醋酸AS-D茶酚脂酶染色

血細胞化學染色 化驗及醫學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

cù suān AS-Dchá fēn zhī méi rǎn sè

2 英文參考

Acetate AS-D catechol esterase staining

3 概述

氯乙酸萘酚酯酶是粒細胞肥大細胞的標誌酶,主要存在粒細胞溶酶體內,此酶與過氧化酶在中性粒細胞中均呈陽性反應,但此酶形成的產物比過氧化酶更爲特異。

4 醋酸AS-D茶酚脂酶染色醫學檢查

4.1 檢查名稱

醋酸AS-D茶酚脂酶染色

4.2 分類

血細胞化學染色

4.3 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的測定原理

氯乙酸AS-D萘酚被細胞特異性酯酶(SE)水解,產生AS-D萘酚,後者與重氮鹽(堅牢紫醬GBC)偶聯,生成不溶性紅色沉澱,定位於胞漿中。

4.4 試劑

(1)甲醛-甲醇固定液:10%甲醛甲醇按1∶9混合。

(2)Veronal乙乙酸緩衝液

甲液:乙酸鈉(含3H2O) 1.94g

巴比妥鈉 2.94g

蒸餾水 加至100ml

乙液:0.1mol/L鹽酸:取鹽酸(比重1.19)0.85ml,加蒸餾水至100ml。

取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸餾水135ml,用1mol/L鹽酸調整pH至7.5~7.6。

(3)作用液:

氯乙酸AS-D萘酚 10mg

丙酮 0.5ml

蒸餾水 5ml(使溶解

Veronal乙乙酸緩衝液 5ml

堅牢紫醬GBC 10mg

溶解,不必過濾立即染色,一次用完。

4.5 操作方法

(1)固定:新鮮乾燥塗片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸氣薰5~10min。

(2)水洗,涼幹。

(3)放入作用液,37℃ 30min。

(4)水洗,蘇木素染液復染1~2min。

(5)水洗,晾乾,鏡檢。

4.6 正常值

粒細胞系統的原粒細胞陰性反應,自早幼粒細胞成熟中性粒細胞均爲陽性反應酶活性並不隨細胞成熟而增強。肥大細胞陽性反應單核細胞淋巴細胞漿細胞、幼紅細胞血小板細胞均呈陰性反應

4.7 化驗結果臨牀意義

協助鑑別急性白血病類型:急性粒細胞白血病時,白血病性原始粒細胞可出現陽性反應;急性單核細胞白血病急性淋巴細胞白血病時,白血病細胞陰性反應

4.8 附註

(1)氯乙酸萘酚酯酶(NCE)最佳反應pH爲7.0~7.6之間。它不被氟化鈉抑制

(2)嚴格遵守操作規程,如增加溫度和pH值可導致氯乙酸苦酚分解,從而在細胞內產生明顯的非特異性酯酶反應

(3)除本法採用新品紅外,還有人選用堅固紫或堅固藍。

4.9 相關疾病

單核細胞白血病急性淋巴細胞白血病

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