1 拼音
huà zhuāng pǐn zhōng 4-ān jī lián běn jí qí yán de jiǎn cè fāng fǎ
《化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發佈。
4 3 試劑與材料
3.1 甲醇:色譜純。
3.2 乙腈:色譜純。
3.3 甲酸:色譜純。
3.7 HLB固相萃取小柱或相當者:500mg/6mL。
3.8 30% 甲醇水溶液:甲醇(3.1)+水=30+70。
3.9 氨水:NH3含量25% ~28%。
3.10 5% 氨水甲醇溶液:氨水(3.9)+甲醇= 5+95,現配現用。
3.11 4-氨基聯苯:CAS 92-67-1,純度>99%。
3.12 4-氨基聯苯-D9:CAS 344298-96-0,純度>99%。
3.13 4-氨基聯苯標準貯備液(1000μg/mL):準確稱取標準物質10.0mg,用甲醇溶解,稀釋,定容至10mL,於-18℃下保存。
3.14 4-氨基聯苯標準工作溶液:分別取(3.13)標準貯備液,用甲醇稀釋定容,製成濃度爲1000ng/mL的標準溶液,於-18℃下保存。臨用時用50%甲醇水溶液稀釋成500ng/mL、250ng/mL、125ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、5ng/mL。
3.15 4-氨基聯苯-D9 內標標準溶液:用50%甲醇稀釋內標標準品溶液,得到100 ng/mL 4-氨基聯苯-D9內標溶液。
3.16 分別從4-氨基聯苯標準工作溶液(3.14)中分別吸取0.5mL溶液與0.5mL100 ng/mL內標溶液(3.15)混合,製得內標4-氨基聯苯-D9濃度爲50ng/mL,4-氨基聯苯分別爲250 ng/mL、125 ng/mL、62.5ng/mL、25 ng/mL、12.5 ng/mL、2.5 ng/mL的標準溶液。並根據需要配製成相應濃度的空白基質加標標準溶液。
6 5 分析步驟
5.1 化妝水、面霜、粉底類化妝品
稱取樣品0.2g(精確到0.001g),置於10mL具塞塑料離心管中,加入1mL濃度爲100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯(3.15),再加入3mL氯化鈉飽和溶液(3.6),於渦旋混合器上使樣品分散,加入3mL乙腈(3.2),充分渦旋,並超聲提取30min,10000r/min 離心10min,吸出上層清液於另一10mL 具塞塑料離心管中,下層氯化鈉飽和溶液用3mL乙腈(3.2)重複提取步驟一次,合併兩次乙腈提取液,往提取液中加入正己烷(3.4)2 mL,渦旋離心,靜置分層,棄去上層正己烷溶液,再在乙腈層加入正己烷(3.4)2 mL,渦旋離心,靜置分層,棄去上層正己烷溶液,轉移下層乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度試管中,40℃水浴下用氮氣吹至近幹,並用30%甲醇水溶液(3.8)重新溶解、定容至2mL,並經0.2 μm濾膜過濾後作爲測定液上機測定。
稱取樣品0.2g(精確到0.001g),置於10mL具塞塑料離心管中,加入1mL濃度爲100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯(3.15),再加入3mL氯化鈉飽和溶液(3.6),於渦旋混合器上使樣品分散,加入3mL乙醚(3.5),充分渦旋,並超聲提取30min,10000r/min 離心10min,吸出上層清液於另一10mL 具塞塑料離心管中,下層氯化鈉飽和溶液用3 mL乙醚(3.5)重複提取步驟一次,合併兩次乙醚提取液,用氮氣吹至近幹,並用30%甲醇水溶液(3.8)2mL重新溶解,再加入8mL純水稀釋。
HLB 固相萃取小柱(3.7),接上固相萃取裝置,小柱預先用10mL 甲醇、10mL水進行活化、平衡。將待淨化的樣品溶液傾倒入固相萃取小柱,待樣品溶液自然流盡後,依次用10mL純水、5mL 10%甲醇溶液淋洗小柱;待淋洗液自然流盡後,用吸球吹出小柱中的殘留液,用10mL 5%氨水甲醇溶液(3.10)洗脫固相萃取小柱,收集洗脫液,40℃水浴下經氮氣吹至近幹,用30%甲醇水溶液(3.8)重新溶解、定容至2mL,並經0.2 μm濾膜過濾後作爲測定液上機測定。
稱取樣品0.2g(精確到0.001g),置於10mL具塞塑料離心管中,加入1mL濃度爲100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯(3.15),再加入3mL乙腈(3.2),於渦旋混合器上使樣品分散溶解,充分渦旋,並超聲提取30min,10000r/min 離心10min,取上層清液於另一10mL 具塞塑料離心管中,下層樣品殘渣再用3 mL乙腈(3.2)重複提取步驟一次,合併兩次乙腈提取液,往提取液中加入正己烷(3.4)2 mL,渦旋離心,靜置分層,棄去上層正己烷溶液,再在乙腈層加入正己烷2 mL,渦旋離心,靜置分層,棄去上層正己烷溶液,轉移下層乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度試管中,40℃水浴下用氮氣吹至近幹,並用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL,並經0.2 μm濾膜過濾後作爲測定液上機測定。
7 6 測定
6.1 液相色譜參考條件
以下爲液相色譜參考條件:
a) 色譜柱:C18,1.7μm,100mmí2.1 mm(內徑),或相當者
b) 柱溫:40℃;
e) 流速:0.5mL/ min;
f) 進樣量:2μL;
6.2 質譜參考條件
以下爲質譜參考條件:
c) 霧化氣:氮氣;
d) 霧化氣壓力:45psi;
e) 毛細管電壓:3500V;
f) 乾燥氣溫度:325℃;
g) 乾燥氣流速:5L/min;
h) 鞘氣溫度:400℃;
i) 鞘氣流速:12 L/min;
k) 分辨率:Q1(unit)Q3(unit);
質譜測定參數見表1;質譜鑑定的允差見表2。
表1 4-氨基聯苯及其內標物的保留時間、監測離子對、源內裂解電壓、碰撞氣能量
注1:*定量離子
相對離子丰度/% | >50 | >20~50 | >10~20 | ≤10 |
允許的相對偏差/% | ±20 | ±25 | ±30 | ±50 |
6.3 標準曲線的繪製