4 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
血細胞化學染色
4.3 醋酸AS-D茶酚脂酶染色的測定原理
氯乙酸AS-D萘酚被細胞內特異性酯酶(SE)水解,產生AS-D萘酚,後者與重氮鹽(堅牢紫醬GBC)偶聯,生成不溶性紅色沉澱,定位於胞漿中。
4.4 試劑
甲液:乙酸鈉(含3H2O) 1.94g
巴比妥鈉 2.94g
蒸餾水 加至100ml
乙液:0.1mol/L鹽酸:取鹽酸(比重1.19)0.85ml,加蒸餾水至100ml。
取甲液50ml,乙液45ml,再加蒸餾水135ml,用1mol/L鹽酸調整pH至7.5~7.6。
(3)作用液:
氯乙酸AS-D萘酚 10mg
丙酮 0.5ml
堅牢紫醬GBC 10mg
4.5 操作方法
(1)固定:新鮮乾燥塗片,用甲醛-甲醇固定液固定30s,或用甲醛蒸氣薰5~10min。
(2)水洗,涼幹。
(3)放入作用液,37℃ 30min。
(4)水洗,蘇木素染液復染1~2min。
(5)水洗,晾乾,鏡檢。
4.6 正常值
粒細胞系統的原粒細胞爲陰性反應,自早幼粒細胞至成熟中性粒細胞均爲陽性反應,酶活性並不隨細胞的成熟而增強。肥大細胞呈陽性反應。單核細胞、淋巴細胞、漿細胞、幼紅細胞、血小板細胞均呈陰性反應。
4.7 化驗結果臨牀意義
協助鑑別急性白血病類型:急性粒細胞白血病時,白血病性原始粒細胞可出現陽性反應;急性單核細胞白血病及急性淋巴細胞白血病時,白血病細胞呈陰性反應。
4.8 附註
(1)氯乙酸萘酚酯酶(NCE)最佳反應pH爲7.0~7.6之間。它不被氟化鈉抑制。
(2)嚴格遵守操作規程,如增加溫度和pH值可導致氯乙酸苦酚分解,從而在細胞內產生明顯的非特異性酯酶反應。
(3)除本法採用新品紅外,還有人選用堅固紫或堅固藍。