尿環磷鳥苷

1 拼音

niào huán lín niǎo gān

2 英文參考

urine cyclic phosphazene guanosine

3 概述

環鳥苷酸是由細胞內鳥苷三磷酸（GTP）經鳥苷酸環化酶催化所產生。目前認爲環鳥苷酸和環腺苷酸是相互拮抗的物質，在正常生理狀態下，組織或血漿中的環腺苷酸和環鳥苷酸濃度的比值保持相對恆定，在分析中往往同時測定這兩種物質的濃度，兩者比例失調是某些疾病發病機制的一項客觀指標。

4 別名

尿環磷酸鳥苷

5 尿環磷鳥苷的醫學檢查

5.1 檢查名稱

尿環磷鳥苷

5.2 分類

體液和排泄物檢查 > 尿液檢查

5.3 化驗取材

尿液

5.4 尿環磷鳥苷的測定原理

[³H]-標記測定法：cGMP是繼cAMP之後1963年Price發現的另一種環核苷酸。其結構和cAMP基本相似，由鳥苷、核糖和磷酸所組成。測定原理也與cAMP相似，即樣品經預處理，將樣品和標準同時進行酰化反應，以改善抗體對待測物的親和力，提高測定方法的靈敏度。樣品和[³H]-ScGMP共同競爭性的與抗體結合，從標準劑量反應曲線計算出樣品中cGMP濃度。

5.5 試劑

（1）抗血清：以ScGMP-BSA結合物免疫動物獲得。與cAMP交叉反應爲零，滴度爲1∶12000。

（2）[³H]-cGMP：中國原子能研究院產品，比放射活性814GBq（22Ci）/mmol。4℃冰箱貯存。

（3）50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩衝液：同[³H]-cAMP測定法。

（4）[³H]-ScGMP：取[³H]-cGMP 92.5kBq（2.5μCi）加至帶玻璃塞提取管中，加琥珀酸酐5mg，蒸餾水0.1ml。再加三乙胺10μl，即刻用力搖1～2min，加50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩衝液10ml。臨用前配製。

（5）標準cGMP液（8nmol/ml）：取AR級cGMP少許溶於雙蒸餾水中。在紫外分光光度計260nm（1cm比色杯）測A值。按照cGMP260nm的A值除以11.7即得cGMPmmol/L。再以蒸餾水稀釋8nmol/ml。

（6）標準cGMP（80pmol/瓶）：取標準cGMP液10μl加至5ml瓶中，放37℃乾燥，加蓋密封放4℃保存。臨用前，取標準cGMP一瓶，加2ml 50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩衝液溶解，爲S₆。另取試管5只各加緩衝液0.5ml，從S₆中吸出0.5至S₅，依次倍比稀釋，此係列標準濃度100μl中含有4，2，1，0.5，0.25，0.125pmol。

（7）閃爍液：同[³H]-標記cAMP測定法。

5.6 操作方法

（1）樣品的採集和預處理：同[³H]-標記cAMP測定法。

（2）加液程序：取10mm×100mm玻璃試管，註明NSB、S₀、S_1～5和測定。按表1程序加入樣品和試劑。

（3）加[³H]-ScGMP和抗血清後，混勻，放4℃反應2.5h，每管補加冷50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩衝液1ml，混合勻充。

（4）取硝酸纖維膜（上海化工研究院產品）浸於50mmol/L pH6.2醋酸鹽緩衝液中2h，然後放置在專用濾器上。將反應液滴加至濾膜上抽濾，再用1ml相同緩衝液洗反應管2次，亦加至濾膜上洗滌和抽濾。

（5）將濾膜放80℃ 30min乾燥。另取[³H]-ScGMP50μl滴至另一張乾燥濾膜上，作爲總計數（T）。

（6）將膜放至預先加5ml閃爍液的瓶中，放2～3h後測放射性。

（7）零標準淨計數B₀，標準管淨計數爲B，以B₀/B爲縱座標，標準管cGMP的Pmol爲橫座標，在普通座標紙作圖，在Y軸截距1處得出一條直線。依樣品管B₀/B值，在標準劑量反應圖上得出相對應cGMP的值。再乘5得nmol/L。

5.7 正常值

0.22～0.68μmol/g·肌酐。

5.8 化驗結果臨牀意義

（1）升高：甲狀腺功能亢進、甲狀旁腺功能亢進、肝硬化、惡性腫瘤。

（2）降低：甲狀腺功能減退、甲狀旁腺功能減退。

5.9 附註

（1）目前中國原子能研究院提供的[³H]-cGMP系附着於濾紙條的乾燥品，不易直接精確取量，可將紙條浸於50%乙醇中，取一定量測放射性，根據閃爍液及儀器的測量效率由cpm換算成dpm，再由dpm換算成放射劑量。

（2）尿液，胃液和腦脊液樣品可按血漿相同方法預處理後測定。

（3）[³H]-標記測定法穩定性好，靈敏度略低於[¹²⁵I]標記法。

（4）以ScGMP-BSA免疫動物所製備的抗體，其親和力對ScGMP比cGMP約高兩個數量級，故樣品，標準和[³H]-標記物要經琥珀酰或乙酰化反應處理。以提高測定方法的靈敏度。

5.10 相關疾病

肝硬化