4 麻疹病毒抗體的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 麻疹病毒抗體的測定原理
ELISA間接法:將麻疹抗原包被於ELISA板上。加待測血清,麻疹抗體結合抗原於板上。加入酶標記抗人IgG,加底物顯色者爲抗體陽性。
4.5 試劑
(1)聚苯乙烯ELISA板。
(2)微量加樣器(10,50,100μl)。
(3)碳酸鹽緩衝液(pH9.5)。
(4)洗液:0.5ml/L Tween 20生理鹽水(NS-T)。
(6)底物液:鄰苯二胺-H2O2。
(7)2mol/L H2SO4。
(8)麻疹抗原,對照抗原,辣根過氧化物酶抗人IgG結合物,由試劑盒提供。
4.6 操作方法
(1)按試劑盒說明工作濃度以碳酸鹽緩衝液分別稀釋麻疹抗原與對照抗原,分別平行包被ELISA板,每孔100μl。4℃過夜。
(2)待測血清以稀釋液稀釋至1∶100,加入麻疹抗原孔與對照抗原孔各100μl,37℃ 1~2h。
(3)用標本稀釋液稀釋抗人IgG酶結合物,每孔100μl。37℃ 1~2h。
(4)加底物100μl/孔。37℃ 10~15min後用2mol/L H2SO450μl/孔終止反應。
(5)492nm波長測A值(吸光值)。
4.7 正常值
陰性。
4.8 化驗結果臨牀意義
4.9 附註
(1)1~4步驟間均以。NS-T洗板3次。
(3)若欲測抗體滴度可選擇1∶100,1∶400,1∶1600,1∶6400。A比值≥2.1的血清最高稀釋度倒數爲抗體效價。