3 概述
婦女受孕後,由胎盤絨毛膜滋養層細胞分泌產生人類絨毛膜促性腺激素(HCG),60~70天達高峯,以後逐漸降低,維持至分娩後。利用孕婦尿中存在人類絨毛膜促性腺激素進行檢測,提供妊娠依據,以及幫助診斷某些疾病,如葡萄胎、絨毛膜癌、睾丸畸胎瘤等。
8 試驗方法
現均採用免疫法,即製備HCG或β-HCG單克隆抗體,利用抗原抗體特異性結合反應,準確計算出所測標本的HCG值。
8.1 1.尿試紙法
將抗HCG抗體用膠體金標記,並固化於試紙條上,將試紙標有“MAX”一端浸入受檢尿液中,10~20s後取出試紙條,水平放置,3~5min後觀察試紙另一端白色區域的變化。結果判斷:對照線和診斷線均顯色(紅色),結果爲陽性;如診斷線不顯色,僅出現對照線,爲陰性;如對照線不顯色,說明試紙條有質量問題,需重新做。金標試紙法可快速準確測定尿中HCG,目前已經完全取代乳膠凝集試驗和生物測定法。
8.2 2.放射免疫測定法
放射免疫法(RIA)將放射性核素的高度靈敏性和準確性與抗原抗體結合的特異性相結合,可準確測定血液及尿液中的HCG及其亞單位的濃度。測定時將用核素標記的HCG及特異性抗體與待測標本混合,待測標本中HCG將與核素標記的HCG競爭性結合抗HCG抗體,由於抗體和核素標記HCG的數量是恆定的,通過測定標記HCG的值,可推算出待測定標本HCG的值。β-HCG的正常值爲5mg/ml,總HCG 正常值爲25mg/ml。放射免疫測定結果準確,可靠,但所用核素對環境造成一定影響,使用受到一定限制。
8.3 3.非放射免疫測定法
爲避免核素對環境污染,熒光標記的免疫測定法(FIA)、化學發光物質標記免疫測定方法(CIA)及酶標記的免疫測定法(EIA)應運而生,其中以CIA更爲穩定、準確、敏感,可實現檢驗過程的高度自動化,結果可重複性好,系統誤差小,具有試劑穩定、無污染、檢測時間短等優點。
8.4 4.妊娠試驗快速膠乳凝集抑制法
8.4.1 原理
孕婦尿液中的HCG與相應的抗HCG充分作用後,再加入HCG膠乳,因抗HCG已與尿中HCG結合,不再發生肉眼可見的凝集反應,而呈均勻的乳狀液爲陽性。如尿液中HCG含量少,抗HCG和HCG膠乳發生結合,而呈現凝集反應爲陰性。
8.4.2 試劑
(1)妊娠診斷試劑盒。
8.4.3 操作方法
(1)囑受檢者留取晨尿於一次性尿杯中送檢。
(3)加抗血清一滴,與尿液充分混勻,搖動玻片放置2~3min,再滴加膠乳抗原一滴,20℃,如溫度低,可延長時間,報告結果。
(6)試劑應存放2~8℃冰箱中,不能冰凍,否則膠乳上的HCG抗原易釋放。
(7)肉眼觀察結果不明顯時,可藉助顯微鏡觀察結果,如結果不清晰,可數日後複查。
10 化驗結果臨牀意義
快速膠乳凝集抑制法:主要用於妊娠5~6周的檢測,90%以上可呈陽性:葡萄胎、絨膜上皮癌、宮外孕等亦可呈陽性;死胎及流產1~2周後可由陽性轉爲陰性。
11 附註
(1)將尿液置於乾燥潔淨的容器內送檢。白帶多的婦女,可取中段尿液。其中,採用雙抗體夾心酶免疫法檢測時,如停經超過40天者應將尿液作1∶5稀釋後再測定。
(2)在葡萄胎、絨毛膜癌、睾丸畸胎瘤患者的尿中,人類絨毛膜促性腺激素含量要較正常孕婦尿中明顯升高,可將尿液高度稀釋後進行快速膠乳凝集抑制法試驗。仍呈陽性,可作爲鑑別診斷。
(3)除正常妊娠外,過期流產或不全流產而胎盤仍存留者,也可使快速膠乳凝集抑制法呈陽性反應。經人工流產刮宮後無胎盤殘留者,可轉陰性反應。在雙胎妊娠或合併妊娠中毒症時,將原尿稀釋後再做快速膠乳凝集抑制法試驗仍呈陽性,但稀釋度一般不會很高。
(4)當患者尿中人類絨毛膜促性腺激素含量較低時,快速膠乳凝集抑制法試驗不足顯示陽性反應,可將尿液人類絨毛膜促性腺激素濃縮30倍、60倍.可提高靈敏度。主要用於葡萄胎清除術或絨毛膜癌術後療效觀察,來說明治療徹底情況和有無復發。
12 注意事項
採集尿樣應新鮮,並立即送檢。