WS/T 779—2021 兒童血細胞分析參考區間

1 拼音

W S / T 7 7 9 — 2 0 2 1 ér tóng xuè xì bāo fēn xī cān kǎo qū jiān

2 英文參考

Reference intervals of blood cell analysis for children

3 基本信息

ICS 11.020

CCS C 50

中華人民共和國衛生行業標準WS/T 779—2021《兒童血細胞分析參考區間》（Reference intervals of blood cell analysis for children）由中華人民共和國國家衛生健康委員會於2021年04月19日《關於發佈《兒童血細胞分析參考區間》等3項推薦性衛生行業標準的通告》（國衛通〔2021〕3號）發佈，自2021年10月01日起實施。

4 發佈通知

關於發佈《兒童血細胞分析參考區間》等3項推薦性衛生行業標準的通告

國衛通〔2021〕3號

現發佈《兒童血細胞分析參考區間》等3項推薦性衛生行業標準，編號和名稱如下：

WST 779—2021 兒童血細胞分析參考區間

WST 780—2021 兒童臨牀常用生化檢驗項目參考區間

WST 781—2021 便攜式血糖儀臨牀操作和質量管理指南

上述標準自2021年10月1日起施行。

特此通告。

國家衛生健康委

2021年4月19日

5 前言

本文件按照 GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。

本文件起草單位：首都醫科大學附屬北京兒童醫院、國家衛生健康委臨牀檢驗中心、中國醫科大學附屬第一醫院、河北省兒童醫院、西安市兒童醫院、四川大學華西第二醫院、鄭州兒童醫院、重慶醫科大學附屬兒童醫院、廣州市婦女兒童醫療中心、復旦大學附屬兒科醫院、南京市兒童醫院、武漢兒童醫院。

本文件主要起草人：倪鑫、宋文琪、彭曉霞、彭明婷、陳文祥、姜紅、趙敏、崔曉薇、李貴霞、李安茂、曹三成、劉瀚旻、江詠梅、周崇臣、郭振欣、李秋、陳大鵬、夏慧敏、楊紅玲、黃國英、徐錦、張愛華、常勇、邵劍波、向贇、李臣賓、沈穎、金芳、李啓亮、王豔、彭亞光、胡立新、劉穎、張曉飛、嚴若華。

6 標準正文

兒童血細胞分析參考區間

6.1 1 範圍

本文件規定了28天～18歲中國兒童血細胞分析參考區間及其應用。本文件適用於醫療衛生機構實驗室兒童血細胞分析檢驗結果的報告和解釋，有關體外診斷廠商也可參照使用。

6.2 2 規範性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規範性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用於本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用於本文件。

WS/T 347 血細胞分析的校準指南

WS/T 402 臨牀實驗室檢驗項目參考區間的制定

WS/T 405 血細胞分析參考區間

WS/T 406 臨牀血液學檢驗常規項目分析質量要求

WS/T 661 靜脈血液標本採集指南

6.3 3 術語和定義

WS/T 402界定的及下列術語和定義適用於本文件。

3.1

參考區間 reference range

兩參考限之間（包括兩參考限）的區間。

注 1：參考區間是指從參考下限到參考上限的區間，通常是中間 95％區間。在某些情況下只有一個參考限具有臨牀意義，通常是參考上限，這時的參考區間是 0 到參考上限。

