1 拼音
huà zhuāng pǐn zhōng 32zhǒng jìn xiàn yòng rǎn liào chéng fēn de jiǎn cè fāng fǎ
《化妝品中32種禁限用染料成分的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發佈。
2 1 適用範圍
本方法規定了測定染髮類化妝品中32種禁限用染料成分(見附錄A)的高效液相色譜法。
本方法適用於染髮類化妝品中32種禁限用染料成分的含量測定。化妝品中的染料成分以多種形式存在,如硫酸鹽、鹽酸鹽等,當各種形式同時存在時,應以其中的一種形式表示。
3 2 方法提要
用無水乙醇+水=1+1的混合溶液提取染髮類化妝品中的32中禁限用染料成分,用高效液相色譜儀進行分析,以保留時間和紫外吸收光譜定性,峯面積定量。本方法中32種禁限用染料成分的檢出限、定量下限及取0.5g樣品時的檢出濃度及最低定量濃度見表1。
表1 32種禁限用染料成分的檢出限、檢出濃度、定量下限、最低定量濃度
序號 | 物質名稱 | 檢出限/ μg | 檢出濃度/(μg/g) | 定量下限/ μg | 最低定量濃度/(μg/g) |
1 | p-苯二胺 | 1.2′10-2 | 48 | 3.5′10-2 | 140 |
2 | 6.5′10-3 | 26 | 2.0′10-2 | 80 | |
3 | 甲苯-2,5-二胺硫酸鹽 | 2.0′10-2 | 80 | 6.0′10-2 | 240 |
4 | 6.5′10-3 | 26 | 2.0′10-2 | 80 | |
5 | o-苯二胺 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 |
6 | 2-氯-p-苯二胺硫酸鹽 | 1.5′10-2 | 60 | 5.0′10-2 | 200 |
7 | 6.5′10-3 | 26 | 2.0′10-2 | 80 | |
8 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 | |
9 | 2-硝基-p-苯二胺 | 5.0′10-3 | 20 | 1.5′10-2 | 60 |
10 | 甲苯-3,4-二胺 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 |
11 | 6.5′10-3 | 26 | 2.0′10-2 | 80 | |
12 | 2-甲基雷瑣辛 | 1.3′10-2 | 52 | 4.0′10-2 | 160 |
13 | 1.0′10-2 | 40 | 3.0′10-2 | 120 | |
14 | 苯基甲基吡唑啉酮 | 2.0′10-2 | 80 | 6.0′10-2 | 240 |
15 | N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺hcl | 2.0′10-2 | 80 | 6.0′10-2 | 240 |
16 | 6.5′10-3 | 26 | 2.0′10-2 | 80 | |
17 | m-苯二胺 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 |
18 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 | |
19 | 3.0′10-3 | 12 | 1.0′10-2 | 40 | |
20 | 8.0′10-3 | 32 | 2.5′10-2 | 100 | |
21 | 1.3′10-2 | 52 | 4.0′10-2 | 160 | |
22 | N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽 | 2.5′10-2 | 100 | 7.5′10-2 | 300 |
23 | 1.0′10-2 | 40 | 3.0′10-2 | 120 | |
24 | 4-硝基-o-苯二胺 | 1.5′10-2 | 60 | 5.0′10-2 | 200 |
25 | 1.5′10-2 | 60 | 5.0′10-2 | 200 | |
26 | N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽 | 2.5′10-2 | 100 | 7.5′10-2 | 300 |
27 | 6-羥基吲哚 | 3.0′10-3 | 12 | 1.0′10-2 | 40 |
28 | 4-氯雷瑣辛 | 5.0′10-3 | 20 | 1.5′10-2 | 60 |
29 | 2,7-萘二酚 | 3.0′10-3 | 12 | 1.0′10-2 | 40 |
