縮宮素生物檢定法

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

suō gōng sù shēng wù jiǎn dìng fǎ

2 註解

本法系比較垂體後葉標準品(S)與供試品(T)引起離體大鼠子宮收縮的作用,以測定供試品的效價

2.1 標準品溶液的配製

迅速精密稱取垂體後葉標準品適量,注意避免吸潮,先加少量0.25%醋酸溶液,仔細研磨,移置硬質大試管中,再精密加0.25%醋酸溶液使成每1ml中含縮宮素1單位的溶液。管口輕放一玻璃塞,浸入沸騰的水中,時時振搖,加熱5分鐘取出,迅速冷卻,濾過,濾液分裝於適宜的容器內,4~8℃貯存,如無沉澱析出,可在3個月內使用。

2.2 標準品稀釋液的配製

試驗當日,精密量取標準品溶液適量,按高低劑量組(ds<[2]>,ds<[1]>)加0.9%氯化鈉溶液配成兩種濃度的稀釋液,一般高濃度稀釋液可配成每1ml中含0.01~0.02單位,高低劑量的比值(r)一般不得大於1:0.7。調節劑量使低劑量能引起子宮收縮,一般在20~50mm;高劑量應不致使子宮收縮達到極限,一般爲50~85mm,且高低劑量所致子宮的收縮應有明顯差別。

供試品溶液與稀釋液的配製 按供試品的標示量或估計效價(A<[T]>),照標準品溶液與其稀釋液的配製法配成,高低兩種濃度的稀釋液,其比值(r)應與標準品相等,供試品和標準品高低劑量所致的反應均值應相近。

2.3 子宮肌蓄養液的配製

試驗當日,取氯化鈉9g、氯化鉀0.42g、 氯化鈣(按無水物計算)0.06g與葡萄糖0.5g,加水700ml使溶解,另取碳酸氫鈉0.5g,加水約200ml溶解 後,緩緩傾注於前一溶液中,隨加隨攪拌,最後加水適量使成1000ml。

2.4 供試用動物

取健康無傷的成年雌性大鼠,斷乳後即與雄鼠隔離,出生後不超過 3個月,體重160~240g。試驗當日,選擇陰道塗片在動情前期的動物,也可用雌性激素處理使子宮塗片爲動情前期或動情期的動物。

2.5 檢定法

取選定的大鼠迅速處死,剖腹取出子宮,仔細分離附在子宮肌上的結締組織,注意避免因牽拉使子宮肌受損。在子宮分叉處剪下左右2條,取一條將其下端固定於離體器官恆溫水浴裝置的浴杯底部,上端用線與記錄裝置相連,以描記子宮收縮;浴杯中加入一定量的子宮肌蓄養液(約30~50ml),連續通入適量空氣。蓄養液應調節至32~35℃之間並保持恆溫(±0.5℃),子宮放入浴杯後,靜置約15分鐘,按次序準確注入等體積的標準品或供試品兩種濃度的稀釋液(0.3~0.8ml),待子宮肌收縮至最高點開始松馳時(約60~90秒鐘),放去蓄養液並用蓄養液洗滌一次,再加入等量蓄養液,靜置;相鄰兩次給藥的間隔時間應相等(約3~5分鐘),每次給藥應在前一次反應恢復穩定以後進行。標準品稀釋液和供試品稀釋液各取高低兩個劑量(ds<[2]>、ds<[1]>、dT<[2]>、dT<[1]>)爲一組,按隨機區組設計的次序輪流注入每組四個劑量,重複4~6組。測量劑量所致子宮收縮的高度,照生物檢定統計法(附錄ⅩⅣ)中的量反應平行線測定法計算效價及實驗誤差

本法的可信限率(FL%)不得大於10%

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