酸性磷酸酶

化驗及醫學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

suān xìng lín suān méi

2 英文參考

acid phosphatase

酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在於巨噬細胞,定位於溶酶體內。

溶酶體穩定完整時,底物不易滲入,ACP活力微弱或無活性,經固定,在合適pH條件下,膜本身變爲不穩定,逐漸改變其滲透性,底物可以滲入,酶活力被顯示。

ACP在酸性條件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸鈉磷酸根解離出來,進而與溶液硝酸鉛結合形成磷酸鉛沉澱,因其是難溶解的無色沉澱物,需要與黃色的硫化銨作用,生成棕黑色PbS沉澱而被顯示出來。

3 血清酸性磷酸酶

3.1 英文縮寫

ACP

3.2 標本採集

靜脈血2ml,2h內分離血清進行測定,或加入適量的酸性穩定劑,2~8℃可保存7天。

3.3 正常參考值

Bodanaky法 0~1.1 U

King-Armstrong 法1~4 U

3.4 臨牀意義

酸性磷酸酶(ACP)是由兩個相同的亞單位構成的糖蛋白,存在於前列腺、肝、腎、骨等各種組織細胞中,當細胞損傷時,ACP 釋放入血。正常人血漿ACP主要來自紅細胞白細胞血小板血清酸性磷酸酶活性不受酒石酸抑制,而來自前列腺的異構酶,又稱前列腺酸性磷酸酶(PAP),最適pH爲5,能水解磷酸脂,其活性可被酒石酸抑制,根據這一特性可測定出血清中的ACP。

增高見於:前列腺癌特別是轉移前列腺癌,ACP明顯增高,而PAP對前列腺癌的診斷更敏感前列腺肥大、前列腺炎血清ACP可增高;變形性骨炎甲狀旁腺功能亢進、溶血性疾病、急慢性粒細胞性白血病急性尿瀦留等,ACP也可增高。

4 精漿酸性磷酸酶

磷酸苯二鈉法

4.1 原理

酸性磷酸酶在酸性條件下分解磷酸苯二鈉產生遊離酚和磷酸,酚在鹼性溶液中與4-氨基安替比林作用,經鐵氰化鉀氧化成紅色醌的衍生物,根據紅色深淺測出酶活力的高低。

4.2 試劑

1、0.2mol/L枸掾酸緩衝液(pH4.9)

2、0.01mol/L磷酸苯二鈉基質

3、 鹼性溶液

4、 鐵氰化鉀溶液

精漿用等滲鹽水稀釋1000倍後按表操作

4.3 酸性磷酸酶測定步驟

測定管

對照管

稀釋精漿(ml)

0.01

-

枸掾酸緩衝液(ml)

0.5

0.5

37℃水浴5min

預溫至37℃基質液(ml)

0.5

0.5

混勻37℃水浴15min

鹼性溶液(ml)

1.0

1.0

氰化鉀溶液(ml)

1.5

1.5

混勻,510nm波長,對照管調零點讀取吸光度。

4.4 結果及參考值

以測定管吸光度-對照管吸光度,查標準曲線求酶活力

參考值:48.8-208.6μ/ml

4.5 臨牀意義

精漿酸性磷酸酶活力高低可反映前列腺功能精漿酸性磷酸酶活力下降,說明前列腺功能低下,如其活力顯著增高,對於診斷前列腺癌前列腺良性增生有重要意義。

5 酸性磷酸酶染色(ACP)

5.1 原理

血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉澱,定位於胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色爲陽性反應,無紅色爲陰性反應。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法製備2份基質液,一份再加入適量L-酒石酸,另一份不加L-酒石酸。取兩張相同標本的塗片,分別用這2種不同基質液作酸性磷酸酶染色。如果血細胞內的酸性磷酸酶耐L-酒石酸抑制的都呈陽性反應。如果不耐L-酒石酸抑制的,不加L-酒石酸的呈陽性反應,而加L-酒石酸的呈陰性反應

5.2 標本採集

選擇髂前上棘或髂後上棘或腰椎棘突或胸骨骨髓穿刺,抽取骨髓液0.1~0.2ml,製成薄塗片。

5.3 正常參考值

原始粒細胞陰性;早幼粒、中幼粒和晚幼粒細胞中度陽性成熟中性粒細胞陽性;幼稚及成熟單核細胞弱至強陽性;淋巴細胞極弱陽性漿細胞及原核細胞中度陽性血小板陽性;幼紅細胞成熟紅細胞則爲陰性

5.4 結果判斷

陽性結果爲胞質中出現鮮紅色顆粒沉澱:①(一)胞質無色。 ②(+)胞質出現淡紅色顆粒。③(++)胞質佈滿鮮紅色顆粒。④(+++)胞質充滿深紅色顆粒。

5.5 正常血細胞的染色反應

粒細胞單核細胞淋巴細胞、巨核細胞血小板漿細胞、巨噬細胞陽性

5.6 臨牀意義

1)幫助鑑別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者酸性磷酸酶染色陽性反應,後者爲陰性

2)幫助診斷多毛細胞白血病,多毛細胞白血病時多毛細胞酸性磷酸酶染色陽性反應,此酶耐L-酒石酸的抑制作用淋巴肉瘤細胞慢性淋巴細胞白血病淋巴細胞酸性磷酸酶染色也呈陽性反應,但此酸可被L-酒石酸抑制

3)網狀細胞吞噬細胞組織細胞單核細胞均呈陽性反應,故該試驗有助於急性單核細胞性白血病組織細胞性白血病淋巴瘤惡性組織細胞病的診斷。

4)幫助鑑別T淋巴細胞B淋巴細胞T淋巴細胞陽性反應醫學敎^育^網收集整理,而B淋巴細胞陰性反應

6 抗酒石酸酸性磷酸酶染色

酸性磷酶(ACP)與細胞許多生理功能和病理變化有關。用聚丙酰胺凝膠電泳證明,血細胞的ACP,由7種同工酶組成(ACP、0、1、2、3、3b、4、5、)。在某些血液病時,同功酶的出現與疾病特點和佔優勢的細胞類型有關。1970年發現毛細胞胞漿裏含有一種能對抗酒石酸抑制作用的ACP,經證明爲ACP5,並認爲用細胞化學染色技術顯示此酶,在毛細胞白血病的診斷中有重要意義。如果患者細胞爲中度或弱陽性反應,則不能診斷爲毛細胞白血病。毛細胞的酶反應積分值與患者白細胞總數和毛細胞絕對數量有關,但只要有少數毛細胞(2個以上)爲強陽反應,就可考慮診斷爲毛細胞白血病

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