3 概述
鉤端螺旋體病是由各種致病性螺旋體引起的人畜共患的自然疫源性疾病。致病性鉤端螺旋體的羣和血清型衆多,其羣特異性的化學組成爲類脂多糖複合物,型特異性的化學組成爲蛋白多糖複合物,不同型鉤端螺旋體的多糖組成有所差異,患者體內可產生相應抗體,檢查特異性抗體有助於本病的診斷。
5 檢查名稱
7 鉤端螺旋體病凝集溶解試驗的原理
鉤端螺旋體與相應的特異性抗體相遇,在適宜的電解質存在下,可發生凝集
現象,在暗視野顯微鏡下明顯可見。由於病人血清中可出現凝集素和溶解素,用活鉤端螺旋體作凝集試驗時,可同時出現凝集和溶解兩種現象。當血清中抗體效價高時,發生溶解現象,而抗體效價低時,則發生凝集現象。本試驗呈型特異性。
8 試劑
鉤端螺旋體培養物:取鉤端螺旋體標準株接種於Korthof或含兔血清的磷酸鹽培養基中,28~30℃培養5~7天。用暗視野顯微鏡檢查,每高倍視野不少於50條,運動活潑並無自凝的,即可作爲活抗原。加最終濃度爲0.5%福爾馬林溶液,置28~30℃過夜,即爲死抗原。
9 操作方法
(1)將受檢血清置56℃水浴滅活30min,並用生理鹽水稀釋25倍。
(2)取稀釋受檢血清在10×75mm試管中按實際需要作系列倍比稀釋,每管0.1ml,最後一管僅加生理鹽水0.1ml作爲抗原對照管。
(3)分別加入各羣或各型鉤端螺旋體懸液0.1ml,此時血清最終稀釋度爲1∶50、1∶100混合後,放置37℃2~3h。
(4)將各管重懸後取1滴懸液,分別放在載玻片上,覆以蓋玻片,於高倍暗視野顯微鏡下觀察其凝集溶解現象。
(5)結果判斷:
(++++)幾乎全部螺旋體發生溶解、破壞或變形,僅間有極少數正常螺旋體。
(+++)大部分螺旋體凝集成蜘蛛網狀或團狀,間或有少數遊離。
(++)在半數視野中可見有凝集團存在,正常遊離的螺旋體數較對照管少。
(+)僅有少數凝集,檢查10個視野,僅1~2個視野中見有凝集團存在。
(-)全部螺旋體呈正常分散存在。
11 化驗結果臨牀意義
升高:鉤端螺旋體病(早期)。