注 2：參考區間在我國通常又稱爲“參考範圍”、“正常範圍”、“正常值”等，但“參考區間”是目前國際通用規範術語。

3.2

末梢血 capillary blood

即毛細血管血液，成分包括微動脈血、微靜脈血及少量組織液。

3.3

穿刺 puncture

使用針尖、刀片或自動末梢採血器刺穿皮膚的過程，獲取的血液用於檢驗。

3.4

末梢採血器 skin puncture device

用於穿刺皮膚獲取末梢血樣的設備，通常爲鋒利的針或刀片。

注：對於末梢血穿刺使用的器具稱謂尚未統一，如採血針、採血器、穿刺針等，爲達成統一避免誤解，在術語說明及正文中統一稱爲末梢採血器。

3.5

末梢採血管 container for capillary blood specimen collection

用於收集、儲存皮膚穿刺後獲取的末梢血標本的容器，容器內可含有抗凝劑或促凝劑以滿足不同檢驗項目的需求。

3.6

微量採血吸管 microhematocrit tubes

爲一次性使用的可帶有定量標識的中空玻璃或塑料材質吸管，血液可通過虹吸作用流入管內。

6.4 4 參考區間

4.1 中國兒童（28 天～18 歲）血細胞分析參考區間見表 1。

4.2 中國兒童（28 天～18 歲）血細胞分析參考區間建立及驗證過程的相關信息參見附錄A。

表 1 中國兒童血細胞分析參考區間

6.5 5 參考區間應用

6.5.1 5.1 一般原則

5.1.1 臨牀實驗室應首先考慮引用本文件的參考區間。

注 1：由於建立兒童參考區間的研究工作量和成本巨大，實施難度較高，臨牀實驗室引用參考區間比自己建立參考區間更爲現實、可行。

注 2：本參考區間是基於中國健康兒童大樣本多中心研究的結果。

注 3：白細胞計數（WBC）、紅細胞計數（RBC）、血紅蛋白（Hb）、血細胞比容（Hct）和血小板計數（PLT）檢驗結果可溯源至國際公認的參考方法，詳見附錄 B 中表 B.1。

5.1.2 使用本文件的參考區間前應進行必要的驗證或評估。

注 1：本文件參考區間的適用性主要取決於實驗室檢驗結果與參考區間建立時檢驗結果的可比性以及人羣的適用性。

注 2：實驗室在使用本文件參考區間前應保證分析系統性能符合相關要求。

注 3：本文件參考區間基於新鮮靜脈血和末梢血檢測結果建立，若臨牀實驗室使用其他的標本類型，應進行評估以決定是否採用本參考區間。

6.5.2 5.2 參考區間評估、驗證和使用

5.2.1 按 WS/T 402 有關規定進行參考區間的評估和驗證。

5.2.2 實驗室在應用本參考區間前應對分析全過程的質量管理和目標應用人羣進行評估，尤其應徵求臨牀醫生的評審意見。若有理由認爲與參考區間研究的分析質量和參考人羣有足夠可比性，可直接使用本文件的參考區間。

5.2.3 若對分析質量和目標應用人羣可比性不確定或實驗室管理體系要求對引用的參考區間進行驗證，可按下列步驟進行：

a） 篩選合格參考個體不少於 20 名（性別、年齡應分佈均衡），篩選標準參見附錄A 中A.2.2；

b） 按實驗室規定的操作程序採集、處理、分析樣本，分析前需保證檢測系統性能符合相關要求；

c） 按適當方法檢查並剔除離羣值（若有離羣值，則另選參考個體補足）；注：離羣值檢驗可採用Dixon方法：首先將檢測結果按照大小排序並計算極差（最大值與最小值之差）R，然後分別計算最大值和最小值與其相鄰數值之差D；若D/R≥1/3，則將最大值或最小值視爲離羣值予以剔除；將其餘數據重複前述步驟進行離羣值檢驗，直至剔除所有離羣值。

d） 如選擇 20 個合格的參考個體，將 20 個檢驗結果與參考區間比較，若在參考區間之外的數據不超過 2 個，則通過驗證；若超過 2 個，則另選 20 名合格參考個體重新按照上述判斷標準進行驗證；

e） 如參考個體多於 20 個，則在參考區間之外的數據不超過 10％爲通過驗證；若超過10％的數據在參考區間之外，則另選至少 20 名合格參考個體，重新按照上述判斷標準進行驗證；f） 驗證結果若符合要求，可使用參考區間，否則應按照 5.3 處理。5.2.4 驗證本文件參考區間的實驗室分析質量基本要求見附錄 B。

