2 英文參考
cultured ox gallstone[湘雅醫學專業詞典]
3 體外培育牛黃藥典標準
3.1 品名
Tiwai Peiyu Niuhuang
BOVIS CALCULUS SATIVUS
3.2 來源
本品以牛科動物牛Bos taurus domesticus Gmelin的新鮮膽汁作母液，加入去氧膽酸、膽酸、複合膽紅素鈣等製成。
3.3 性狀
本品呈球形或類球形，直徑0.5～3cm。表面光滑，呈黃紅色至棕黃色。體輕，質鬆脆，斷面有同心層紋。氣香，味苦而後甘，有清涼感，嚼之易碎，不粘牙。
3.4 鑑別
（1）取本品粉末少量，用清水調和，塗於指甲上，能將指甲染成黃色。
（2）取本品粉末少許，用水合氯醛試液裝片，不加熱，置顯微鏡下觀察：不規則團塊由多數黃棕色或棕紅色小顆粒集成，稍放置，色素迅速溶解，並顯鮮明金黃色，久置後變綠色。
（3）取本品粉末少量，加三氯甲烷1ml，搖勻，再加硫酸與濃過氧化氫溶液（30%）各2滴，振搖，溶液即顯綠色。
（4）取本品粉末0.lg，加鹽酸1ml和三氯甲烷10ml，充分振搖，混勻，三氯甲烷液呈黃褐色，分取三氯甲烷液，加氫氧化鋇試液5ml，振搖，即生成黃褐色沉澱。分離除去水層和沉澱，取三氯甲烷液約1ml，加醋酐1ml與硫酸2滴，搖勻，放置，溶液呈綠色。
（5）取本品粉末10mg，加三氯甲烷20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸於，殘渣加乙醇1ml使溶解，作爲供試品溶液。另取膽酸對照品、去氧膽酸對照品，加乙醇製成每1ml各含2mg的混合溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，以異辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸（15：7：5）爲展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
3.5 檢查
3.5.1 水分
不得過9.0%（附錄ⅨH第一法）。
3.5.2 遊離膽紅素
取本品細粉10mg，精密稱定，置5ml量瓶中，加三氯甲烷4ml，微溫，放冷，加三氯甲烷至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，照紫外一可見分光光度法（附錄V A），在453nm波長處測定吸光度。吸光度不得過0.70。
3.6 含量測定
3.6.1 膽酸
取本品細粉0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml．密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液25ml，蒸乾，殘渣加20%氫氧化鈉溶液10ml，加熱迴流2小時，冷卻，加稀鹽酸19ml調節pH值至酸性，用乙酸乙酯提取4次（25ml、25ml、20ml、20ml），乙酸乙酯液均用同一鋪有少量無水硫酸鈉的脫脂棉濾過，濾液合併，回收溶劑至幹，殘渣用甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作爲供試品溶液。另取膽酸對照品適量，精密稱定，加甲醇製成每1ml含0.48mg的溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，精密吸取供試品溶液2μl、對照品溶液1μl與3μl，分別交叉點於同一硅膠G薄層板上，以異辛烷乙酸丁酯冰醋酸一甲酸（8：4：2：1）爲展開劑，展距14～17cm，取出，晾乾，噴以30%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法（附錄Ⅵ B薄層色譜掃描法）進行掃描，波長：入s=380nm， 入R=650nm，測量供試品吸光度積分值與對照品吸光度積分值，計算，即得。
本品按乾燥品計算，含膽酸（C24H4005）不得少於6.0%。
3.6.2 膽紅素
對照品溶液的製備 取膽紅素對照品10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，用三氯甲烷溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得（每1ml中含膽紅素10μg）。
標準曲線的製備 精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分別置具塞試管中，加乙醇至9ml，各精密加入重氮化溶液（甲液：取對氨基苯磺酸0.lg，加鹽酸1.5ml與水適量使成100ml。乙液：取亞硝酸鈉0.5g，用水溶解並稀釋至100ml，置冰箱內保存。臨用時取甲液10ml與乙液0.3ml，混勻）1ml，搖勻，在15～20℃的暗處放置1小時，以相應的試劑爲空白，照紫外一可見分光光度法（附錄V A），在533nm波長處測定吸光度，以吸光度爲縱座標、濃度爲橫座標，繪製標準曲線。
測定法取本品細粉約10mg，精密稱定，置錐形瓶中，加三氯甲烷一乙醇（7：3）的混合溶液60ml、鹽酸l滴，搖勻，置水浴上加熱迴流30分鐘，放冷，轉移至100ml棕色量瓶中，容器用少量上述混合溶液洗滌，洗液併入同一量瓶中，加上述混合溶液至刻度，搖勻。精密量取上清液10ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻。精密量取3ml，置具塞試管中，照標準陸線的制各項下的方法，自“加乙醇至9ml”起，依法測定吸光度，從標準藍線上讀出供試品溶液中含膽紅素的重量（mg），計算，即得。
本品按乾燥品計算，含膽紅素（C33H36N406）不得少於35.0%。
3.7 性味與歸經
甘，涼。歸心、肝經。
3.8 功能與主治
清心，豁痰，開竅，涼肝，息風，解毒。用於熱病神昏，中風痰迷，驚癇抽搐，癲癇發狂，咽喉腫痛，口舌生瘡，癰腫療瘡。
