3 概述
5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)是人體5-HT的代謝產物。一般採用化學顯色法測定尿液中5-HIAA含量用以診斷類癌瘤。其基本原理是:5-HIAA與1-亞硝基-2-萘酚和亞硝酸偶聯呈紫色,顏色的深淺與尿尿中5-HIAA含量呈正比,因正常人尿液一般不會顯紫色,故定性試驗可滿足臨牀診斷需要。
5 尿5-羥吲哚乙酸的醫學檢查
5.1 檢查名稱
5.2 分類
5.3 化驗取材
5.4 尿5-羥吲哚乙酸的測定原理
樣品加入自動加樣閥後,在高壓泵作用下,經移動相至裝有固定相的細鋼管中進行柱層析分離,分離後的5-HT和5-HIAA經檢測器檢測,結果通過描記波峯或計算機處理後打印輸出。
5.5 試劑
(1)1.0mol/L高氯酸(內含0.2%偏過碘酸鈉,0.02%EDTA)。
(2)洗脫液,內含72mmol/L檸檬酸,36mmol/L磷酸二氫鈉,0.25mmol/L ED-TA,和0.9mmol/L辛磺酸,用19%的甲醇溶液配製,pH2.4。
5.6 操作方法
樣品(全血、血漿或組織勻漿及體液)100μl與等量冰浴的1.0mol/L高氯酸混合,4℃,20000g離心20min,取離心上清液加到HPLC的自動進樣器內,20μl注入C18反相柱,0.4ml/min流速、25℃,洗脫液洗脫。分離後的5-HT和5-HIAA被電化學或熒光分析系統分析,通過設置內標準或外標準計算結果。
5.7 正常值
定性試驗:陰性(淡黃色)。若呈紫色反應爲陽性。一般24h尿排出209μmol(40mg)本法即可檢出,若達到15699μmol(300mg)則幾乎呈黑色。
定量試驗:9.4~31.4μmol/24h(1.8~6.0mg/24h)。
5.8 化驗結果臨牀意義
5-HIAA的過度分泌是類癌瘤的最爲特異性的生化指徵。類癌瘤患者尿中排出的5-HIAA量一般爲正常量的5~50倍,有的甚至增加百倍以上。一般尿中超過25mg/24h則可疑。>50mg/24h則可診斷類癌。尿中5-HIAA量與類癌綜合綜合徵狀出現的頻率和嚴重程度有直接關係:尿中5-HIAA 10~49mg/24h存活29個月;50~149mg/24h,存活21個月;≥150mg/24h,存活13個月。
尿中5-HIAA輕度升高可發生在其他胃腸道疾病,如口炎性腹瀉,熱帶性口炎性腹性腹瀉以及支氣管燕麥細胞癌等;水平低下可在腎病患者中出現。
5.9 附註
隨機取樣的尿樣本可做篩選試驗。作5-HIAA定量分析時,收集24h尿,盛於含12g硼酸或10ml 6mol/L HCL瓶中。標本可在室溫下保存一週,2~6℃保存一個月。
(1)鴨梨、香蕉、茄子、菠蘿、李子和胡桃等富含5-HT,易至5-HIAA假性升高,檢查前3~4天應禁食此類食物。
(2)乙酰苯胺及有關藥物,止咳藥,可至假性升高;酚噻嗪、異丙嗪等藥物可至假性降低,因此在測定期間應停用上述藥物。
(3)應用熒光分光光度法和HPIC法可提高測定的靈敏度,並可排除上述藥物的干擾,提高特異性,有條件的實驗室可採用。