6.5.3 5.3 參考區間未通過驗證的處理方法

5.3.1 對未通過驗證的情況，實驗室應首先評價分析質量，尤其是對正確度進行評估。若證實是分析系統的檢測質量問題導致驗證未通過，則應改進分析系統的檢測質量。分析質量評價可採用（但不限於）下列方式：

a） 分析可互通有證標準物質或其他適宜參考物質；

b） 參加適宜的正確度驗證計劃或標準化計劃；

c） 與性能可靠的其他系統或方法進行比較。

5.3.2 建立兒童血細胞分析參考區間的實驗室分析質量基本要求見附錄B。5.3.3 實驗室在引用本文件的參考區間時還應注意下列情況：

a） 高海拔地區：高海拔地區人羣血紅蛋白和紅細胞計數等指標的檢測結果明顯高於其他地區，且超出本參考區間上限的比例大於10％；

b） 由於地理分佈、生活習慣等因素造成血細胞分析結果明顯變化，如四川、重慶地區大於等於12歲兒童的血小板計數低於其他地區。

對未通過驗證的情況，若證實是人羣差異導致的，如民族不同、居住地爲高海拔地區（海拔在1000米以上）、或有某種特殊生活習慣等，則應按 WS/T 402要求建立或引用適宜的參考區間。

7 附錄A（資料性附錄）兒童血細胞分析參考區間建立及驗證過程的相關信息

7.1 A.1 參考區間建立的步驟

中國兒童參考區間建立遵循WS/T 402的規定。

參考區間建立的主要步驟如下：

a） 選擇參考個體，組成參考樣本組；

b） 採集血液樣本；

c） 分析血液樣本，獲得參考值；

d） 統計處理參考值，建立參考區間。

7.2 A.2 參考個體選擇

7.2.1 A.2.1 參考樣本組的選擇

參考人羣爲我國兒童健康人羣，參考樣本組選自東北、華北、西北、西南、華中、華南、華東7個地區城鄉居民，年齡範圍爲28天～18歲。每個地區入選參考個體約1800人，28天～<1歲的參考個體數至少120人，1歲～18歲每3歲年齡段的參考個體數至少120人；男女比例爲1:1。最終入選建立靜脈血蔘考區間的參考個體共計12487人，末梢血參考區間的參考個體共計9461人。

7.2.2 A.2.2 參考個體的選擇

各中心分別在所在地區募集表觀健康個體，徵得知情同意，通過問卷調查、體格檢查、實驗室檢查篩選參考個體，篩選標準滿足以下要求：

7.2.2.1 a） 問卷調查、體格檢查包括以下內容：

1） 表觀健康兒童；

2） 無經醫院診斷的先天性疾病患者；

3） 2 周之內無發熱及罹患各種急性疾病；

4） 無慢性系統疾病，主要包括：血液系統疾病（貧血、白血病、血小板異常疾病等）、變態反應性疾病（溼疹、蕁麻疹、支氣管哮喘、過敏性皮炎、特應性皮炎、過敏性鼻炎、消化系統過敏性疾病、食物過敏等）、呼吸系統疾病（急性呼吸道感染、肺畸形等）、泌尿系統疾病（紫癜性腎炎、腎小球腎炎、腎病綜合徵等）、消化系統疾病(慢性腹瀉、炎症性腸病等)、風溼免疫性疾病（類風溼性關節炎、系統性紅斑狼瘡等）、循環系統疾病（心肌炎等）、內分泌和遺傳代謝性疾病（糖尿病、甲狀腺疾病等）、惡性腫瘤及腫瘤放化療、燒傷和肌肉創傷等；