3.9 用法與用量
0.15～0.35g，多入丸散用。外用適量，研末敷患處。
3.10 注意
孕婦慎用；偶有輕度消化遒不適。
3.11 貯藏
3.12 附：1．去氧膽酸
本品由牛膽汁經提取、加工製成。
3.12.1 性狀
本品爲白色的結晶性粉末。氣微，味微苦。
3.12.2 鑑別
取本品10mg，加乙醇Sml使溶解，作爲供試品溶液。另取去氧膽酸對照品，加乙醇製成每1ml含2mg的溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各2μ1，分別點於同一硅膠G薄層板上，以異辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸（15：7：5）爲展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
3.12.3 檢查
乾燥失重取本品，在105℃乾燥4小時，減失重量不得過0.5%（附錄ⅨG）。
3.12.4 熾灼殘渣
不得過0.2%（附錄Ⅸ J）。
3.12.5 含量測定
取本品約0.5g，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）60ml，置水浴中加熱使溶解，冷卻，加酚酞指示液數滴及新沸過的冷水20ml，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，近終點時加新沸過的冷水lOOml，繼續滴定至終點。每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當於39.26mg的去氧膽酸（C24H40O4）。
本品按乾燥品計算，含去氧膽酸（C24H40O4）不得少於95.0%。
3.12.6 用途
體外培育牛黃的原料。
3.12.7 貯藏
密封。
3.13 2．膽酸
本品由牛、羊膽汁或膽膏經提取、加工製成。
3.13.1 性狀
本品爲白色的結晶性粉末。氣微，味苦。
3.13.2 鑑別
取本品10mg，加乙醇5ml使溶解，作爲供試品溶液。另取膽酸對照品，加乙醇製成每1ml含2mg的溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，以異辛烷一乙酸乙酯一冰醋酸（15：7：5）爲展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
3.13.3 檢查
乾燥失重取本品，在105℃乾燥4小時，減失重量不得過0.5%（附錄ⅨG）。
3.13.4 熾灼殘渣
不得過0.2%（附錄ⅨJ）。
3.13.5 含量測定
取本品約0.4g，精密稱定，置250ml錐形瓶中，加水20ml和乙醇40ml，用表面皿覆蓋，置水浴中緩緩加熱使完全溶解，冷卻，加酚酞指示液5滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）漓定。每1ml氫氧化鈉滴定液 （0.1mol／L）相當於40.86mg的膽酸（C24H40O5）。
本品按乾燥品計算，含膽酸（C24H40O5）不得少於95.0%。
3.13.6 用途
體外培育牛黃的原料。
3.13.7 貯藏
密封。
3.14 3．複合膽紅素鈣
3.14.1 性狀
本品爲棕紅色或棕黃色的粉末。味微腥。
3.14.2 鑑別
取本品粉末5mg，加三氯甲烷15ml，加鹽酸溶液（5→10）0.1ml，超聲處理30分鐘，加三氯甲烷35ml，搖勻，濾過，取續濾液作爲供試品溶液。另取膽紅素對照品，加三氯甲烷製成每1ml含0.1mg的溶液，作爲對照品溶液。照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一硅膠G薄層板上，以甲苯一乙酸乙酯一冰醋酸（10：1：0.5）爲展開劑，展開，取出，晾乾。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
3.14.3 檢查
水分不得過5.0%（附錄ⅨH 第一法）。
3.14.4 含量測定
對照品溶液的製備 取膽紅素對照品10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，用三氯甲烷溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得（每1ml中含膽紅素10μg）。
標準曲線的製備 精密量取對照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分別置具塞試管中，加乙醇至9ml，各精密加入重氮化溶液（甲液：取對氨基苯磺酸0.lg，加鹽酸1.5ml與水適量使成100ml。乙液：取亞硝酸鈉0.5g，用水溶解並稀釋至100ml，置冰箱內保存。臨用時，取甲液10ml與乙液0.3ml，混勻）1ml，搖勻，在15～20℃的暗處放置1小時，以相應的試劑爲空白，照紫外可見分光光度法（附錄V A），在533nm波長處測定吸光度，以吸光度爲縱座標、濃度爲橫座標，繪製標準曲線。
測定法 取本品細粉，約10mg，精密稱定，置錐形瓶中，加三氯甲烷一乙醇（7：3）的混合溶液60ml、鹽酸1滴，搖勻，置水浴上加熱迴流30分鐘，放冷，轉移至100ml棕色量瓶中，容器用少量上述混合溶液洗滌，洗液併入同一量瓶中，加上述混合溶液至刻度，搖勻。精密量取上清液10ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻。精密量取3ml，置具塞試管中，照標準曲線的製備項下的方法，自“加乙醇至9ml”起，依法測定吸光度，從標準隨線上讀出供試品溶液中含膽紅素的重量（mg），計算，即得。
本品按乾燥品計算，含膽紅素（C33H36N406）不得少於43.0%。
3.14.5 用途
體外培育牛黃的原料。
3.14.6 貯藏
密封。
3.15 出處
《中華人民共和國藥典》2010年版