30 | N-苯基-p-苯二胺 | 2.5′10-3 | 10 | 8.0′10-3 | 32 |
31 | 1,5-萘二酚 | 5.0′10-3 | 20 | 1.5′10-2 | 60 |
32 | 3.0′10-3 | 12 | 1.0′10-2 | 40 |
4 3 試劑和材料
3.1 無水乙醇。
3.2 甲醇,色譜純。
3.3 乙腈,色譜純。
3.4 亞硫酸氫鈉。
3.5 磷酸溶液(1+9):吸取磷酸(ρ20=1.69g/mL)10mL,加水90mL。
3.6 磷酸鹽混合溶液:稱取十二水合磷酸氫二鈉1.8g、磷酸二氫鉀2.8g和庚烷磺酸鈉(C7H15SO3Na)1.0g,用水稀釋至1L,混勻,配製成含庚烷磺酸鈉(1g/L)的磷酸鹽緩衝液,加入磷酸溶液(3.5),調節pH至6,0.45μm微孔濾膜過濾。
3.7 染料類化合物標準儲備溶液(ρ(染料成分)=10g/L):稱取染料對照品約100mg(精確至0.1mg)於10mL容量瓶中,以2g/L亞硫酸氫鈉水溶液 + 無水乙醇(3.1)=1+1的混合溶液定容至10mL,配成約10g/L的單標溶液。以下幾種物質在上述溶劑中的溶解性較差,分別採取如下措施:甲苯-2,5-二胺硫酸鹽和2-氯-p-苯二胺硫酸鹽2種物質直接用2g/L亞硫酸氫鈉水溶液溶解並定容;甲苯-3,4-二胺直接用無水乙醇(3.1)定容;2-硝基-p-苯二胺和4-硝基-o-苯二胺需將稱樣量減至25mg,再用無水乙醇(3.1)定容,配成約2.5g/L的單標溶液。儲備液保存於0℃~4℃冰箱中,最多使用2天。
5 4 儀器
4.1 高效液相色譜儀,具有二極管陣列檢測器。
4.2 分析天平,感量爲0.0001g。
4.3 分析天平,感量爲0.001g。
4.4 精密pH計,精度0.01。
4.5 超聲波清洗器。
4.6 離心機。
4.7 渦旋混合儀。
6 5 測定步驟
5.1 樣品處理
稱取樣品約0.5g(精確至0.001g)於10mL具塞比色管中,加無水乙醇(3.1)+ 水=1+1的混合溶液至刻度,渦旋1min,冰浴超聲提取15min。渾濁溶液可取適量5000rpm離心5min,取上清液經0.45μm微孔濾膜過濾,濾液作爲待測溶液,並儘快測定。
5.2 測定
5.2.1 色譜參考條件
色譜柱:RP-AMIDEC16柱(250mm×4.6mm,5μm)或等同柱;
色譜保護柱:RP-AMIDEC16保護柱(20mm×4.0mm,5μm)或等同柱;
流動相1:乙腈(3.3)+ 磷酸鹽混合溶液(3.6)=10 + 90;
流動相2:甲醇(3.2)+ 磷酸鹽混合溶液(3.6)=10 + 90;
流動相3:乙腈(3.3)+ 磷酸鹽混合溶液(3.6)=40 + 60;
流量:1.0mL/min;
檢測波長:280nm;
柱溫:25℃。
5.2.2 校準曲線的製備
參照色譜圖1~色譜圖3,對32種禁限用染料成分進行分組,並根據分組情況,分別移取適量染料類化合物標準儲備溶液(3.7)於10mL容量瓶中,用無水乙醇(3.1)稀釋至刻度,配成500mg/L的混合標準溶液。各取混合標準溶液適量,用無水乙醇(3.1)稀釋,配成10mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、250mg/L、500mg/L共6個濃度的混合標準系列。標準系列應於使用前配製。
取各標準系列5μL注入高效液相色譜儀,分別採用3種流動相進行分析,記錄各色譜峯面積,繪製校準曲線。32種禁限用染料成分在流動相1和流動相2中的保留時間參考附錄B。
5.2.3 樣品測定
在設定色譜條件下,取待測溶液5μL注入高效液相色譜儀,分別採用3種流動相體系進行分析。色譜圖檢出的物質,經與該物質對照品的保留時間和紫外光譜圖比較確證後,根據峯面積,從校準曲線上查得相應組分的質量濃度。若待測溶液中染料成分的質量濃度超過了校準曲線線性範圍的上限,需對待測溶液進行適當稀釋。
注:實際操作過程中,可參考附錄B中32種禁限用染料成分在流動相1和流動相2中的保留時間,並結合色譜分離情況和樣品中染料成分的不同,對32種染料成分進行合理分組,使各染料成分獲得完全分離。若染料成分間不能達到基線分離,可對色譜條件進行適當調整,如降低流速或降低有機相比例等。
8 7 結果計算
式中:w(染料成分)—— 染髮類化妝品中染料成分的質量分數,%;
r—— 從校準曲線上查得的待測樣液中染料成分的質量濃度,mg/L;
V—— 樣品定容體積,mL;
D—— 稀釋倍數(不稀釋則取1)。
10 9 色譜圖