5） 無消瘦：消瘦的定義爲 5 歲及以下兒童採用 BMI-Z 評分評估，首先計算不同年齡的BMI-Z評分，然後根據 WHO 公佈的兒童生長曲線將 BMI-Z 評分小於-3 者定義爲消瘦；6歲～18歲兒童採用 BMI 評估，根據學齡兒童青少年營養不良篩查行業標準（WS/T 456）發佈的不同年齡 BMI 消瘦篩查界值進行判斷；

6） 近期無以下情況：1 周內有服藥史者，包括治療性藥物或保健品（如抗生素、糖皮質激素、維生素 C 等），1 月內經歷手術、輸血或大量失血者。

7.2.2.2 b） 通過實驗室檢查排除：

1） 空腹血糖≥7.0 mmol/L；

2） 白細胞計數<3.0×10⁹/L 或>15.0×10⁹/L；

3） 血紅蛋白<90 g/L；

4） 地中海貧血：2 歲以下，所有兒童完成了基因檢測，基因分析陽性者排除；2 歲及以上，以基因分析結果爲金標準，採用 ROC 曲線確定 MCV<75 fl 者排除；

5） 血清鐵<9.0 µmol/L。

注：排除標準依據衛生行業標準、參考權威書籍和文獻、綜合檢驗及臨牀專家意見以及統計分析結果而制定。

7.3 A.3 血液樣本採集與處理

靜脈血採集與處理按照 WS/T 661及兒科臨牀標本採集有關要求執行；末梢血採集與處理按照《中國末梢採血操作共識》執行，具體要求如下：

7.3.1 a） 參考個體準備：

1） 飲食要求：採血前三天保持正常飲食，全血細胞分析檢測無禁食要求；2） 避免運動影響：採血前三天內不做劇烈運動，採血前至少休息10min～15min；3） 避免情緒影響：平靜狀態下採血，儘量避免情緒激動；

4） 避免藥物影響：採血前七天內停止服用各種治療性藥物或保健品（如抗生素、糖皮質激素、維生素C等）；

5） 避免不良生活習慣影響：採血前七天內停止吸菸、飲酒或熬夜。

7.3.2 b） 採血前的準備：

1） 在光線充足、空氣流通、清潔舒適的環境下進行血液樣本採集；2） 按照 WS/T 661和《中國末梢採血操作共識》準備採血所需一般物品，其中採血針經過適用性評估；選用管壁光滑、添加劑比例恰當、噴塗均勻、標識清晰的採血管；3） 操作者語言溫和、動作輕柔，以安撫受試者，使其保持情緒穩定。

7.3.3 c） 採血：

1） 靜脈血：4個月以內的嬰兒行頸外靜脈或頭皮淺靜脈採血，3歲以上的兒童多行肘正中靜脈或貴要靜脈穿刺，其他年齡段兒童可根據實際情況進行選擇；採用規格爲21G一次性蝶翼針和含乙二胺四乙酸鹽（EDTA）抗凝劑採血管；通過真空採血方式採集靜脈血並混勻樣本；

2） 末梢血：28天及以上的參考個體，一般選擇左手無名指的尺側作爲穿刺部位，穿刺部位要求無感染、血供良好。用75％乙醇進行皮膚消毒後，採用規格爲21G一次性安全型末梢採血器進行穿刺。在採集點的下方，輕柔、間歇性地對穿刺點周圍組織施加壓力以增加血流量，用無菌棉球或棉籤拭去第一滴血，使用一次性微量採血吸管將血液轉移至一次性末梢採血管內（含EDTA抗凝劑），封閉末梢採血管帽，採用上下顛倒或輕彈的方式進行末梢血混勻。

7.3.4 d） 血液樣本處理：

1） 樣本保存與運送：樣本採集後須再次覈對受試者信息，並觀察樣本質量，做好標識。樣本於18℃～25℃保存，靜脈血須在採集後8 h內完成檢測，末梢血須在採集後4 h內完成檢測。樣本如需轉運至實驗室，應採用防水、防漏、結實的運送箱運輸，途中避免振盪；

