2 英文參考
acid phosphatase
酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在於巨噬細胞,定位於溶酶體內。
在溶酶體膜穩定完整時,底物不易滲入,ACP活力微弱或無活性,經固定,在合適pH條件下,膜本身變爲不穩定,逐漸改變其滲透性,底物可以滲入,酶活力被顯示。
ACP在酸性條件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸鈉的磷酸根解離出來,進而與溶液中硝酸鉛結合形成磷酸鉛沉澱,因其是難溶解的無色沉澱物,需要與黃色的硫化銨作用,生成棕黑色PbS沉澱而被顯示出來。
3 血清酸性磷酸酶
3.1 英文縮寫
ACP
3.2 標本採集
採靜脈血2ml,2h內分離血清進行測定,或加入適量的酸性穩定劑,2~8℃可保存7天。
3.3 正常參考值
Bodanaky法 0~1.1 U
King-Armstrong 法1~4 U
3.4 臨牀意義
酸性磷酸酶(ACP)是由兩個相同的亞單位構成的糖蛋白,存在於前列腺、肝、腎、骨等各種組織細胞中,當細胞損傷時,ACP 釋放入血。正常人血漿ACP主要來自紅細胞、白細胞和血小板。血清酸性磷酸酶活性不受酒石酸抑制,而來自前列腺的異構酶,又稱前列腺酸性磷酸酶(PAP),最適pH爲5,能水解磷酸脂,其活性可被酒石酸抑制,根據這一特性可測定出血清中的ACP。
增高見於:前列腺癌特別是轉移性前列腺癌,ACP明顯增高,而PAP對前列腺癌的診斷更敏感;前列腺肥大、前列腺炎,血清ACP可增高;變形性骨炎、甲狀旁腺功能亢進、溶血性疾病、急慢性粒細胞性白血病、急性尿瀦留等,ACP也可增高。
4 精漿酸性磷酸酶
磷酸苯二鈉法
4.1 原理
酸性磷酸酶在酸性條件下分解磷酸苯二鈉產生遊離酚和磷酸,酚在鹼性溶液中與4-氨基安替比林作用,經鐵氰化鉀氧化成紅色醌的衍生物,根據紅色深淺測出酶活力的高低。
4.2 試劑
1、0.2mol/L枸掾酸緩衝液(pH4.9)
3、 鹼性溶液
將精漿用等滲鹽水稀釋1000倍後按表操作
4.3 酸性磷酸酶測定步驟
混勻,510nm波長,對照管調零點讀取吸光度。
4.4 結果及參考值
以測定管吸光度-對照管吸光度,查標準曲線求酶活力。
參考值:48.8-208.6μ/ml
4.5 臨牀意義
精漿酸性磷酸酶活力高低可反映前列腺的功能,精漿酸性磷酸酶活力下降,說明前列腺功能低下,如其活力顯著增高,對於診斷前列腺癌及前列腺良性增生有重要意義。
5 酸性磷酸酶染色(ACP)
5.1 原理
血細胞內的酸性磷酸酶在酸性條件下,將基質中的磷酸萘酚AS-BI水解,釋放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI與六偶氮付品紅偶聯,形成不溶性紅色沉澱,定位於胞質內,如果血細胞的胞質呈紅色爲陽性反應,無紅色爲陰性反應。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法製備2份基質液,一份再加入適量L-酒石酸,另一份不加L-酒石酸。取兩張相同標本的塗片,分別用這2種不同基質液作酸性磷酸酶染色。如果血細胞內的酸性磷酸酶耐L-酒石酸抑制的都呈陽性反應。如果不耐L-酒石酸抑制的,不加L-酒石酸的呈陽性反應,而加L-酒石酸的呈陰性反應。
5.2 標本採集
選擇髂前上棘或髂後上棘或腰椎棘突或胸骨行骨髓穿刺,抽取骨髓液0.1~0.2ml,製成薄塗片。
5.3 正常參考值
原始粒細胞陰性;早幼粒、中幼粒和晚幼粒細胞中度陽性;成熟中性粒細胞弱陽性;幼稚及成熟單核細胞弱至強陽性;淋巴細胞極弱陽性;漿細胞及原核細胞中度陽性;血小板弱陽性;幼紅細胞及成熟紅細胞則爲陰性。
5.4 結果判斷
陽性結果爲胞質中出現鮮紅色顆粒沉澱:①(一)胞質無色。 ②(+)胞質出現淡紅色顆粒。③(++)胞質佈滿鮮紅色顆粒。④(+++)胞質充滿深紅色顆粒。
5.5 正常血細胞的染色反應
粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、巨核細胞、血小板、漿細胞、巨噬細胞呈陽性。
5.6 臨牀意義
1)幫助鑑別戈謝細胞和尼曼-匹克細胞,前者酸性磷酸酶染色爲陽性反應,後者爲陰性。
2)幫助診斷多毛細胞白血病,多毛細胞白血病時多毛細胞的酸性磷酸酶染色爲陽性反應,此酶耐L-酒石酸的抑制作用。淋巴肉瘤細胞和慢性淋巴細胞白血病的淋巴細胞,酸性磷酸酶染色也呈陽性反應,但此酸可被L-酒石酸抑制。
3)網狀細胞、吞噬細胞、組織細胞和單核細胞均呈陽性反應,故該試驗有助於急性單核細胞性白血病、組織細胞性白血病、淋巴瘤及惡性組織細胞病的診斷。