5 鹼性磷酸酶染色的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 鹼性磷酸酶染色的測定原理
鹼性磷酸酶在pH 9.2~9.8的條件下,能使β-甘油磷酸磷酸磷酸鈉水解,生成磷酸鈉,經與鈣離子作用生成磷酸鈣,再與鈷離子作用生成磷酸鈷,最後與硫化銨生成黑色硫化鈷沉澱,定位於胞漿中。
5.5 試劑
(1)孵育液:30g/Lβ-甘油磷酸磷酸磷酸鈉5ml,20g/L巴比妥鈉5ml,20g/LCaCl210ml,其pH以9.2~9.5爲宜。
(2)20g/L硝酸鈷。
(3)20g/L硫化銨(新鮮配製),或10ml蒸餾水加硫化銨4滴混合。
(4)10g/L伊紅。
5.6 操作方法
(2)置標本於37℃的孵育液中,保溫6~8小時。
(3)加20g/L硝酸鈷5min。
(5)流水沖洗,加10g/L伊紅復染5min。
5.7 正常值
陽性積分正常參考值:80分以下(以計算100箇中性桿狀核和分葉核粒細胞爲準)。
5.8 化驗結果臨牀意義
積分降低:見於病毒感染,惡性組織細胞增生症,陣發性睡眠性血紅蛋白尿症,急、慢性粒細胞性自血病,紅、白血病,骨髓增生異常綜合徵,繼發性紅細胞增多症,急性單核細胞性白血病,慢性淋巴細胞白血病。當病情緩解時,積分又可上升到正常。
積分升高:見於化膿性細菌感染、急性大出血、原發性血小板增多症、再生障礙性貧血、紅血病、骨髓增生性疾病、急性淋巴細胞白血病、類白血病反應、惡性淋巴瘤、惡性腫瘤、激素治療等。再生障礙性貧血治療好轉時,積分可降低。
5.9 附註
(1)陽性積分計算方法:陽性反應主要見於粒細胞系成熟階段的分葉核和桿狀核細胞的胞質中出現灰色或棕黑色顆粒,其陽性程度分級及積分計算如下。
“+”即胞質1/2以下區域出現陽性顆粒:1分。
“++”即胞質l/2~2/3區域出現陽性顆粒:2分。
“+++”即胞質全部出現陽性顆粒,呈片狀分佈,密度較低:3分。
“++++”即胞質全部都被塊狀沉澱所充滿,密度高:4分。
(2)由於各實驗室的實驗條件不同,正常參考值也有差異。應建立本實驗室的正常值。
(3)鹼性磷酸酶活性有生理性變化。新生兒鹼性磷酸酶活性升高,以後逐漸下降。成人較兒童活性低,老年期更低。在應激狀態下,如緊張、恐懼、劇烈運動時活性可升高。月經前期,活性也可升高。
(4)鹼性磷酸酶陽性積分,在妊娠2~3個月時可輕度升高,以後逐月升高,分娩時達高峯,產後恢復正常。
5.10 相關疾病
陣發性睡眠性血紅蛋白尿、骨髓增生異常綜合徵、繼發性紅細胞增多症、慢性淋巴細胞白血病、原發性血小板增多症、再生障礙性貧血、急性淋巴細胞白血病、類白血病反應、惡性淋巴瘤