2） 實驗室排除不合格標本（如採集量不足、肉眼觀察有血凝塊、顯微鏡下有血小板聚集的標本）的影響，靜脈血還應同時排除溶血、脂血和高膽紅素的影響。

7.4 A.4 血液樣本的檢測

7.4.1 A.4.1 通用要求

按《醫療機構臨牀實驗室管理辦法》及儀器介紹的要求制定所在實驗室的血細胞分析檢測程序並予以實施。

7.4.2 A.4.2 分析系統

使用目前我國臨牀實驗室常用的血細胞分析系統及其配套試劑進行血液樣本檢測。

7.4.3 A.4.3 分析系統校準和性能驗證

每年至少兩次使用配套校準品對分析系統進行校準。按照 WS/T 406的有關要求，對分析系統的本底計數、攜帶污染、精密度、線性、正確度、不同吸樣模式的結果可比性及實驗室內的結果可比性等進行驗證，評價結果符合相關要求。

7.4.4 A.4.4 血液樣本檢測及質量控制

分析系統性能符合要求後方可進行血液樣本檢測，每份樣本檢測一次。室內質量控制採用高值、中值和低值3個水平配套質控品，每臺儀器在累計200個測試後或開機每間隔6 h必須進行第二次3個水平質控品的檢測，室內質控應符合 WS/T 406要求；每年定期參加國家衛生健康委臨牀檢驗中心組織的血細胞分析正確度驗證及室間質量評價活動，結果符合要求。

7.5 A.5 參考值處理及參考區間建立

7.5.1 A.5.1 離羣值檢查及處理

a） 遵循CLSI EP28-A3c建議，採用Tukey法檢查離羣值，即將各年齡、性別亞組內大於四分位間距上限（Q3，75%分位數）+1.5倍四分位間距（IQR=Q3-Q1）或小於四分位間距下限（Q1，25%分位數）-1.5倍四分位間距（IQR）的參考值定義爲離羣值；

b） 針對符合以上定義的離羣值，到原始數據庫中進行溯源，結合篩查問卷、體檢與實驗室檢查結果綜合分析離羣值產生原因；

c） 遵循CLSI EP28-A3c建議，如果有明確原因時，應將離羣值排除，否則不予排除。

7.5.2 A.5.2 分組判斷

採用嵌套方差分析，比較各個指標在不同地區間、性別、年齡組間的差異，初步判斷是否需要分組。在地區間差異沒有實際臨牀意義時，重點考慮年齡亞組劃分。

年齡亞組劃分首先採用視覺評估確定是否需要劃分；然後通過決策樹分析確定年齡亞組劃分切點，將年齡四舍五入取整後，劃分年齡亞組；再採用標準正態方差檢驗對兩個亞組之間的差別進行統計學假設檢驗，檢驗結果顯示差異有統計學意義，且滿足亞組之間均差大於亞組合並後獲得參考區間間距的四分之一時，再進一步比較組間變異是否大於個體間生物學變異；都滿足的前提下，計算該年齡亞組的參考區間，並針對該參考區間的臨牀適用性徵求臨牀專家意見。

7.5.3 A.5.3 參考限和參考區間建立

採用非參數法，計算參考值的下限（2.5％分位數）和上限（97.5％分位數）及其90％置信區間，結合臨牀意見對參考限進行適當調整形成參考區間。

7.6 A.6 參考區間驗證

7.6.1 A.6.1 數據來源

參考區間驗證過程中研究對象的納入與排除標準、流行病學調查流程及實驗室分析的質量要求標準與參考區間建立相一致，驗證數據來源於我國東北、華北、西北、西南、華中、華南、華東7個地區的22個省（自治區、直轄市）的22家兒童醫院及綜合醫院兒科。最終入選參考區間驗證的參考個體靜脈血6571人、末梢血4995人。各中心的標本檢測按照實驗室的檢測流程，使用日常檢測儀器完成。

