5 鹼性胚胎蛋白的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 鹼性胚胎蛋白的測定原理
採用雙抗體夾心法,用純化抗甲胎蛋白抗體吸附於固相載體表面,加待檢血清和酶際記抗甲胎蛋白抗體,最後加底物出現顯色反應,其顯色強弱與樣品中甲胎蛋白含量成正比。
5.5 試劑
有商品試劑盒供應,其中包括包被好抗甲胎蛋白抗體的微孔板、甲胎蛋白第二參考標準品、辣根過氧化物酶標記物(HRP-抗AFP)、底物顯色試劑(鄰苯二胺和底物緩衝液)、洗滌液和終止液等。
5.6 操作方法
按介紹操作,甲胎蛋白參考標準品可稀釋成3、6、12、25、50、100μg/L系列濃度。受檢血清爲1∶10稀釋。
結果判斷如用目測,可將待檢血清孔的顯色深淺與標準孔的顯色結果比較,再乘以稀釋倍數,可作爲半定量報告。如用酶標儀測A492值,以A492值爲縱座標、甲胎蛋白濃度爲橫座標繪製的標準曲線上查得樣品甲胎蛋白濃度,再乘以稀釋倍數即爲定量結果。
5.7 正常值
血清:<80μg/L。
5.8 化驗結果臨牀意義
鹼性胎兒蛋白增高見於:原發性肝癌、膽管癌、膽囊癌、胰腺癌,其次對胃癌、肝癌臨牀抗癌療效的判斷及術後復發的監測有一定意義。良性疾病也有一定升高,對陽性結果應結合臨牀加以綜合分析。
5.9 附註
(1)現有一步法酶標檢測甲胎蛋白試劑盒供應,該法將樣品和酶標記物加在一起共同溫育1h後顯色,其操作更加簡單快速。
(2)甲胎蛋白斑點酶免疫試驗(DEIA)檢測,其操作要點是在硝酸纖維薄膜上點加抗甲胎蛋白抗體2μl,室溫乾燥15min,用10g/L牛血清白蛋白封閉1h,用濾紙吸乾後,加待檢血清2μl,置室溫30min,用含1%吐溫-20的洗滌液洗膜3次,吸乾後加抗AFP抗體-酶標記物,置37℃溫育1.5h後洗膜4次,加底物作用5~10min,然後將薄膜浸入水中終止反應,以加樣位點出現呈色斑點判爲陽性。