3 概述
β半乳糖苷酶是細胞溶酶體中的水解酶,在腎近曲小管上皮細胞中含量較高。尿中β半乳糖苷酶活性可反映腎實質,特別是腎小管的早期損傷,與尿中N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶一同測定作尿酶譜分析,有助於病程觀察和預後評價。
4 尿β半乳糖苷酶的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 尿β半乳糖苷酶的測定原理
對硝基苯-β-D-半乳糖苷在β-半乳糖苷酶(GAL)作用下釋放出遊離的對硝基苯酚,後者在405nm波長處有強吸收峯,測定對硝基苯酚生成量,即可計算GAL活性。GAL酶單位定義:37℃條件下,1L樣品與底物作用1min,產生1μmol對硝基苯酚爲一個GAL單位(U/L)。
4.5 試劑
(1)50mmol/L枸櫞酸鹽緩衝液(pH 4.6):稱枸櫞酸(C6H8O7·H2O)5.4g,枸櫞酸三鈉(Na3C6H5O7·2H2O)10g,用蒸餾水溶解後稀釋至1000ml。
(2)10mmol/L底物緩衝液:稱對硝基苯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷342.3mg,用上述緩衝液稀釋至100ml,混勻,4℃冰箱可保存10天。
(3)50mmol/L硼砂-氫氧化鈉緩衝液(pH 9.8):稱硼砂(Na2B4O7·H2O)4.77g,用蒸餾水溶解,加0.2mmol/L NaOH 170ml,再用蒸餾水稀釋至1000ml。
(4)3mmol/L對硝基酚標準液:取純化的對硝基酚41.7mg,用蒸餾水溶解並稀釋至100ml,混勻後置冰箱保存。
4.6 操作方法
按表1操作。
混合,在405nm波長,1cm光徑,蒸餾水調零,讀取各管吸光度,用(Au-Ac)之差查標準曲線。
4.7 正常值
2.51~14.3iu/L。(比色法)
4.8 化驗結果臨牀意義
尿中β半乳糖苷酶和N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶同屬細胞溶酶體內的水解酶,主要來源於腎小管上皮細胞,因而對腎小管損傷和後天性腎臟疾患有較敏感的反應。在腎實質損傷的不同階段,兩者的排出率曲線有一定差異,用於酶譜分析,可有助於臨牀診斷和評價,如對各種腎病的鑑別診斷、藥物對腎的毒性作用、感染、休克、腎移植排異反應、急性腎小管壞死等疾病的早期監測等,其是一項較好的指標。