注1：參與靜脈血血細胞分析參考區間驗證的22家單位名單（排名按各中心完成驗證樣本量大小決定）：首都醫科大學附屬北京兒童醫院、鄭州兒童醫院、廣州市婦女兒童醫療中心、重慶醫科大學附屬兒童醫院、西安市兒童醫院、河北省兒童醫院、復旦大學附屬兒科醫院、武漢兒童醫院、四川大學華西第二醫院、聊城市人民醫院、烏魯木齊兒童醫院、山西省兒童醫院、杭州市兒童醫院、湖南省兒童醫院、安徽省兒童醫院、大連市兒童醫院、柳州市婦幼保健院、江西省兒童醫院、深圳市兒童醫院、貴陽市婦幼保健院（貴陽市兒童醫院，高海拔地區）、內蒙古自治區婦幼保健院、青海省婦女兒童醫院（高海拔地區）。

注2：參與末梢血血細胞分析參考區間驗證的19家單位名單（排名按各中心完成驗證樣本量大小決定）：首都醫科大學附屬北京兒童醫院、鄭州兒童醫院、重慶醫科大學附屬兒童醫院、河北省兒童醫院、復旦大學附屬兒科醫院、廣州市婦女兒童醫療中心、四川大學華西第二醫院、聊城市人民醫院、湖南省兒童醫院、杭州市兒童醫院、山西省兒童醫院、安徽省兒童醫院、柳州市婦幼保健院、大連市兒童醫院、深圳市兒童醫院、江西省兒童醫院、貴陽市婦幼保健院（貴陽市兒童醫院，高海拔地區）、內蒙古自治區婦幼保健院、青海省婦女兒童醫院（高海拔地區）。

7.6.2 A.6.2 參考區間驗證

按照參考區間建立時的性別、年齡亞組劃分標準，將驗證數據劃分亞組後，對各地區的驗證數據分別與相應亞組的參考下限與上限值進行比對，超出下限或上限範圍的驗證參考值所佔比例大於10％時，提示該參考區間可能不適用於該地區。

本研究驗證結果均滿足 WS/T 402規定要求（除外高海拔地區）。

7.7 A.7 參考區間的同行評議

針對驗證合格的參考區間，徵求臨牀專家、檢驗專家、流行病學和統計學專家的意見，最終確立參考區間。

8 附錄B（規範性附錄）建立與驗證兒童血細胞分析參考區間的實驗室分析質量基本要求

8.1 B.1 血液分析儀的性能驗證和校準

B.1.1 血液分析儀投入使用前，應按照 WS/T 406對其性能進行驗證。

B.1.2 血液分析儀的試劑、校準品和消耗品宜配套使用；使用非配套檢測系統時，應按CLSIEP09-A3的要求與配套檢測系統的結果進行比對。

B.1.3 血液分析儀的校準應符合 WS/T 347的要求。

B.1.4 應確認白細胞分類計數結果的可靠性。

8.2 B.2 檢驗程序的質量保證

8.2.1 B.2.1 室內質量控制

a） 宜使用配套質控物，若選擇非配套質控物時應評價其質量和適用性；

b） 至少使用2個濃度水平（正常和異常水平）的質控物；

c） 應根據實驗室檢驗標本的數量確定質控頻度，實驗當天至少檢測1次；

d） 質控數據管理按批次或每月統計1次。

8.2.2 B.2.2 室間質量評價

醫療機構臨牀實驗室應當參加室間質量評價機構組織的臨牀檢驗室間質量評價併成績合格。

8.2.3 B.2.3 實驗室內部結果可比性

不同檢測系統應定期（至少半年）進行結果比對。確認血細胞分析各檢測系統的性能指標符合要求後，至少使用20份臨牀樣本（含正常和異常標本）進行比對（可分批進行），比對結果應符合WS/T406的要求。

8.3 B.3 血細胞分析的計量學溯源

血細胞分析的計量學溯源見表B.1。

表 B.1 血細胞分析的計量學溯源

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