5 方法及內容
1.血樣本預處理同ABO系HDN檢查。
注:Rh系HDN,因患兒紅細胞上的抗原已被不完全抗體佔據,不能再與完全抗體結合,此爲“遮斷”現象。如用完全抗體來檢查患兒的Rh血型,可能是假陰性結果。
3.直接抗人球蛋白試驗。
用放散液與配組譜細胞作間接抗人球蛋白試驗,以鑑定特異性抗體。
結果判讀:放散液與相應抗原起反應,則表示患兒血清中有相應的抗體。
鹽水介質法:①取小試管多支(依配組譜細胞數目而定),標明序號。②在上述各管中分別加入患兒血清1滴。③再分別加入相應的配組譜細胞1滴。④3000r/min離心15s後觀察結果。
抗人球蛋白介質法:①於鹽水介質法觀察結果後各管混勻,置37℃水浴箱中溫育 30min。②用生理鹽水洗滌3次,末次吸乾上清液,於各管分別加入生理鹽水及抗人球蛋白試劑1滴。③以3000r/min離心15s,肉眼觀察結果。
酶介質法:①取小試管若干支,標明序號 (根據配組譜細胞數目而定)。②在各管中加入患兒血清1滴,並加入相應的配組譜細胞1滴,再加入1%菠蘿酶1滴。③混勻,置37℃水浴箱溫育30min。④以3000r/min離心15s,肉眼觀察結果。
注:Rh系HDN,由於來自母體的IgG抗體大部分被患兒紅細胞所吸附,因此血清中抗體的量不很高,甚至陰性。特別是當抗體不很強時尤其如此。因此Rh系HDN的血清檢查常採用直接抗人球蛋白試驗和抗體放散試驗。如兩項試驗結果爲陽性,即能確定其免疫抗體。