4 血清補體C4裂解產物的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 取材
4.4 血清補體C4裂解產物的測定原理
抗原在含有一定量的單一抗體瓊脂中進行電泳,在電場力的作用下,兩者比例合適時形成沉澱峯類似火箭而得名。沉澱峯的高度與抗原濃度成正比,與抗體濃度成反比,因此可以作爲抗原定量試驗。
4.5 試劑
(1)0.025mol/L pH8.6巴比妥緩衝液 稱巴比妥鈉10.3g,巴比妥1.84g,加入蒸餾水500ml,加熱助溶,待冷,加蒸餾水至1000ml,即成0.05mol/L pH8.6巴比妥緩衝液。再取0.05mol/L巴比妥緩衝液1份,加等量的蒸餾水即成0.025mol/LpH8.6巴比妥緩衝液。
4.6 操作方法
(1)製備抗體瓊脂糖板 取已融化的10.0g/L瓊脂糖凝膠與適當濃度的抗C4血清混合,澆板(8cm×8.5cm),待冷卻凝固後打孔。
(2)在距一邊1cm處打孔8個,孔徑爲3mm,孔間距5mm,挑去孔內瓊脂糖。
(3)各孔內分別加入1∶4稀釋的待檢血清和不同濃度的C4參考血清10μl。以三層濾紙爲橋,置0.025mol/L pH8.6巴比妥緩衝液的電泳槽內進行電泳,將有孔的一端連接陰極,端電壓3~4V/cm,電泳4~5h後,關閉電源,取下瓊脂板測量。
4.7 正常值
4.8 化驗結果臨牀意義
C4含量升高見於風溼熱的急性期、多發性骨髓瘤(比正常值大8倍)、結節性動脈周圍炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter綜合徵和各種類型的關節炎等;
降低常見於自身免疫性慢活肝、SLE、多發性硬化、類風溼性關節炎、腎病、亞急性硬化性全腦炎等。在SLE,C4的降低常早於其他補體成分,且較其他成分回升遲。狼瘡性腎炎較非狼瘡性腎炎C4值顯著低下。
各型乙型肝炎下降程度:慢性活動性肝炎>急性肝炎、慢性遷延性肝炎等傳染病。
4.9 附註
(1)抗原、抗體比例要適宜。抗原過濃不能得到圓錐狀尖峯,而抗體太濃使沉澱峯太低,影響試驗的靈敏度。
(3)C4不很穩定,在4℃貯存2周或-20℃ 60天均可使C4值增加36%左右。而在1周內還是相對穩定的。