化學發光酶免疫測定

心氣虛,則脈細;肺氣虛,則皮寒;肝氣虛,則氣少;腎氣虛,則泄利前後;脾氣虛,則飲食不入。
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1 拼音

huà xué fā guāng méi miǎn yì cè dìng

2 英文參考

chemiluminescentenzymeimmunoasssay,CLEIA

從標記免疫測定來看,化學發光酶免疫測定(chemiluminescentenzymeimmunoasssay,CLEIA)應屬酶免疫測定。測定中2次抗原抗體反應步驟均與酶免疫測定相同,僅最後一步酶反應所用底物爲發光劑,通過化學發光反應發出的光在特定的儀器上進行測定。兩種常用的標記酶,辣根過氧化物酶(HRP)和鹼性磷酸酶(AP)均有其發光底物,由此建立的CLEIA均在臨牀檢驗中應用。

3 HRP標記的CLEIA

常用的底物爲魯米諾或其衍生物。魯米諾的氧化反應在鹼性緩衝液中進行,通常以0.1mol/LpH8.6Tris緩衝液作底物液,魯米諾和H2O2在無HRP催化時也能緩慢自發發光,而在最後光強度測定中造成空白干擾,因而宜分別配製成2瓶試劑溶液,只在用前即刻混合。

HRP催化魯米諾氧化的反應可被某些酚試劑(如鄰-碘酚)或螢火蟲熒光素酶等加強。加強劑的作用是增強發光和延長髮光時間,由此可提高敏感度。

4 AP標記的CLEIA

在以AP爲標記酶的CLEIA中,應用的底物爲adamantyldioxetasephosphate,有不少衍生物的商品試劑如PPD可供應用。發光反應反應式如下:

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