2 概述
網織紅細胞是晚幼紅細胞到完全成熟的紅細胞之間的過渡型細胞,較成熟紅細胞稍大,直徑約8~9.5μm。由於其血漿中尚存在嗜鹼性的RNA物質,用煌焦油藍、新亞甲藍、硫酸奈爾藍染液進行活體染色後,胞漿中可見有藍綠色的網狀結構,故名網織紅細胞。網織紅細胞在血液循環中經24~48h後,殘餘的嗜鹼性物質逐步消除,變爲成熟紅細胞。Heilmyer根據其不同的發育階段把網織紅細胞分爲5型:
0型:又稱花冠型。是有核的網織紅細胞,其嗜鹼性的網織結構圍繞紅細胞的核,呈環狀,形似花冠狀。此型僅見於正常骨髓中。
Ⅰ型:又稱絲球型。嗜鹼性物質位於紅細胞中央,像緻密的線團狀,此型亦僅見於正常骨髓中。
Ⅱ型:又稱魚網型。位於紅細胞中央的線團樣結構向胞漿中鬆散成網狀結構,像魚網狀,此型大量存在於骨髓中。
4 網織紅細胞數和網織紅細胞百分比的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 網織紅細胞數和網織紅細胞百分比的測定原理
網織紅細胞內尚存在嗜鹼性的RNA殘餘物質,以煌焦油藍或新亞甲藍等染料作活體染色後,這些物質即發生沉澱並被染色。
4.5 試劑
(1)10g/L煌焦油藍乙醇溶液:取煌焦油藍(燦爛甲酚藍)1g,置於乳鉢中研碎,溶於100ml無水乙醇中,過濾後備用。
(2)10g/L煌焦油藍等滲鹽水溶液:煌焦油藍1g、枸櫞酸鈉0.4g、氯化鈉0.85g,溶於雙蒸餾水100ml中,過濾後備用。
(3)新亞甲藍溶液:新亞甲藍N 0.5 g、草酸鉀1.4g、氯化鈉0.8g,溶於100ml雙蒸餾水中備用。
4.6 操作方法
(1)玻片法:
①於清潔玻片的一端,滴加煌焦油藍乙醇溶液一小滴,使其蒸發幹,形成一層薄膜。
②取血一小滴,加於煌焦油藍膜上,迅速用推玻片之一角將血與煌焦油藍充分混合。爲防止蒸發,可將推片的一端覆蓋在血液與煌焦油藍的混合液上,待2~4min。
③用推玻片推成薄膜,復染(或不復染)後計數。
④在油鏡下,選擇紅細胞分佈均勻網織紅細胞染色較好部分,計數1000個紅細胞中的網織紅細胞數,除以10即爲網織紅細胞百分數。
爲了便於計數,可在目鏡中加入網格計數器(或用一圓形有色的塑料片,在中心挖一長、寬各約4mm的小方孔),以縮小視野。
⑤網織紅細胞絕對值的計算:
網織紅細胞數/μl=
(2)試管法:將等量血液與染液(煌焦油藍鹽水溶液或新亞甲藍溶液)混合於一小試管內,10~15min後製成薄的塗片後鏡檢。鏡檢方法同上。
4.7 正常值
顯微鏡計數法:
Ret: (24~84)×109/L (24000~84000/mm3)。
百分比:初生兒0.03~0.06 (3%~6%)。
兒童及成人0.005~0.015 (0.5%~1.5%)。
4.8 化驗結果臨牀意義
(1)增多:溶血性貧血、急性大出血、缺鐵性貧血和巨幼紅細胞性貧血經相應的治療療效顯著者。
(2)減少:再生障礙性貧血(慢性者可略有增高)、某些溶血性貧血有再生障礙危象時。
4.9 附註
(1)近年ICSH和美國國家臨牀實驗標準委員會(NCCLS)對網織紅細胞的定義:網織紅細胞是已不含有細胞核,但用新亞甲藍染色法,尚可查見含有相當於核糖核酸的顆粒至少兩個或兩個以上的紅細胞。
(2)一法復染計數有減低傾向,二法復染使顆粒難以辨別,故網織紅細胞計數以不復染爲好。
(3)網織紅細胞生成指數(RPI),用於校正貧血時幼稚網織紅細胞提前進入末梢血液的假象,網織紅細胞生成指數可爲紅細胞生成提供較好的評價指標。
正常PRI爲1,如貧血患者PRI小於2~3則表示骨髓紅細胞生成低下(表1)。