2 英文參考
Determination of fluoride in urine—Ion ive electrode method
ICS 11.020
C 61
中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 89—2015《尿中氟化物測定 離子選擇電極法》(Determination of fluoride in urine—Ion selective electrode method)由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會於2015年05月07日發佈,自2015年11月01日起實施,同時代替WS/T 89—1996。
3 前言
本標準按照GB/T 1.1—2009給出的規則起草。
本標準代替WS/T 89—1996《尿中氟化物的測定 離子選擇電極法》。
本標準與WS/T 89—1996相比,主要技術變化如下:
——修改了方法所用去離子水質量符合GB/T 6682中二級水規格;
——修改了原標準中使用假尿溶液製作標準曲線的方法,採用總離子強度調節緩衝液直接製作標準曲線,測定尿氟含量;
——修改了尿樣測定取樣量,減少了總離子強度緩衝液使用體積量;
——刪除了原標準的標準加入法。
本標準起草單位:中國疾病預防控制中心地方病控制中心、山東省地方病防治研究所、山西省地方病防治研究所、四川省疾病預防控制中心。
本標準主要起草人:於光前、邊建朝、王偉、程曉天、朱嵐、楊小靜、紀曉紅。
本標準所代替標準歷次版本發佈情況爲:
——WS/T 89—1996。
5 2 原理
氟化鑭單品對氟離子有選擇性,在氟電極的氟化鑭單晶膜兩側的不同濃度氟化物溶液之間存在電位差,通常稱爲膜電位。膜電位的大小與溶液中氟離子活度有關,在一定活度範圍內,氟電極與甘汞電極組成的一對電化學電池的電動勢與氟離子活度的對數呈線性關係,可測定尿中氟離子濃度。
6 3 試劑
6.1 3.1 試劑使用要求
本標準使用的化學試劑除氟化鈉需用優級純外,其他試劑均用分析純,所用水爲去離子水(符合GB/T 6682中二級水規格)。
6.2 3.2 冰乙酸(冰醋酸)
ρ20=1.06 g/mL。
6.3 3.3 氫氧化鈉溶液(10 mol/L)
稱取40 g氫氧化鈉(NaOH),溶於水中,稀釋至100 mL。
6.4 3.4 總離子強度調節緩衝液
稱取58 g氯化鈉,2.94 g檸檬酸鈉(Na3C6H5O7·2H2O),溶於600 mL水中,加入57 mL冰乙酸(冰醋酸),用氫氧化鈉溶液(3.3)調節pH至5.0~5.5,加水定容至1000 mL。
6.5 3.5 氟化物標準溶液製備
3.5.1 氯化物標準儲備液[ρF-=1.00 mg/mL]
準確稱取烘至恆重(105℃~120℃烘乾2h)的氟化鈉0.2210 g於燒杯中,加水溶解,用水將氟化鈉溶液全部洗入100 mL容量瓶中,定容,搖勻,轉移至聚乙烯塑料瓶中,置於冰箱內冷藏。
3.5.2 氯化物標準使用溶液A[ρF-=100μg/mL]
吸取10.00 mL氟化物標準儲備液(3.5.1)於100 mL容量瓶中,用水稀釋、定容至刻度,搖勻,轉貯於聚乙烯塑料瓶中,置於冰箱內冷藏。亦可使用國家標準樣品,製得氟化物標準使用溶液A。
吸取10.00 mL氟化物標準使用溶液A(3.5.2)於100 mL容量瓶中,用水稀釋、定容至刻度,搖勻,貯於聚乙烯塑料瓶中,置於冰箱內冷藏。
9 6 分析步驟
9.1 6.1 標準曲線製備
9.1.1 6.1.1 配製標準系列
分別準確量取氟化物標準使用溶液B(3.5.3) 0.25 mL、0.50 mL、1.25 mL、2.50 mL及氟化物標準使用溶液A(3.5.2) 0.50 mL、1.25 mL、2.50 mL於25 mL容量瓶內,加水定容。此標準系列的氟化物濃度分別爲0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L。
9.1.2 6.1.2 測定平衡電位值
分別取6.1.1配製的氟化物標準系列溶液5.0 mL於25 mL燒杯中,分別加入5.0 mL總離子強度調節緩衝液,放入磁芯攪拌棒,置於電磁力攪拌器上,插入氟電極和飽和甘汞電極,攪拌。當電位值變化≤0.5 mV/min時,在攪拌下讀取平衡電位。由低濃度到高濃度依次測定各溶液的平衡電位值。
9.1.3 6.1.3 計算標準曲線迴歸方程
用計算器或計算機求得電位值E(mV)與標準系列濃度c(mg/L),按照式(1)計算迴歸方程,得到標準曲線。同時計算迴歸方程的相關係數(r),要求相關係數大於0.999。
E=a+b×lgc ………(1)
式中:
E——電位值,單位爲毫伏(mV);
a——標準曲線迴歸方程的截距;
b——標準曲線迴歸方程的斜率;
c——標準溶液中氟化物的質量濃度(F-),單位爲毫克每升(mg/L)。
9.2 6.2 樣品測定
取5.0 mL搖勻後的尿樣於25 mL燒杯中,加5.0 mL總離子強度調節緩衝液。按6.1.2步驟,測得平衡電位值,由標準曲線求得樣品氟含量。測定樣品時,要將電極洗到要求的空白電位值,再進行測定。
10 7 結果計算
10.1 7.1 用標準曲線計算樣品測定溶液中氯化物濃度
用標準曲線計算樣品測定溶液中氟化物濃度,按照式(2)進行計算:
式中:
E——電位值,單位爲毫伏(mV);
a——標準曲線迴歸方程的截距;
b——標準曲線迴歸方程的斜率;
c——用標準曲線計算得到的樣品溶液中的氟化物質量濃度(F-),單位爲毫克每升(mg/L)。
10.2 7.2 計算尿中氟化物的濃度
尿中氟化物的濃度,按照式(3)進行計算:
cx=n×c ………(3)
式中:
cx——尿中氟化物(以F-計)質量濃度,單位爲毫克每升(mg/L);
n——尿樣稀釋倍數;
11 8 說明
11.1 8.1 精密度
17個實驗室,每個實驗室6次平行測定含氟量爲0.36 mg/L的尿樣,實驗室內相對標準偏差在0.6%~5.9%之間,實驗室間相對標準偏差爲6.4%;測定含氟量爲3.81 mg/L的尿樣,實驗室內相對標準偏差在0.4%~4.1%之間,實驗室間相對標準偏差爲5.4%。
11.2 8.2 準確度
同一實驗室對含氟0.36 mg/L尿樣進行加標回收實驗,4次平行測定的回收率平均值爲97.3%,範圍爲96.5%~98.0%;含氟3.81 mg/L尿樣加標回收實驗,4次平行測定的回收率平均值爲99.7%,範圍爲98.9%~100.5%。
11.3 8.3 檢測下限
定量檢測下限爲0.1 mg/L。