血清丙氨酸氨基轉移酶

酶類測定 化驗及醫學檢查 血液生化檢查

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
醫學百科APP(安卓 | iOS | Windows版)

您的醫學知識庫 + 健康測試工具

https://www.wiki8.cn/app/

1 概述

丙氨酸氨基轉移酶(ALT)是通常所稱谷丙轉氨酶(CPT),存在於各組織細胞,以肝臟含量最多,其次是心肌細胞內,血清酶活性很低。當這些組織病變,細胞壞死或通透性增強時,細胞內酶釋放入血,使血清中ALT活性增高。血清ALT測定主要用於肝臟病的診斷。其測定方法比色法和連續監測法。前者操作簡單,不需特殊試劑和儀器,但結果不夠準確,重複性理想;後者快速,結果準確,是公認的好方法,但對試劑和儀器要求較高。

3 血清谷丙轉氨酶醫學檢查

3.1 檢查名稱

血清谷丙轉氨酶

3.2 分類

血液生化檢查 > 酶類測定

3.3 取材

血液

3.4 血清谷丙轉氨酶的測定原理

(1)比色法測定:ALT催化基質中的丙氨酸α-酮戊二酸反應,生成穀氨酸丙酮酸,後者與2,4-二硝基苯作用,生成苯腙,在鹼性條件下顯色。

(2)連續監測法:在ALT催化的反應中生成的丙酮酸,被LDH還原成乳酸,並使NADH氧化成NAD,在340nm波長下吸光度降低,NADH的氧化速率與ALT活力成正比。

3.5 試劑

(1)比色法測定:

①0.1mol/L磷酸緩衝液(pH7.4)。

A液:稱磷酸二氫鉀13.6g,溶於水中,加水至1000ml,冰箱保存

B液:稱磷酸氫二鈉(含兩個結晶水)17.6g,溶於水中,並加水至1000ml,冰箱保存

取A液80ml,B液420ml混合,置冰箱內保存即可。

②ALT基質液:精確稱取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg,溶於50ml磷酸鹽緩衝液中,用1mol/L NaOH溶液(約0.5ml)校正pH7.4,再加磷酸緩衝液至100ml,可穩定2周。加麝香草酚90mg,可延長使用時間。

③1mol/L 2,4-二硝基苯肼(DNPH)溶液:稱取DNPH 19.8mg,溶於1000ml 1mol/L HCl中,置室溫保存

④0.4mol/L NaOH溶液:溶解16.0g NaOH於水中,並加至1000ml,置帶塞塑料瓶內,置室溫保存

⑤2mmol/L丙酮酸標準液:可購買或自配。準確稱取22.0mg丙酮酸鈉(AR),置於100ml容量瓶中,加0.05mol/L硫酸至刻度。

(2)連續監測法:

基質液的成分和濃度(IFCC):100mmol/L Tris緩衝液(pH7.5),15mmol/L α-酮戊二酸,500mmol/L L-丙氨酸,0.18mmol/L NADH,0.1mmol/L磷酸吡哆醛,1200U/L乳酸脫氫酶

②市售試劑盒:按介紹用蒸餾水或稀釋液溶解,用後置冰箱保存,一般可穩定4天。

3.6 操作方法

(1)比色法測定:其基質液37℃預溫,按表1操作。

混勻,置37%水浴20min,各管加0.4mol/L NaOH溶液5ml,混勻,置室溫5min後,在505nm處用對照管調零點,讀取各管吸光度,查標準曲線即得ALT活力單位。

(2)連續監測法:各實驗室可根據本室的分析儀型號及操作介紹而定。主要參數:340nm波長,37℃,樣本與試劑體積比爲1∶10。

3.7 正常值

(1)比色法測定:5~25卡門單位。

(2)連續監測法:成人5~40U/L(基質中含P-5’-P時爲8~50U/L)。

3.8 化驗結果臨牀意義

ALT測定對肝炎的診斷、療效觀察和預後估計均具有重要價值。

(1)急性肝炎顯著升高,尤其對無黃疸、無症狀肝炎的早期診斷更有幫助,其陽性率高,陽性出現時間較其他試驗早,其活性的高低隨肝病的進展和恢復而升降,據此可觀察病情及預後。ALT持續處於高水平或反覆波動,表示病變仍在進行或轉爲慢性肝炎。若黃疸加重,ATL反而降低,即所謂的“膽酶分離”現象,常是肝壞死的先兆。

(2)慢性肝炎、肝硬化肝癌等ALT活性輕度升高。

(3)膽道疾病、心肌骨骼肌損傷也可引起ALT升高。

3.9 附註

比色法測定:

(1)嚴重黃疸溶血、脂血標本可使測定結果偏高,以自身血清作對照可消除之。

(2)超過正常的標本應複查,>150U時應用生理鹽水稀釋後重新測定,其結果乘以稀釋倍數。

(3)定期校正儀器、加樣器和吸管,更換儀器或基質液時應重新繪製標準曲線。

3.10 相關疾病

黃疸肝硬化

特別提示:本站內容僅供初步參考,難免存在疏漏、錯誤等情況,請您核實後再引用。對於用藥、診療等醫學專業內容,建議您直接咨詢醫生,以免錯誤用藥或延誤病情,本站內容不構成對您的任何建議、指導。