2 概述
寨卡病毒(Zika Virus)屬黃病毒科(Flaviviridae)黃病毒屬(Flavivirus),呈球形,直徑約爲40-70nm,有包膜。基因組爲單股正鏈RNA,長度約爲10.8Kb,可分爲亞洲型和非洲型兩個基因型。
寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學交叉反應,目前主要採用病毒核酸檢測。
4 樣本採集、保存和運輸
4.1 病例標本採集。
用無菌真空乾燥管,採集患者非抗凝血5mL,及時分離血清,分裝2管,保存於帶螺旋蓋、內有墊圈的凍存管內,標記清楚後低溫保存,其中1管用於現場實驗室檢測,1管用於上級疾病預防控制機構複覈。
對病例應儘可能採集雙份血液標本,兩份標本之間相隔14天爲宜,住院病例可於入院當天和出院前1天各採集一份。
4.2 蚊媒標本採集。
疫點內採集的伊蚊成蚊及幼蟲,分類鑑定後,填寫媒介標本採集信息表,按照採集地點分裝,每管10-20只。
4.3 標本保存、運送。
如標本能夠在24小時內開展實驗室檢測,應將標本置於2-8℃保存;如能在7天內開展檢測,應將樣本置於-20℃保存;如需保存7天以上,應將樣本置於-70℃以下。
5 檢測方法
寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學交叉反應,目前主要採用病毒核酸檢測。
開展蚊媒寨卡病毒檢測時,對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時,應同時考慮登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒實驗室檢測應按照相應的技術指南開展。
5.1 臨牀標本檢測。
5.1.1 病原學檢測
病原學檢測主要適用於急性期血液標本,一般認爲發病7天內檢測陽性率高。
(1)核酸檢測:採用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。
(2)病毒分離:將標本接種於蚊源細胞(C6/36)或哺乳動物細胞(BHK21、Vero)進行分離培養,出現病變以後,用檢測核酸的方法鑑定病毒。也可使用乳鼠腦內接種進行病毒分離。
5.1.2 血清學檢測
(1)血清特異性IgM抗體:發病3天后可檢出病毒特異性IgM抗體,但發病7天后檢出率高。可採用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應,易於產生假陽性。
(2)中和抗體:採用空斑減少中和試驗方法檢測。患者恢復期血清中和抗體陽轉或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染,可以確診。
5.2 媒介標本檢測。
5.2.1 標本處理
將分類後的伊蚊成蚊或幼蟲,按照採集地點,每10~20只爲一份進行研磨處理。
5.2.2 病毒核酸檢測
5.2.3 病毒分離
7 來源
《寨卡病毒病防控方案(第一版)》附件1