3 概述
鉛（plumbum，Pb），原子量207.19，銀灰色軟金屬。比重11.35（20℃），熔點327.4℃，沸點1620℃。化合價2和4。不溶於水、稀鹽酸和硫酸。可溶於硝酸、醋酸和鹼液。加熱到400～500℃時，即產生大量蒸氣。鉛蒸氣在空氣中迅速氧化成氧化鉛（Pb2O）。常見的無機鉛化合物有一氧化鉛（PbO，密陀僧）、二氧化鉛、三氧化二鉛（Pb2O3，樟丹）、四氧化三鉛（Pb3O4，鉛丹）、氯化鉛、硫化鉛（PbS，黑鉛丹，黑錫丹）、硫酸鉛、硝酸鉛、醋酸鉛及鹼式碳酸鉛[2Pb[O2·Pb（OH）2]，鉛白]等。日常生活中，從消化道（用含鉛容器、食品、藥物）和呼吸道如汽車廢氣吸收過量的鉛＞0.5mg/d，可引起鉛中毒，對健康造成危害，主要損害神經系統和血液系統。
4 全血鉛的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 全血鉛的測定原理
（1）紅細胞原卟啉的熒光光度測定法：原卟啉（EP）爲一熒光物質。用乙酸乙酯-乙酸混合液使紅細胞破壞，卟啉溶出，再用鹽酸提取其中之EP，在激發光403nm，發射光605nm處顯示其熒光譜峯，可根據熒光強度進行定量。
（2）石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛：血樣用基體改進劑溶液稀釋後，直接注入熱解塗層石墨管中，在設定的不同溫度下，順序進行乾燥、灰化和原子化，然後在283.3nm波長下讀取吸光度，在標準曲線下查出與吸光度值相對應的B-Pb濃度。
（3）紅細胞ZPP快速測定：採用表面熒光法測定血液中鋅原卟啉（ZPP）的含量。人體紅細胞內含一定量ZPP，受特定藍色光激發時，ZPP產生熒光，且熒光強度與ZPP含量成一定比例關係。測定熒光強度即可推算ZPP含量。
4.5 試劑
①濃鹽酸。
③0.5mol/L鹽酸。
④生理鹽水。
⑤硅藻土生理鹽水懸浮液，2.5g/100ml。
⑥原卟啉標準貯存液（EP 50μg/ml）：稱取原卟啉0.50mg，加濃鹽酸1.2～1.3ml，待原卟啉溶解後，轉入10ml容量瓶。加水到刻度。
⑦原卟啉標準工作液（EP 0.1μg/ml）：臨用時用乙酸乙酯-乙酸混合液將50μg/ml EP稀釋500倍。
（2）石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛：
①基體改進劑溶液：含2g/L磷酸二氫銨，5ml/L Triton X-100，0.2%硝酸。
②鉛標準液：
A.鉛標準儲備液（1000.0mg Pb/L）：推薦使用標準計量單位（如中國計量科學研究院）提供的鉛標準品。也可按實驗室鉛標準液製備標準操作規程（SOP）自配。準確稱取高純鉛（光譜純）0.1000g置於100ml石英燒杯中，溶於1.0ml濃H3NO3中，加重蒸餾水稀釋至100ml。或稱取0.1599g硝酸鉛（100℃乾燥2h），用1mol/L硝酸溶解並稀釋至100ml。存於聚乙烯瓶中，冰箱內保存。
B.鉛標準應用液（Pb 1000μg/L）：用基體改進劑溶液將鉛儲備標準液逐級稀釋成Pb 1000μg/L。
4.6 操作方法
①儀器操作條件：930型熒光光度計10mm熒光比色皿。用42#（581光電比色計濾光片，420nm），爲激發濾光片和55#（550±10nm）發射濾光片。
②測定：取10ml具塞試管按表1配製標準系列和測定管。各管分別置旋渦混合器上混合10～15s後，於2500r/min離心，取上清液，各加0.5mol/L鹽酸4ml，加塞，再混合20～30s，吸去上層有機溶劑，取下層鹽酸溶液測定熒光強度。標準管讀數（格）減去空白管讀數（格）後繪製標準曲線。
（2）石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛：
