3 概述
冷球蛋白(cryoglobulin,CG)是指血清中在4℃時不溶解,30℃易於聚合,而在37℃時溶解的一種病理性蛋白質。冷球蛋白可存在於許多臨牀疾病中。它能結合補體產生炎症反應。而類似免疫複合物引起的疾病。冷球蛋白可分爲3型:其中Ⅰ型(佔25%)。單克隆冷球蛋白由IgM、IgG、IgA或本-周氏蛋白組成;Ⅱ型(佔25%),混合冷球蛋白,由單克隆Ig與自身IgG組成,分爲IgM-IgG、IgG-IgG、IgA-IgG;Ⅲ型(佔50%)。混合多克隆冷球蛋白。其組成爲IgM-IgG、IgM-IgG-IgA。冷球蛋白的測定常用血細胞比容管法。
4 血清冷球蛋白醫學檢查
4.1 分類
4.2 取材
4.3 原理
用在37℃預溫的注射器抽取靜脈血,置37℃水浴並分離血清,再用預溫的細長毛細滴管吸取血清注入紅細胞比積管至相應刻度處(爲刻度10),其餘血清移至尖底離心管中,均置4℃7天。取出後於4℃離心,觀察紅細胞比積管中冷沉澱物比容,作出報告。
4.4 試劑
無添加劑的全血 10ml
EDTA抗凝血 5ml
樣本處理可參照表1。
4.5 操作方法
採用一支溫氏管可鑑定冷沉澱的存在與否。冷球蛋白的測定是將血清加入溫氏管內並保持37℃(表2);爲測定冷球蛋白和冷纖維蛋白原,另取一支溫氏管注滿EDTA抗凝血漿,亦保持於37℃。
Ⅰ型單克隆冷球蛋白和冷纖維蛋白原在4℃3~18h之內可沉澱出來,混合型冷球蛋白(Ⅰ型或Ⅲ型)常需72h以上。沉澱物可呈絮狀、凝膠狀或結晶狀。
冷球蛋白和冷纖維蛋白原在37℃能重新溶解。沉澱物在37℃不溶解,不能計入測定內。低溫沉澱物的定量測定可以採用低溫沉澱物比容或採用雙縮脲方法測定經洗滌過的沉澱物蛋白的濃度。
冷沉澱的鑑別:
經離心棄去上清液的沉澱用0.9%氯化鈉離心和重新懸浮洗滌三次,最後,此沉澱物溶於0.9%的加溫氯化鈉溶液或緩衝溶液中。經免疫固定電泳,採用特異抗血清如:抗人血清、抗Ig/κ、抗Ig/λ、抗Ig/α-鏈、抗Ig/μ鏈和抗Ig/γ-鏈將沉澱物成分予以鑑定。有一泳道不加抗血清,作爲樣本空白對照,以確保在冷凝膠的點樣處不出現蛋白的沉澱。
附註:
爲了防止或減少冷球蛋白丟失,採血時首先應預溫注射器和試管,然後將血樣在37℃放置2h,使血液凝固後再分離。
4.6 正常值
Folin-Lowry法:<14mg/L (<1.4mg/dl)。
4.7 臨牀意義
少量冷球蛋白:慢性淋巴細胞性白血病、黑熱病、腎功能不全、系統性紅斑狼瘡、風溼熱、細菌性心內膜炎、淋巴肉瘤、瘧疾、結節性多動脈炎等。血清冷球蛋白高值的病型及分類見表3。