1.p-苯二胺;2.p-氨基苯酚;3. 甲苯-2,5-二胺硫酸鹽;4.m-氨基苯酚;5.o-苯二胺;6. 2-氯-p-苯二胺硫酸鹽;7. o-氨基苯酚;8. 間苯二酚;9. 2-硝基-p-苯二胺;10. 甲苯-3,4-二胺;11. 4-氨基-2-羥基甲苯;12. 2-甲基雷瑣辛;13. 6-氨基-m-甲酚;14. 苯基甲基吡唑啉酮;15. N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl;16. 4-氨基-3-硝基苯酚
1.m-苯二胺;2. 2,4-二氨基苯氧基乙醇HCl;3. 氫醌;4. 4-氨基-m-甲酚;5. 2-氨基-3-羥基吡啶;6. N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽;7.p-甲基氨基苯酚硫酸鹽;8. 4-硝基-o-苯二胺;9. 2,6-二氨基吡啶;10. N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽
1. N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl;2. 苯基甲基吡唑啉酮;3. 6-羥基吲哚;4. 4-氯雷瑣辛;5. 2,7-萘二酚;6.N-苯基-p-苯二胺;7. 1,5-萘二酚;8. 1-萘酚
12 附錄A
序號 | INCI名 | 中文名稱 | 純度/% |
1 | p-Phenylenediamine | p-苯二胺 | ≥95 |
2 | p-Aminophenol | ≥97 | |
3 | Toluene-2,5-diamine sulfate | 甲苯-2,5-二胺硫酸鹽 | ≥98 |
4 | m-Aminophenol | ≥98 | |
5 | o-Phenylenediamine | o-苯二胺 | ≥98 |
6 | 2-Chloro-p-phenylenediamine sulfate | 2-氯-p-苯二胺硫酸鹽 | ≥97 |
7 | o-Aminophenol | ≥98 | |
8 | Resorcinol | ≥98 | |
9 | 2-Nitro-p-phenylenediamine | 2-硝基-p-苯二胺 | ≥95 |
10 | Toluene-3,4-diamine | 甲苯-3,4-二胺 | ≥97 |
11 | 4-Amino-2-hydroxytoluene | ≥98 | |
12 | 2-Methylresorcinol | 2-甲基雷瑣辛 | ≥98 |
13 | 6-Amino-m-cresol | ≥98 | |
14 | Phenyl methyl pyrazolone | 苯基甲基吡唑啉酮 | ≥98 |
15 | N,n-Diethyltoluene-2,5-diamine HCl | N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl | ≥97 |
16 | 4-Amino-3-nitrophenol | ≥98 | |
17 | m-Phenylenediamine | m-苯二胺 | ≥95 |
18 | 2,4-Diaminophenoxyethanol HCl | ≥95 | |
19 | Hydroquinone | ≥99 | |
20 | 4-Amino-m-cresol | ≥98 | |
21 | 2-amino-3-hydroxypyridine | ≥97 | |
22 | N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-p- phenylenediamine sulfate | N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽 | ≥97 |
23 | p-Methylaminophenol sulfate | ≥99 | |
24 | 4-Nitro-o-phenylenediamine | 4-硝基-o-苯二胺 | ≥98 |
25 | 2,6-diaminopyridine | ≥98 | |
26 | N,n-Diethyl-p-phenylenediamine sulfate | N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽 | ≥99 |
27 | 6-Hydroxyindole | 6-羥基吲哚 | ≥98 |
28 | 4-Chlororesorcinol | 4-氯雷瑣辛 | ≥98 |
29 | 2,7-Naphthalenediol | 2,7-萘二酚 | ≥98 |
30 | N-Phenyl-p-phenylenediamine | N-苯基-p-苯二胺 | ≥98 |
31 | 1,5-Naphthalenediol | 1,5-萘二酚 | ≥95 |
32 | 1-Naphthol | ≥99 |