抗鏈球菌溶血素O試驗

化驗及醫學檢查 補體結合試驗 血清學檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 概述

鏈球菌溶血素“O”試驗,簡稱抗“O”,是機體產生的以鏈球菌溶血素O爲抗原抗體。通過測定血清中的ASO抗體效價,來判斷病人有無A族溶血鏈球菌感染,可作爲A族溶血鏈球菌感染性疾病的輔助診斷方法之一。但本試驗無特異性意義,因爲A族鏈球菌感染後,可引起人類多種疾病,如鏈球菌感染引起相應的扁桃體炎猩紅熱急性腎炎、亞急性細菌性心內膜炎、腎病綜合徵等均可引起ASO升高。人感染溶血鏈球菌後,血清中可以出現多種抗體,如抗鏈激酶抗體、抗透明質酸抗體和抗“O”溶血抗體,而抗“O”溶血抗體檢測風溼病是否活動的一種血清學診斷試驗較有意義。風溼病活動期60%~80%的病人ASO是升高的,多次檢測均正常有助於排除風溼病

5 化驗取材

血液

6 抗溶血性鏈球菌“O”試驗的原理

鏈球菌溶血素O對氧不穩定,在空氣中迅速失去溶血活力,檢測ASO時,先將鏈球菌溶血素O還原,恢復其溶血活力,再與不同稀釋度的病人血清混合,繼加O型紅細胞或兔紅細胞懸液作爲指示劑。如溶血素O被血清中的相應抗體所中和,則加入的指示紅細胞不被溶解。如血清中無相應抗體抗體量不足以中和加入的溶血素,則發生不同程度的溶血現象。

7 試劑

(1)溶血素O:有商品供應,按介紹稀釋後使用,溶血素O活性(結合單位)的標定必須用丹麥國立血清研究所製備的WHO標準抗溶血素O抗體精確滴定溶血素O對熱不穩定短期保存可存放於4~10℃冰箱,幾個月以上應低溫冰凍貯存。

(2)ASO緩衝液:取磷酸氫二鈉十二水合物9.06g,磷酸二氫鈉水合物10.89g,氯化鈉4.6g,使溶於少量蒸餾水後並補足至1000ml,pH值爲6.5。

(3)紅細胞懸液:取枸櫞酸鈉抗凝的兔或O型人血,用ASO緩衝液洗滌3次,最後1次洗滌後,必須經2000r/min離心10~15min,離心後儘可能吸盡無色的上清液,並以ASO緩衝液配製成5%懸液,用時輕輕搖勻。

(4)還原劑:商品還原片劑可按介紹使用,其主要成分是2∶1的無水亞硫酸氫鈉無水亞硫酸鈉。也可在臨用前將ASO緩衝液以2mol/L氫氧化鈉pH值到8.0,加入L-半胱氨酸鹽7g/L使溶解即成。

8 操作方法

(1)用ASO緩衝液將血清標本稀釋成1∶100和1∶500二個稀釋度。

(2)按介紹建議配製1結合單位/ml的還原溶血素O,準確吸取一定量溶血素,首先用還原劑溶液稀釋到最終體積的1/3左右,放置15min,使溶血素充分還原,然後準確稀釋到指定體積,在45min內使用。

(3)取70×100mm小試管按表1所列步驟操作,並以已知ASO單位的標準血清作對照。

(4)結果報告:主要觀察上清液是否有溶血現象,以呈完全不溶血血清最高稀釋倍數爲該標本的ASO單位/ml。

9 正常值

<500U。

10 化驗結果臨牀意義

(1)升高:

溶血鏈球菌感染猩紅熱丹毒鏈球菌性咽炎扁桃體炎。對風溼熱急性腎小球腎炎有間接診斷價值、若多次檢測結果遞增、並伴有紅細胞沉降率(ESR)加快可有助於診斷。

②少數非溶血鏈球菌感染病毒性肝炎腎病綜合徵結核病、結締組織病亞急性感染性心內膜炎多發性骨髓瘤等。

③寒冷地區、寒冷季節。

(2)降低:藥物性(水楊酸鹽類、腎上腺皮質激素抗生素)。

11 附註

(1)試管或試劑被膽固醇污染樣品細菌污染,特別是金黃魚葡萄球菌綠膿桿菌,均可抑制溶血溶血活力,從而引起假陽性結果。

(2)溶血素O結合單位的標定不準確或保存不當使所含單位數跌落,將嚴重影響結果。故需經常用已知單位的血清作對照,以便及時發現問題。

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