3 概述
5＇-核苷酸酶（5＇-NT）是一種對底物特異性不高的水解酶，可作用於多種核苷酸。此酶廣泛存在於人體組織，如肝、膽、腸、腦、心、胰等。定位於細胞質膜上，在肝內此酶主要存在於膽小管和竇狀隙膜內。5＇-NT測定主要是比色法，操作麻煩，難以自動化，但試劑易得，適用於基層單位應用。
5 5＇-核苷酸酶的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 5＇-核苷酸酶的測定原理
5＇-核苷酸酶比色法：5＇-NT作用於5＇-磷酸腺嘌呤單核苷酸（5＇-AMP），生成腺嘌呤核苷和磷酸，利用測無機磷的方法使其顯色，顏色深淺與5＇-NT活性呈正相關。
5.4 試劑
（1）0.04mol/L巴比妥緩衝液（pH 7.5）：稱取巴比妥鈉8.25g，溶於0.2mol/L HCl 140ml，調pH至7.5（37℃），加蒸餾水稀釋至1000ml。
（2）10mmol/L AMP基質液：精稱5＇-AMP 347mg，加0.1mol/L NaOH 18ml，加蒸餾水至100ml，置冰箱保存。
（3）0.1mol/L氯化鎳溶液：稱取氯化鎳（NiCl·6H2O）4.75g，用蒸餾水溶解並稀釋至200ml。
（4）0.02mol/L硫酸錳溶液：稱取MnSO4·H2O 338mg，用蒸餾水溶解並稀釋至100ml。
（5）100g/L三氯醋酸。
（6）2.4mol/L醋酸鹽緩衝液（pH4.0）：稱取硫酸銅（CuSO4·5H2O）2.5g，醋酸鈉（CH3COONa·3H2O）46g，加2mol/L醋酸（冰醋酸115ml，以蒸餾水稀釋至1L）至1000ml，用結晶醋酸鈉或冰醋酸調pH至4.0。
（7）50g/L鉬酸銨溶液：稱取5g鉬酸銨[（NH4）6Mo7O24·4H2O]溶於蒸餾水並稀釋至100ml。
（8）還原劑：稱米吐爾（硫酸對甲基氨基酚AR）2g，溶於80ml蒸餾水中，加亞硫酸鈉（Na2SO3·7H2O）10g（或無水亞硫酸鈉5g），加蒸餾水至100ml，過濾後置棕色瓶內冰箱保存，如變爲棕色且有沉澱，則還原性降低，應重配。
（9）磷標準貯存液（6mmol/L）：精稱KH2PO40.408g，用蒸餾水溶解並稀釋至500ml，加氯仿數滴防腐。
（10）磷標準應用液（0.06mmol/L）：取磷標準貯存液1ml，加100g/L三氯醋酸溶溶液至100ml，4℃冰箱可穩定4周。
5.5 操作方法
按表1操作。
混合後5min，用680nm波長比色，以蒸餾水調零，讀取各管吸光度。
5.6 正常值
2～17U/L。
5.7 化驗結果臨牀意義
5＇-NT測定主要用於肝膽系統疾病的診斷和骨骼疾病的鑑別診斷。血清5＇-NT活性升高主要見於肝膽系統疾病，如阻塞性黃疸、肝癌、肝炎等，其活性變化與ALP一致。但骨骼系統疾病，如腫瘤轉移、畸形性骨炎、佝僂病、甲狀旁腺功能亢進等，通常ALP活性升高，而5＇-NT正常。因此ALP和5＇-NT同時測定有助於肝膽和骨骼系統疾病的鑑別診斷。
5.8 附註
（1）用血漿測定可引起混濁，與金屬離子螯合的抗凝劑會干擾鎂的激活作用。
（3）本法酶促反應也可用30min，其計算結果時的係數應改爲20。