4 別名
抗酒石酸酸性磷酸酶染
7 試劑
枸櫞酸 0.63g
蒸餾水 30ml
甲醇 10ml
丙酮 60ml
用濃氫氧化鈉溶液調整pH至5.4,用前過濾,4~10℃可保存1個月。
(2)基質儲備液:磷酸萘酚AS-BⅠ100mg,N,N-二甲基甲酰胺10ml,混合後置棕色瓶4~10℃可保存2~3個月。
(3)0.1mol/L乙酸緩衝液:甲液:乙酸鈉(3H2O)13.6g,溶於蒸餾水1000ml。乙液:冰乙酸6.0ml溶於l000ml蒸餾水中。用乙液滴定甲液至Ph 5.2,放4~10℃可保存3個月。
(4)0.05mol/L乙酸酒石酸緩衝液:L-酒石酸3.75g,0.1mol/L乙酸緩衝液490ml,用濃氫氧化鈉溶液調整pH至5.2,再加蒸餾水至500ml,4-10℃可保存3個月。
(5)作用液:0.05mol/L乙酸-酒石酸緩衝液50ml,基質儲備液1.0ml,堅牢紫醬GBC 25mg,溶解後過濾,立即染色,一次用完。
8 操作方法
新鮮骨髓片或血片,用冷甲醇-丙酮緩衝液固定30s,蒸餾水漂洗5~6次,晾乾。放入作液37℃保溫45~60min,水洗。用蘇木素染液或甲基綠染液復染細胞核1~6min,水洗,晾後鏡檢陽性對照(即酸性磷酸酶染色):染色過程同上,用0.1mol/L乙酸緩衝液代替乙酸-石酸緩衝液。
9 正常值
陽性:粒細胞、T淋細胞、漿細胞、巨核細胞、血小板、幼紅細胞和單核-巨噬系統細胞。
磷酸萘酚AS-BI染色法: 陽性:胞漿中有鮮紅色或深紅色顆粒,反應強度分爲6級:0~5+(染色顆粒多寡和染色深淺爲分級標準)
10 化驗結果臨牀意義
酸性磷酸酶染色能幫助鑑別戈謝細胞(呈陽性反應)及尼曼-皮克細胞(呈陰性反應);紅血病及紅白血病時幼紅細胞呈核旁單側陽性反應;多發性骨髓瘤細胞、急性單核細胞性白血病、惡性組織細胞增生症細胞、多毛細胞白血病、T淋巴細胞性白血病等均呈強陽性反應。