2 英文參考
fluorescent treponemal antibody-absorption test
fluorescent treponema pallidum antibody absorption test
fluorescent treponemal antibody absorption
3 概述
熒光密螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)是一種間接熒光抗體法。試驗前先用Reiter密螺旋體超聲波裂解物處理病人血清,除去其中具有交叉反應的抗體後,再與梅毒螺旋體作用,然後加用熒光素標記的抗人IgG。此法敏感性高、特異性強,能最早檢測出梅毒螺旋體的特異性抗體。但操作複雜,且病人經過藥物治療後反應仍持續陽性。因此,不適於判斷療效。如需判定療效,可參考血清反應素試驗結果。
5 熒光法密螺旋體抗體吸附試驗的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 取材
5.4 熒光法密螺旋體抗體吸附試驗的測定原理
本試驗爲間接熒光抗體檢測方法。病人血清經由非致病的Reiter螺旋體培養物中提取的吸收劑稀釋,消除大部分的雜抗體,隨後加至固着Nichols株螺旋體的玻片上。若血清中有梅毒螺旋體抗體,便會包蓋在固着的抗原螺旋體上,且又與熒光標記抗體結合。在熒光顯微鏡下可檢測到Nichols螺旋體。
5.5 試劑
本試驗有商品試劑盒。2~10℃避光可保存1年。但試劑瓶開啓後應及時使用。
5.6 操作方法
(1)用吸收劑對業經56℃水浴30min滅活的被檢血清作1∶5稀釋,充分混勻。
(2)加0.03ml分別用PBS和吸收劑作1∶5稀釋過的非特異性控制血清於固着抗原螺旋體的玻片反應圈內。此爲陰性對照。
(3)加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的最小反應性(+)控制血清於玻片反應圈內。此爲陽性對照。
(4)加0.03ml經吸收劑作1∶5稀釋過的被檢血清於玻片反應圈內。
(5)將此玻片置於溼盒內,36℃±1℃,保溫30min。
(6)將玻片置於玻片架上,用PBS(pH值7.2±0.1)衝淋玻片5s,然後浸入此PBS中5min。再拎出、浸沒玻片,濯洗30次。
(7)用業經120℃ 15min消毒的蒸餾水衝淋5min。用吸水紙輕輕將玻片吸乾。
(8)加0.03ml異硫氰酸熒光素標記的抗人IgG(FITC-標記抗人IgG)於每個反應圈內。重複5~7步驟。
(9)加固定液1小滴於玻片上,再覆上蓋玻片,切勿形成氣泡。
(10)將玻片置熒光顯微鏡下,先用鎢燈爲光源,在暗視野下尋找Nichols螺旋體。然後改用高壓汞燈,經濾光片選取紫外光段即可觀看熒光結果。讀片應在4h內完成。
5.7 正常值
陰性。
5.8 化驗結果臨牀意義
5.9 附註
本試驗敏感性和特異性均高,在早期梅毒首先出現陽性,常被用作確證試驗。