①儀器工作條件設置：原子吸收分光光度計（PE 3100型），具L＇vov平臺的熱解塗層石墨管和自動進樣品。測定B-Pb的儀器參數設置：波長：283.3nm；狹縫：1.3nm；積分吸收值信號：讀數延遲0s，積分時間3.5s；燈電流10mA；重複3次；時間-溫度程序（表2）持續時間：69s；10倍稀釋樣品注入體積：12μl；每份樣品測定週期：106s。
②標準曲線製作：取8個具塞聚丙烯塑料離心管（1.5ml），按表3製備標準管，混合後從各管取出12μl，以手工進樣或自動進樣方式，按所設定的儀器操作條件，讀取各管的積分吸光度值（A．s）。1～7號管的A．s分別減去“0”管的A．s。以鉛的含量爲橫座標，測得的吸光度爲縱座標，繪製標準曲線。本法的標準曲線性範圍可達100μg Pb/L。
③樣品測定：將K2EDTA抗凝的靜脈、血或末梢血充分混合後，取50μl，加450μl基體改進劑溶液，混合。手工進樣時，取12μl注入石墨爐；採用自動進樣方式時，自動進樣器自動吸取12μl混合的稀釋血樣注入石墨管平臺。按所設定的儀器操作條件，讀取各管積分吸光度值（A．s）。
（3）紅細胞ZPP快速測定：
①儀器：ZPP-3800型血液鋅原卟啉測定儀（廣東省職業病防治院研製）：24mm×24mm蓋玻片（上海產）。
②血樣測定：取20～30μl末梢血樣滴入蓋玻片，蓋滿儀器測定區域，無氣泡，攪拌後推入進樣臺，待讀數穩定後讀取（或打印）結果。
③質量控制：用與血樣測定相同的操作，測定紅細胞ZPP標準物質的ZPP含量，結果應在其標稱值範圍內。
4.7 正常值
①正常參考值：不接觸鉛者血EP範圍57～511/μg/L（0.10～0.91/μmol/L），中位數爲227μg/L（n＝46）。全國範圍的EP正常參考值調查結果爲幾何平均數（GM）＝280μg/L（0.50μmol/L），P95參考值範圍爲＜610μg/L（1.09μmol/L）（n＝978）。
②可接受上限值：用判別分析法求得的職業鉛接觸人羣的EP可接受上限值爲1.29mg/L（2.30μmol/L）（n＝902）。
③診斷下限值：用判別分析法求得的職業性鉛中毒的EP診斷下限值爲2.06mg/L（3.67μmol/L）（n＝698）。
（2）石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛：爲滿足鉛中毒防治工作的需要，需要制訂B-Pb的三種水平（三值），即正常參考值，可接受上限值以及診斷下限值。
①正常參考值：由於不同國家和地區的地理環境、生活習慣以及社會與經濟條件不同，各國報道的正常參考值差別較大。如1982年在嚴格的質控條件下進行了全球性B-Pb監測，世界十大城市教師B-Pb值幾何均數，北京爲0.31μmol/L（64μg/L），墨西哥城則爲1.09μmol/L（225μg/L）。近年國外出版的有關專著中認爲非接鉛人羣B-Pb正常參考值爲100～200μg/L（0.483～0.965μmol/L）。根據1991～1993年全國不同地區非接鉛正常人羣1588人的B-Pb檢測所求得的我國B-Pb正常值上限爲0.90μmol/L（187μg/L）（表4）。吳榮桂等（1995）報道廣西地區正常人羣血鉛正常值爲0.403±0.178μmol/L（n＝687），男B-Pb（0.473±0.200，n＝389）明顯高於女性（0.333±0.157，n＝298）（P＜0．01），與表4所列南寧地區B-Pb接近，說明一個地區正常人B-Pb在一個時期內相對較穩定。
