胚體外生產

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心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

pēi tǐ wài shēng chǎn

2 註解

精子卵子共置於玻璃試管或試皿內進行受精試驗,而非在體內時,即被稱之爲體外受精

初生母牛的卵巢中,約含有十至三十萬個卵母細胞,隨着成長過程,卵巢逐漸增大,重量亦隨之增加。卵母細胞的來源可以經由屠宰場取得的卵巢,採集卵巢上未成熟卵母細胞,經體外培養使其成熟,或應用超音波掃描以觀察濾泡發育狀態,自活體吸取卵母細胞

胚的體外生產系統包含:卵的體外成熟、體外受精及胚的體外培養等三大部分。早期研究體外受精技術甚爲困難,一九九○年時,美國及加拿大經由體外受精生產的小牛,總數不超過一百頭。

活體取卵是近十年來新發展的技術,經過不斷地改善,已經有商業化的儀器與設備供應。這些設備需要超音波儀,並配備固定功率的探頭,以及真空幫浦和採卵針。從超音波儀看到小濾泡時,立即將採卵針刺進小濾泡,負壓作用即將濾泡液和卵母細胞吸入離心管內。母牛每週以採集兩次所得的卵母細胞品質較好,數量也較多。平均每次約可收集到10個卵母細胞

當牛隻發育成長,排卵卵子重新進行減數分裂,使核增大。濾泡成熟的過程,需經過初級、次級、三級的發育階段,最後始成爲成熟濾泡,當卵子成熟的濾泡排出時稱爲排卵

在濾泡成熟後期卵母細胞也逐漸成熟細胞核亦進行減數分裂,達到第一次減數分裂中期的階段,稱爲初級卵母細胞。初級卵母細胞再經一次減數分裂,即分裂爲次級卵母細胞以及一個稱爲第一極體的較小細胞,此時達到第二次減數分裂中期細胞分裂的過程中,當有第一極體排出時,即顯示核已達到成熟,可以準備受精,這是重要的標記,利用立體顯微鏡即可觀察到。發育成熟的次級卵母細胞,經排卵並被精子受精後,再繼續完成其減數分裂,直到排出第二極管後纔會進行一般細胞有絲分裂發育成爲早期胚。

從屠宰場取得的卵母細胞,必須經過體外成熟階段才能進行受精。體外成熟的培養液一般採用組織培養液如TCM199,另外再添加胎牛血清,它有促進卵子體外成熟及確保較佳的卵裂效果。

精子與卵發生受精作用之前必先經過獲能,這是一個非常複雜的精子生理變化過程。在體內受精情形下,精子必須先在雌性生殖道中,經過數小時的獲能準備纔有受精能力;在這段期間中,精子發生的生理生化改變,包括去除精子表面附着的抗原物質,以及進行頭帽反應,尤其是在頭帽內至少要有四種酵素的激活和釋放。精子欲穿過卵子的透明帶,必須要靠這些酵素來溶解卵丘細胞團及透明帶。

體外精子獲能方法,主要是靠添加肝素或是咖啡因來處理。凡能促使鈣離子進入頭帽的刺激,均可誘發獲能

體外受精即是將已經完成獲能精子成熟卵母細胞,共同置於受精溶液中,然後將之靜置於二氧化碳培養箱中培養48小時。

受精完成並卵裂爲二至四細胞受精卵稱爲胚。經體外受精後的早期胚,在繼續卵裂發育的過程中,會發生發育阻滯現象。不同的動物出現細胞發育阻滯的時期不同,牛羊爲八至十六細胞期,豬爲四細胞期,小鼠爲二細胞期。因此如何克服牛的細胞發育阻滯現象,確保其發育能越過十六細胞期,是早期研究的重點。最早是利用兔子的輸卵管,將受精完成並卵裂的牛胚,移入已結紮的兔子輸卵管中,移植後第五天,再從兔子的輸卵管回收已發育桑椹期或囊胚期的胚,再進行胚移置到受胚牛。

目前用來克服早期胚在體外發生發育阻滯的方法,是採用細胞共培養系統。將胚與卵丘細胞輸卵管上皮細胞子宮上皮細胞等體細胞共同培養,即可克服發育阻滯現象,使胚能繼續發育,直到成爲桑椹期或囊胚期,再做移置。

當母牛的生理週期與胚發育階段不一致時,移入的胚不能順利發育,而導致懷孕失敗,因此必須利用內泌素對牛隻進行處理,來調整母牛的發情週期使之同期化。其目的在使母牛於預定的時間集中發情,以便實施有計畫的胚移置工作,提高受胎率。

同期發情處理應用的內分泌素有多種選擇,最常用的是前列腺素;其功能是當卵巢黃體存在時,經注射前列腺素後即被消解,於是在二至三天內又能誘發一個新的發情週期,因此能掌控排卵時間及胚移置的最佳進行時機。

當新鮮胚移置時,供胚牛與受胚牛的卵巢子宮生理狀態亦必須一致,纔有利於未來胚的持續發育着牀。胚在發育早期和子宮組織間尚未建立密切的關係,此一階段的發育,基本上是依靠本身儲存的養分,所以沖洗子宮後取得的胚,較易存活,一旦放回與供胚牛相似的受胚牛的子宮環境中,移置的胚即能繼續發育

供胚牛與受胚牛的發情同期化程度,差異不得超過六小時,否則會降低受胎率;也就是說,供胚牛在發情、配種後七至八天取胚,受胚牛也應在相同時間接受移置。

在大型哺乳動物採用非手術法移置技術,此技術從一九七六年以後即廣泛應用於牛。牛胚移置的器材與人工授精相似,僅有口徑較小與長度較長的差異而已。移置前,將胚放入胚管並且裝入移置器;移置時,自生殖道插入移置器直到子宮頸外口,另一手則深入直腸找到子宮頸,緩緩配合將移置器送入子宮角內,並在預定的位置將胚注入。

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