3 概述
食品添加劑ε-聚賴氨酸鹽酸鹽從澱粉酶產色鏈黴菌(Streptomyces. diastatochromogenes)受控發酵培養液經離子交換樹脂吸附、解吸、提純而來,可作爲防腐劑用於水果、蔬菜、豆類、食用菌、大米及製品、小麥粉及其製品、雜糧製品、肉及肉製品、調味品、飲料類。國家衛生計生委於2014年4月3日2014年第5號公告《關於批准ε-聚賴氨酸等4種食品添加劑新品種等的公告》批准ε-聚賴氨酸爲食品添加劑新品種[1]。
8 質量規格要求
8.1 生產工藝
從澱粉酶產色鏈黴菌(Streptomyces. diastatochromogenes)受控發酵培養液經離子交換樹脂吸附、解吸、提純的食品添加劑ε-聚賴氨酸鹽酸鹽。
8.2 技術要求
8.2.1 感官要求
感官要求應符合表1的規定。
表1 感官要求
8.2.2 理化指標
理化指標應符合表2的規定。
表2 理化指標
9 附錄A 檢驗方法
9.1 A.1 安全警示
試驗方法規定的一些試驗過程可能導致危險情況。操作者應採取適當的安全和防護措施。
9.2 A.2 一般規定
本標準所用試劑和水,在沒有註明其他要求時,均指分析純試劑和GB/T 6682中規定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、製劑及製品,在沒有註明其他要求時,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的規定製備。試驗中所用溶液在未註明用何種溶劑配製時,均指水溶液。
9.3 A.3 鑑別試驗
9.3.1 A.3.1 試劑和材料
A.3.1.1 鹼性硝酸鉍溶液:鹼性硝酸鉍0.85 g加乙酸10 mL及水40 mL溶解。
A.3.1.2 碘化鉀溶液:碘化鉀8 g加水20 mL溶解。
A.3.1.3 Dragendorf試液:鹼性硝酸鉍溶液5 mL、碘化鉀溶液5 mL、乙酸20 mL和水100 mL混合而成。現用現配。
A.3.1.4 pH 6.8的0.1 mol/L磷酸緩衝溶液。
A.3.1.5 甲基橙試液:0.1 mmol/L。
9.3.2 A.3.2 分析方法
A.3.2.1 0.1%試樣液1 mL加Dragendorf試液1 mL,應產生紅褐色沉澱。
A.3.2.2 取試樣0.1 g溶於pH6.8的0.1 mol/L磷酸緩衝溶液100 mL中,取試樣溶液1 mL,加甲基橙試液1 mL,應產生紅褐色沉澱。
A.3.2.3 參照GB/T5009.124方法將試樣水解成單一氨基酸,製成含本品約1 mg/mL的近中性水溶液,作爲試樣溶液;精密稱取賴氨酸鹽酸鹽標準樣品適量,加水稀釋成1 mg/mL的溶液,作爲標準溶液;另取試樣適量,製成含試樣約1 mg/mL的水溶液,作爲對照液;另取賴氨酸鹽酸鹽標準樣品與精氨酸標準樣品各適量,置於同一量瓶中,用水溶解並稀釋成0.4 mg/mL的溶液,作爲系統適用性試驗溶液。按照薄層色譜法(《中國藥典》附錄V B)試驗,吸取上述四種溶液各2 μL,分別點於同一硅膠G薄層板上,以正丁醇/水/冰乙酸溶液爲展開劑,展開液由原始線上升高於10 cm處時,晾乾,90 ℃乾燥10 min,噴以茚三酮的丙酮溶液,90℃加熱至斑點出現,立即檢視。標準溶液應顯示一個清晰斑點;系統適應性試驗溶液應顯示兩個完全分離的斑點,且其中一個斑點與標準溶液斑點色澤相似,Rf值相等;試樣溶液所得斑點與標準溶液所示斑點,色澤相似,Rf值相等。對照液應在原點處顯示一個清晰斑點,沒有其它斑點出現。
9.4 A.4 ε-聚賴氨酸鹽酸鹽含量的測定
9.4.1 A.4.1 方法提要
利用高效液相色譜測定ε-聚賴氨酸鹽酸鹽的含量。
9.4.2 A.4.2 試劑和材料
A.4.2.1 磷酸氫二鉀。
A.4.2.2 硫酸鈉。
A.4.2.3磷酸。
A.4.2.4乙腈。
9.4.3 A.4.3 儀器和設備
9.4.4 A.4.4 參考色譜條件:
A.4.4.1 檢測波長:215 nm;
A.4.4.2 色譜柱:C18色譜柱,柱爲4.6 mm×250 mm。或其他等同分離效果的色譜柱和色譜條件。
A.4.4.3 流速:0.4 mL/min;
A.4.4.4 定量進樣器100 µL。
9.4.5 A.4.5 分析步驟
A.4.5.1 流動相的製備
將1.7 g的磷酸氫二鉀和1.42 g的硫酸鈉溶於800 mL的水中,用磷酸調pH至3.4後,用水定溶至1000 mL,取此溶液920 mL加入80 mL乙腈,混勻。用0.45 µm的膜過濾器過濾。
精確稱量約20.00 mg ε-聚賴氨酸鹽酸鹽標準樣品,加入到25 mL的容量瓶中,加流動相到刻度下1 cm處超聲10 min,待冷至室溫用流動相定容至刻度混合均勻。將此溶液用0.45 µm的膜過濾器過濾,待用。
精確稱量約20.00 mg試樣,加入到25 mL的容量瓶中,加流動相到刻度下1 cm處超聲10 min,待冷至室溫用流動相定容至刻度混合均勻。將此溶液用0.45 µm的膜過濾器過濾,待用。
A.4.5.4 測定
分別向液相色譜儀注入標準樣品溶液和試樣溶液,記錄主峯的峯面積,進樣量爲20 µL。
9.4.6 A.4.6 結果計算
ε-聚賴氨酸鹽酸鹽含量(以幹品計)的質量分數w1,按公式(A.1)計算:
w1= [(Ws × Ps / Wu) (Ru / Rs)×100 %]÷(1-w2)………………(A.1)
式中:Ws——製備標準樣品溶液所用的ε-聚賴氨酸鹽酸鹽標準樣品的質量(mg);
Ps——製備標準樣品溶液所用的ε-聚賴氨酸鹽酸鹽標準樣品含量(%);
w2——A.5中測得的乾燥減量的質量分數。
注:系統適用性爲重複注入標準樣品溶液三次,所得響應面積的相對平均偏差小於1.0%。
9.5 A.5 乾燥減量的測定
按GB 5009.3中的第一法,直接乾燥法進行測定。
9.6 A.6 pH的測定
10 參考資料
- ^ [1] 國家衛生計生委."關於批准ε-聚賴氨酸等4種食品添加劑新品種等的公告(2014年第5號)".