②B-Pb可接受上限值：B-Pb可接受上限值也稱“生物接觸限值（BEL）”，“生物接觸指數（BEI）”或“生物學耐受量”，是指B-Pb超過正常參考值上限，但一般不會引起鉛中毒的血鉛水平，也就是說，這種B-Pb水平是可以接受的。我國鉛中毒診斷標準修訂協作組採用判別分析法得出的B-Pb可接受上限值爲444μg/L（n＝902）。美國ACGIH（1991）提出的B-Pb的BEI值爲500μg/L（2.41μmol/L），同一時期美國CDC（1992）宜布將兒童B-Pb的可接受上限由原來的250μg/L（1.25μmol/L）降低到100μg/L（0.48μmol/L），原因是有報告稱在100μg/L B-Pb濃度下，兒童失去學習能力。
③B-Pb診斷下限值：B-Pb的診斷下限值國外目前尚無統一標準，一般認爲B-Pb＞3.86μmol/L（800μg/L）時可出現明顯鉛中毒表現。國內目前B-Pb採用2.41μmol/L（500μg/L）作爲診斷下限值。近年一項全國性的關於慢性鉛中毒診斷指標的大型調查顯示，用判別分析法得出的B-Pb的診斷下限值爲3.07
μmol/L（635μg/L，n＝698）。
（3）紅細胞ZPP快速測定：不接觸鉛的工廠工人血液ZPP濃度爲0.774±0.24μmol/L（n＝47）。鉛中毒診斷標準修訂協作組（1996）提出的血液ZPP正常參考值上限爲1.34μmol/L（6.0μg/g Hb），可接受上限值爲1.79μmol/L（8.0μg/gHb），診斷下限值爲2.91μmol/L（13μg/g Hb）。
4.8 化驗結果臨牀意義
（1）B-Pb的診斷意義：B-Pb是反映近期鉛接觸的敏感指標。國內一項調查顯示，B-Pb與空氣中鉛濃度呈高度相關（r＝0.6379，P＜0.01，n＝895），與鉛接觸和鋁中毒程度（症狀）之間存在較好的劑量反應關係。B-Pb與其他指標如U-Pb（r＝0.7935，P＜0.0005，N＝895），EP（r＝0.7743，P＜0.001，n＝895）和ZPP（r＝0.7326，P＜0.0025，n＝895）也呈顯著相關。
目前在鉛接觸危害監測和診斷中，B-Pb測定已成爲生物接觸指標中的首選指標。在觀察鉛對職業性接觸危害、妊娠（胎兒）、兒童認知能力以及成人腎功能影響的研究中都把B-Pb作爲主要的，或唯一的生物監測指標，而且都觀察到這些有害影響與B-Pb濃度有關。1991年美國CDC在宣佈把兒童鉛可接觸值由250μg/L降至100μg/L的同時，推薦B-Pb測定爲篩檢和診斷兒童鉛接觸的
最佳生物監測指標。此後，B-Pb測定的需求迅速增加。
（2）U-Pb的診斷意義：尿鉛可反映鉛從體內排出情況，能間接反映吸收的鉛量多寡。但由於U-Pb濃度受測定方法、留尿時間、樣品污染以及濃縮和稀釋等因素的影響，結果波動大，不能靈敏可靠地反映體內鉛水平。有時體內雖有大量鉛蓄積，U-Pb排出量並不高，只有在作驅鉛試驗後才明顯升高。目前U-Pb測定主要用於觀察驅鉛治療效果。
（3）EP和ZPP的診斷意義：70～80年代國內外在職業性鉛接觸危害的監測和診斷中EP和ZPP這二項卟啉指標曾廣泛應用。這是基於鉛干擾卟啉代謝而影響血紅素合成，導致紅細胞中EP、ZPP濃度增高。儘管EP和ZPP的增高程度與病情嚴重程度不一定平行，但對鉛中毒有診斷價值。1989年發佈的我國國家標準（GB11504-89）將卟啉指標列爲鉛中毒診斷條件之一。80年代兒童鉛可接觸值爲1.21μmol/L（250μg/L）的情況下，EP測定在兒童鉛接觸和鐵缺乏的篩查中，也是很好的指標。但是進入90年代，在美國等國家，EP測定逐漸被淘汰，原因是美國CDC於1991年修正並頒佈兒童血鉛的可接受值，由原來的1.21μmol/L（250μg/L）降低到0.48μmol/L（100μg/L），並要求直接測定B-Pb，而不是用間接的方法（如ZPP）篩檢B-Pb。加拿大某些地方也把兒童和成年女性的B-Pb可接受上限值定爲0.48μmol/L，男性則爲0.72μmol/L（149μg/L）。由於方法敏感性所限，ZPP不能篩檢出B-Pb升高在048～1.21μmol/L之間的，有亞臨牀鉛中毒的兒童和成年女性。但EP或ZPP在職業性鉛接觸危害篩檢方面仍有較大價值。尤其在生產環境現場取末梢血作EP測定時樣品不易受環境污染，測定結果與靜脈血一致，而末梢血鉛與靜脈血鉛相比，存在一定偏差。
