痰液分泌型IgA

1 拼音

tán yè fēn mì xíng IgA

2 英文參考

secretory IgA in sputum

3 概述

痰中的SIgA爲呼吸道上皮組織所分泌，具有防禦病原微生物侵襲的作用。

4 痰液分泌型IgA的醫學檢查

4.1 檢查名稱

痰液分泌型IgA

4.2 分類

體液和排泄物檢查 > 痰液檢查

4.3 取材

痰液

4.4 痰液分泌型IgA的測定原理

激光散射光係指一定波長的光通過溶液時遇到抗原-抗體複合物，光線被折射，發生偏轉。偏轉角度可以從0～90°，這種偏轉的角度可因光線波長和離子大小不同而有所區別。散射光的強度與抗原抗體複合物的量成正比，同時也和散射夾角成正比，和波長呈反比。測定方法有終點法和速率法兩種。

（1）終點散射比濁法：終點法是在抗原-抗體反應達到平衡時，即複合物形成後作用一定時間，通常爲30～60min，複合物濁度不再受時間的影響，但又必須在聚合產生絮狀沉澱之前進行濁度測定。

（2）速率散射比濁法：速率比濁是一種先進的動力學測定法，在1977年由Sternbery首先用於免疫測定。所謂速率是指抗原抗體結合反應過程中，在單位時間內兩者結合的速度。速率法是測最大反應速度，即反應達頂峯時的峯值，見表1。

由上數據可看出，抗原抗體結合反應在幾十秒內得出結果，峯值的高低與抗原的量成正比，峯值出現的時間和抗體的濃度、抗原抗體的親和力直接相關。

4.5 試劑

（1）稀釋液：0.2mol/L Na₂HPO₄63ml，0.2mol/L NaH₂PO₄37ml，0.5mol/L NaCl 100ml，NaN₂1.0g，蒸餾水加至1000ml，經0.45μm微孔濾膜過濾，分裝，4℃保存備用。

（2）反應液：聚乙二醇（PEG，分子量6000）4.6g溶於稀釋液中，略微加熱助溶，補足100ml，用0.45μm微孔濾膜過濾分裝。4℃保存備用。

（3）校正血清：自制校正血清時，可根據ICS校正卡上所列各種蛋白成分的含量，應用國產標準參考血清，根據公式C₁V₁＝C₂V₂換算成校正卡上含量。亦可將無溶血、無乳糜的正常人混合血清測出有關成份的含量後，略作調正，使與校正卡上含量一致，然後過濾分裝，低溫保存。

（4）質控痰液：可將數十份正常人痰液混合，加1g/L NaN₃，直接用C或D稀釋度即可。

（5）抗血清：可用國內特異性好，親和力強，效價高的抗血清，選擇最適稀釋度，用0.45μm微孔濾膜過濾。以已知含量參考血清作爲標準抗原，用ICS手動或自動方式測出該成分的含量，使與校正卡上所列含量一致，然後分裝4℃保存。

4.6 操作方法

使用免疫散射比濁操作法。

4.7 正常值

2.03±0.21mg/L。

4.8 化驗結果臨牀意義

SIgA減少時，黏膜抵抗力下降，易患呼吸道感染；經有效治療後，免疫功能改善，痰中SIgA可回升。對急性支氣管炎、慢性氣管炎急性發作、肺炎等有一定的輔助診斷意義。

4.9 附註

（1）抗原抗體的比例對濁度的影響：當抗原抗體比例相等時，形成的複合物和解離是相等的。當抗原含量過多時，形成的複合物小，而且傾向於再溶解，可逆反應大。當抗體含量過多時，形成的複合物體積大，且爲不溶性，可逆反應小。因此，作爲速率比濁，令其抗體過剩，有利於複合物的形成。

（2）抗血清的質量影響：作爲免疫反應的抗血清要求效價高、特異性強、純度高。作爲比濁用的抗血清還應具備：

①抗血清的親和力要大，故動物免疫時可採取小量，長期免疫的方法獲得。

②動物的種類，以R型動物（包括羊、豚鼠、家兔等）製備的抗血清親和力強，抗原抗體結合後不易解離。

③抗血清須嚴格處理，應無干擾離子，可採用高速離心或0.45μm超濾膜過濾以排除干擾。長期保存須放－20℃保存。

（3）抗原抗體反應的溶液。

①抗原抗體反應最適pH爲6.5～8.5，超過此限度則不易形成複合物，甚至可被分解。

②離子強度可直接影響抗原抗體反應的結合，離子強度大複合物形成快，低則阻礙複合物的形成，應用PBS是較好的反應液。

（4）親水劑的影響：親水劑如PEG（聚乙二醇），Tween20，MES（瑪啡代-2烷磺酸）等可促進沉澱反應的形成。緩衝液中引入一定的PEG對大分子複合物沉澱是十分重要的。

（5）標準曲線的應用：當試劑條件和室溫條件不變時，曲線可相對用一段時間，但不能長期不變。應用質控血清校準，可保證測定值的準確、可靠。