3 概述
在各種自身免疫性疾病,如系統性紅斑狼瘡(SLE)等病人血清中常可檢出抗脫氧核糖核核糖核酸(DNA)抗體,其中抗單鏈DNA(ssDNA)抗體可見於各種自身免疫病和結締組織病人血液中,故無多大診斷特異性。但抗雙鏈DNA(dsDNA)抗體主要見於SLE病人,是一相對特異的診斷指標。鑑別或特異性檢測抗dsDNA抗體取決於所用抗原dsDNA的特性和純度,以前多用非致病的短膜蟲及由此分離純化的抗原,但目前除間接免疫熒光法外,多用基因工程產dsDNA抗原,其特異性更佳。血凝試驗酶免疫是較常用的檢測抗dsDNA抗體的方法,但Farr法仍是標準參考方法。
5 抗脫氧核糖核酸抗體的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 抗脫氧核糖核酸抗體的測定原理
除用基因工程產dsDNA抗原致敏紅細胞外,其餘同常規間接血凝試驗。
5.4 試劑
現有成套試劑盒供應。
5.5 操作方法
(1)定性試驗:
①被檢血清經56℃加熱30min後,用血清稀釋液作1∶20稀釋。
②如下圖(圖1)所示Ⅴ型微孔板的B、C、D、F、G、H孔分別加血清稀釋液50μl,在A、B孔和E、E孔內分別加1∶20稀釋的病人血清50μl。
③混勻後從B孔移吸50μl於C孔,混勻,從中移吸50μl於D孔,混勻後吸出50μl棄之。如此A~D孔內血清的最終稀釋度分別爲1∶20、1∶40、1∶80和1∶160。E~H孔作同樣處理供檢測另1份血清樣品用。
④各孔加dsDNA抗原致敏的紅細胞試劑25μl,混勻。微孔板襯以白底,25℃左右室溫放置1h後觀察結果。凡1∶20稀釋度呈血凝陽性反應者判爲抗dsDNA抗體陽性,陽性樣品需作半定量間接血凝試驗加以確證。
(2)半定量試驗:將血清標本倍比稀釋爲1∶20~1∶2560,同法檢測,以能產生血凝陽性反應的血清最大稀釋度爲受檢樣品抗體滴度。凡SLE患者血清滴度在1∶160以上提示疾病有活動性。
5.6 正常值
陰性。
5.7 化驗結果臨牀意義
陽性:系統性紅斑狼瘡(特徵的病理因子)、系統性硬化症、皮肌炎、結節性多動脈炎(50%陽性)、類風溼性關節炎(10%陽性)、肝臟病、甲狀腺炎、潰瘍性結腸炎、重症肌無力(4%~17%陽性)、侷限性盤狀紅斑狼瘡(陽性數不穩定)等。
5.8 附註
(1)上述諸法均有商品試劑盒供應,應嚴格按介紹規定操作。