近年來，由於操作簡便、快速、準確的國產血液ZPP測定儀的研製成功並投入生產，促進了國內血ZPP測定在職業性慢性鉛中毒篩檢和診斷方面的應用。
（4）尿ALA的診斷意義：鉛中毒時，紅細胞δ-氨基乙酰丙酸脫水酶（ALA-D，EC4.2.1.24）的抑制導致紅細胞、血漿和尿中δ-氨基乙酰丙酸（ALA）濃度先後升高。早年尿中ALA測定曾被作爲篩查職業鉛接觸危害的重要手段。但是，拿今天的標準衡量，這項指標對檢查鉛毒性不夠敏感，對早期診斷不夠理想，因爲只有當B-Pb濃度＞1.93μmol/L（400μg/L）時，尿ALA濃度才顯著升高。而且，要求定量收集24h尿，這一點也使其應用受到限制。但是由於測定方法簡單，測試費用低，以及非侵入性取樣等原因，在我國的基層普查中應用仍較多，其他一些國家也有應用。
4.9 附註
①本法檢測限爲50μg/L EP，批間精密度變異係數（CV）4.3%～7%。相對回收率96.6%。本法與熒光分光光度法測定結果之相關係數r＝0.9796，P＜0.001，呈非常顯著相關，說明本法有較高的靈敏度，精密度和準確性，且儀器爲國產品，價格適中，適宜於在國內推廣應用。
②血樣在0～4℃存放時間不宜過長，應在7天內完成分析。
③正常人紅細胞原卟啉是遊離的，故一般稱遊離原卟啉（FEP）。鉛中毒或缺鐵性貧血時，紅細胞增加的原卟啉主要以鋅原卟啉（ZPP）形式存在，但用乙酸乙酯和冰醋酸混合液破壞血中紅細胞時，可使ZPP轉變爲EP，所以用萃取法測定時稱爲EP較妥。
（2）石墨爐原子吸收光譜法測定血鉛：
①本法的特點是採用了平臺石墨爐原子化技術，積分吸光度，樣品和鉛標準液用含磷酸二氫胺、Triton-X 100和硝酸的基體改進劑稀釋，以及簡單的連續背景校正，這些都是穩定溫度平臺石墨爐（STPF）技術的基本條件。方法學評價結果：最低檢測限約5μg/L（0.025μmol/L），精密度：批內CV0.4%～5.4%，批間CV 1.0%～4.7%；準確度：低濃度鉛質控物（靶值約爲70μg/L）的實測值在靶值±10μg/L範圍內；高濃度鉛質控物（靶值＞200μg/L）的實測值在靶值±6%靶值範圍內。本法與具Zeeman背景校正的AAS（4100 2L型）所測B-Pb的相關
性良好（y＝1.005X＋0.089，r2＝0.997，n＝44）。
②本法灰化程序中，在“熱解”後增加“冷卻”這一步驟是爲了減少沿石墨爐熱梯度的影響。這一步驟適用於有縱向加熱石墨爐（longitudinally heated furnance）的AAS（如PE 3110型AAS）。側面加熱石墨爐（side heated furnance）無此熱梯度（如PE 4100 2L型AAS），熱解後可不作冷卻處理。
③用連續背景校正的AAS作B-Pb測定時，有時出現分析結果偏低，或分析信號低於基線，這種情況一般是由於光源未調直引起的干擾。應細心調整儀器，使背景校正器的光束與空心陰極燈的光束恰好重疊。
④方法建立後要用標準物質評價方法的準確度和精密度；樣品測定過程中要用標準物質作質量控制檢查。中國預防醫學科學院環境衛生監測所有國家計量局授權生產的“全血鉛鎘成分分析標準物質（GBW 09132～09134）”供應。
（3）紅細胞ZPP標準物質
①儀器需經常用ZPP標準物質校驗，保證儀器性能良好。
②蓋玻片的本底值直接影響ZPP的測定結果，用前需清洗及篩選，棄去本底值過高者。