3 概述
抗雙鏈DNA抗體（抗ds DNA）是抗DNA抗體中的一種。其反應位點位於DNA脫氧核糖磷酸框架上。抗ds DNA主要出現於SLE患者的血清中，對SLE患者的組織器官損傷有致病作用。在SLE患者血循環中，大分子的DNA濃度顯著高於正常人，DNA還可與多種器官的微血管結構包括腎小球基底膜上的硫酸乙酰肝素（heparansulfate）結合，抗dsDNA抗體可與這些循環中的和器官原位的DNA分子反應，形成抗原抗體複合物，激活炎症系統如補體活化途徑，導致組織損傷。也有人認爲，致病性抗DNA抗體在腎臟中的沉積並非只取決於抗DNA抗體與DNA的結合，而是通過與基底膜上硫酸乙酰肝素、層粘連蛋白（laminin）、心磷脂等非DNA抗原的交叉反應或靜電引力作用固定於腎臟，誘導炎症反應。抗DNA自身抗體中有的有致病性，有的沒有致病性。致病性的抗DNA抗體具有以下特性：親和性高，能與補體結合，能結合dsDNA，帶正電荷，多反應性，爲IgG類。近年來的研究發現，抗DNA抗體能穿入活的淋巴細胞，干擾細胞功能，引起細胞凋亡，抗dsDNA抗體也能進入腎小球膜細胞，引起腎小球細胞增殖，促細胞融合和蛋白尿形成。這可能是致病性抗DNA抗體的另一特徵。
5 抗雙鏈DNA抗體的醫學檢查
5.1 檢查名稱
抗雙鏈DNA抗體
5.2 分類
5.3 抗雙鏈DNA抗體的測定原理
目前，測定抗dsDNA的常用方法有4種，它們的原理分述如下：
（1）綠蠅短膜蟲（crithidia luciliae，CL）間接免疫熒光（IIF）或免疫酶染色（EIS）法：CL屬於血鞭毛蟲屬，它有一個大的含純淨dsDNA的線粒體即動基體（kinetoplast），其抗原濃度較Hep-2細胞核或肝細胞核中抗原濃度高10倍，待測血清中的抗dsDNA抗體可與之結合（抗ssDNA不能）。在分佈有一定濃度CL的抗原片上，IIF法是依次滴加稀釋的待測血清，反應後洗片，滴加熒光熒光素標記的抗人IgG，反應後洗片，片幹後於熒光顯微鏡下觀察。抗dsDNA陽性時，CL動基體處出現黃綠色熒光。EIS法原理與IIF法類似，僅以酶標記抗人IgG代替熒光素標記抗體，加酶底物呈色後於普通顯微鏡下觀察，抗dsDNA陽性時，CL動基體被特異地染色。
（2）放射免疫分析法（Farr試驗）：用放射性核素（如125Ⅰ）標記dsDNA，加入待測血清後抗dsDNA可與標記dsDNA結合，經50%飽和度硫酸銨鹽析。將結合抗dsDNA的標記抗原與未結合的標記抗原分開（前者在沉澱中，後者在上清液中），再用γ計數儀分別測定放射性，計算出抗dsDNA結合率。並據此判定抗dsDNA的有無。
（3）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：基本原理是將dsDNA包被於聚苯乙烯等固相載體微孔中，依次加入待測血清、酶標記抗人IgG或酶標記金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）、酶底物呈色。每種反應物加入後在一定溫度下溫育30～60min，徹底清洗後再加下一反應物。呈色程度可用酶聯檢測儀測定吸光度（A）反映，並據此判定檢樣中有無抗dsDNA。此法的關鍵之處是dsDNA很難包被於固相載體上，必須將微孔反應板用魚精蛋白、多聚賴氨酸、戊二醛等做預處理。
（4）滴金免疫滲濾試驗（dot immunogold filtration assay，DIG-FA）：此法原理與酶免疫斑點試驗大致相似，但以膠體金標記的抗體代替酶標記抗體。預先用親和素（avidin）或鏈親和素（strep-tavidin）包被硝酸纖維素（NC）膜，再將生物素化的dsDNA結合於其上，將此NC膜固定於滲濾盒中央的圓孔處，其下以吸水填料充實。檢測時依次滴加待檢血清（如含抗dsDNA，則可與NC膜上dsDNA結合）、洗滌液、金標記SPA、洗液，可在1～2min內完成全部操作。抗dsDNA陽性時，NC膜上包被dsDNA處可出現紅色圓點。
5.4 試劑
同IIF法、EIS法、DIG-FA法。
5.5 操作方法
同IIF法、EIS法、DIG-FA法。
5.6 正常值
健康人結合率≤20%（放射免疫分析法Farr試驗）。
一般以待測血清A值/陰性對照A值（P/N）≥2.1爲陽性，正常人P/N值＜2.1（ELISA法）。
5.7 化驗結果臨牀意義
抗dsDNA自身抗體是SLE的最重要的自身抗體，檢出率40%～70%。高滴度抗dsDNA的存在是SLE診斷的重要依據，也是疾病活動性特別是腎臟損傷的標誌。除用於SLE的診斷外，也可用於臨牀病程和治療效果的監測，對判斷預後也有一定價值。但也有人報道在肝臟疾病、青少年型類風溼性關節炎，乃至正常人中發現低滴度抗dsDNA。
5.8 附註
上述幾種檢測技術的特異性都不是100%的。例如，綠蠅短膜蟲動基體中雖不含ssDNA，但可能含少量組蛋白，放免法、ELISA法、滴金滲濾法等用作抗原的dsDNA，也常常含有ssDNA，而即使污染的ssDNA不足1%，引起的假陽性即可高達6%。因此，對抗dsDNA的檢測結果應結合臨牀分析，必要時應動態觀察。此外，鑑於檢測試劑中DNA抗原的來源不同，鹼基組成和順序可能有一定差異，使抗體結合的表位發生變化。