4 腦脊液結核性腦膜炎抗體的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 腦脊液結核性腦膜炎抗體的測定原理
ELISA的原理是基於抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學活性,抗原或抗體的酶結合物既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成抗原抗體複合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化爲有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高,故可極大地放大反應的結果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
4.5 試劑
ELISA的主要試劑爲固相的抗原或抗體,酶標記的抗原或抗體和與標記酶直接關聯的酶反應底物。這些試劑的製備比較複雜,在臨牀檢驗中均採用商品的試劑盒,其中配有該項測定中所需的全部試劑,但國內某些商品中僅提供主要試劑,操作者需自作固相的包被和一些溶液的配製。目前國內常用的ELISA檢驗主要是以辣根過氧化物酶(HRP)爲標記物的微孔板法,本文以此法爲主,敘述其技術要點。
完整的ELISA試劑盒應包含以下各組分;①已包被抗原或抗體的固相載體。②酶標記的抗原或抗體(結合物)。③酶的底物。④陰性對照和陽性對照(定性測定),參考標準和控制血清(定量測定)。⑤結合物及標本的稀釋液。⑥洗滌液。⑦酶反應終止液。
4.6 操作方法
使用ELISA操作法。
4.7 正常值
爲陰性。
4.8 化驗結果臨牀意義
結核桿菌抗體陽性證明有結核菌感染,陽性率爲84%。如果腦脊液中抗體水平高於自身血清,這對結核性腦膜炎的診斷及鑑別更有價值。
4.9 附註
ELISA爲多反應、多試劑、多步驟的檢驗方法,必須嚴格按照要求細心謹慎操作,否則得不到準確的結果。