3 概述
腺病毒(adenovirus)是20面體立體對稱無囊膜的雙鏈DNA病毒。病毒衣殼由252個殼微粒組成,其中240個爲六鄰體,12個五鄰體。六鄰體分佈在20個三角面上和邊緣,五鄰體位於20面體的頂角上。每個五鄰體由一個基底和1根纖維組成,纖維頂端有一小結。纖維的長度不一,其中段蛋白決定血凝的特性,進入機體可產生血凝抑制抗體。腺病毒可引起多種疾病,最常見的有嬰幼兒急性呼吸道感染、腺病毒性肺毒性肺炎、流行性角結膜炎、咽結合膜炎,其他一些疾病如嬰幼兒腹瀉、出血性膀胱炎、心肌炎、腦膜炎等。血清學試驗對確定腺病毒感毒感染有重要意義。
4 腺病毒抗體的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 腺病毒抗體的測定原理
免疫熒光法:熒光色素具有能和抗體蛋白分子結合並保持抗體活性的特性,即抗原抗體結合成免疫複合物的特性,通過觀察熒光色素而檢測相應的腺病毒組特異性抗原。
4.5 試劑
(1)pH7.4的PBS液。
4.6 操作方法
(1)直接法:熒光標記抗體直接與病毒抗原反應。此方法簡便、快速、特異性高,但敏感性差。
①固定:將病毒抗原滴玻片上,冷丙酮中固定10min,並作陽性和陰性對照。
③染色:滴加相應的熒光抗體,置於溼盒中37℃,作用30min。
⑤晾乾:封片觀察。封片用80%的甘油和10% 0.01mol/L pH7.4的PBS液。
(2)間接法:病毒抗原先與第一抗體結合(病人恢復期血清或病毒免疫動物血清)再與第二抗體(熒光抗體)反應。該法敏感性強。
①固定:待檢病毒抗原標本按一定稀釋度滴於玻片上,同時作陽性和陰性對照,冷丙酮中固定10min。
②洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
④洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
⑥洗滌:pH 7.4 PBS液洗3次。
⑦晾乾、封片、觀察。
(3)結果判定:熒光顯微鏡鏡檢,根據特異性的熒光強度判定結果,用加減號表示:
(-):無熒光。
(+):熒光較弱,但清晰可見。
(++):熒光明亮。
(+++~++++):熒光閃亮,且範圍廣泛。
4.7 正常值
陰性。
4.8 化驗結果臨牀意義
陽性:急性呼吸道感染、急性結膜炎、胃腸炎、泌尿生殖系統感染。
4.9 附註
腺病毒感毒感染標本包括咽拭標本、鼻腔洗液、角膜拭標本、肛門拭標本、尿液標本、糞便標本等。查抗體需雙份血清標本,第一份血清標本應在症狀出現後立即採取,第二份標本應在發病後2~3周採取。應儘量縮短採取標本與檢測之間的時間,如時間長,則應將其保存於-20℃冰箱中。