3 概述
當人體感染流行性出血熱病毒後不久，在血清中就可檢測到EHF-IgM，在7～10天內達高峯。而EHF-IgG在發病後2周纔出現，可持續數年。EHF-IgM的測定對診斷斷早期流行性出血熱感染有重要價值。
4 流行性出血熱病毒抗體的醫學檢查
4.1 檢查名稱
4.2 分類
4.3 化驗取材
4.4 流行性出血熱病毒抗體的測定原理
間接免疫熒光法：以感染EHF病毒的細胞塗片爲靶抗原片，加受檢血清，待反應後，用熒光素（FITC）標記的抗人IgM染色，根據有無特異性熒光顯色的細胞判讀結果。
4.5 試劑
抗原片和FITC標記抗人IgM國內有現成試劑市售。抗原片製備原則是取業經EHF病毒感染的Vero E-6細胞培養物，製成分散的細胞懸液，滴加於滅菌處理的10孔塗膜載玻片上，置溼盒5%二氧化化碳環境下，繼續培養16～18h，使細胞貼於玻片上，繼經洗滌，丙酮固定，乾燥密封後置－20℃保存。同法制備未感染Veto E-6細胞塗片供對照用。
4.6 操作方法
（1）用5mmol/L PBS（pH值7.2）將受檢血清作倍比稀釋後，滴加於抗原片上，放溼盒內37℃ 45min。
（2）用PBS洗滌3次，每次浸洗3min，振盪2min、吹乾，滴加0.1g/L伊文思藍-PBS配製的FITC標記抗人IgM，同法保溫，洗滌吹乾。
（3）用無熒光聚乙烯醇-甘油膠封片，置熒光顯微鏡下觀察，凡細胞漿內呈現點或片狀特異性熒光則爲陽性，按陽性細胞數量和熒光強度分（＋）～（＋＋＋＋），並以呈陽性的血清最高稀釋度的倒數爲受檢標本中的抗體效價。
4.7 正常值
陰性。
4.8 化驗結果臨牀意義
EHF-IgM陽性見於流行性出血熱。
4.9 附註
國內有用相同的抗原片，以酶標記抗人IgM抗體替代熒光抗體，進行酶免疫定位測定也獲得同樣效果。
現用ELISA有兩種方法：
（1）以抗EHF病毒單克隆抗體與載體結合成固相化，用以捕獲特異性抗原，加待測血清反應後，繼加酶標記抗人μ鏈識別，並使底物顯色。
（2）以抗人μ鏈包板，捕獲待測血清中IgM，再加EHF病毒抗原，最後用酶標記抗EHF病毒單克隆抗體結合物，識別，並使底物顯色。
ELISA所用抗原由EHF病毒感染的乳鼠腦組織懸液製取，其餘試劑、操作步驟同一般ELISA。