WS/T 17—1996 尿中鉛的雙硫腙分光光度測定方法

1 拼音

WS/T 17—1996 niào zhōng qiān de shuāng liú zōng fēn guāng guāng dù cè dìng fāng fǎ

2 英文參考

Urine Determination of lead Spectrophotometric method-diphenylthiocarbazone method

中華人民共和國衛生行業標準 WS/T 17—1996《尿中鉛的雙硫腙分光光度測定方法》（Urine Determination of lead Spectrophotometric method-diphenylthiocarbazone method）由中華人民共和國衛生部於1996年10月14日發佈，自1997年05月01日起實施。

3 1 主題內容與適用範圍

本標準規定了尿中鉛的雙硫腙分光光度測定方法。本法最低檢測濃度爲0.012 mg/L。

本標準適用於接觸鉛工人尿中鉛濃度的測定。

4 2 原理

尿樣經混合消化液-鉬的催化氧化，有機質被迅速破壞，使鉛呈離子態，然後在pH8.5～11.0與雙硫腙反應，生成可溶於三氯甲烷的紅色絡合物，于波長510 nm處比色定量。

5 3 儀器

3.1 分光光度計，10 mm比色杯。

3.2 錐形瓶，250 mL。

3.3 錐形分液漏斗，60 mL。

3.4 定量加液器，10 mL。

3.5 電熱板（或其他熱源）。

3.6 抽液裝置。

3.7 聚乙烯瓶，200 mL。

3.8 尿比重計。

6 4 試劑

本標準所用試劑除另有註明者外，均爲分析純級。

4.1 實驗用水：爲去離子水，或全玻璃蒸餾器重蒸水，或薄膜超濾水。

4.2 硝酸，ρ₂₀=1.42 g/mL，優級純。

4.3 高氯酸，ρ₂₀=1.67 g/mL，優級純。

4.4 硫酸，ρ₂₀=1.84 g/mL。

4.5 氨水，ρ₂₀=0.90 g/mL，優級純。

4.6 鉬酸銨[（NH₄）₆Mo₇O₂₄·4H₂O]溶液，5 g/L。

4.7 無水亞硫酸鈉。

4.8 檸檬酸三銨。

4.9 氰化鉀溶液，100 g/L。

4.10 三氯甲烷。

4.11 混合消化液，將硝酸（4.2），高氯酸（4.3），硫酸（4.4）和鉬酸銨溶液（4.6），按10+2+1+1比例混合。

4.12 硝酸溶液，1% （V/V）。

4.13 酚紅指示劑，0.4 g/L。

4.14 緩衝液，在1000 mL水溶液中含有10 g無水亞硫酸鈉（或用50 mL濃度爲200 g/L的溶液），250 g檸檬酸三銨，300 mL氨水（4.5）和100 mL氰化鉀溶液[（4.9），如若長時間放置，氰化鉀可不必配入，在分析樣品時另加1 mL氰化鉀溶液（4.9）]。

4.15 雙硫腙三氯甲烷溶液

4.15.1 儲備液，0.160 g/L．稱取經純化的雙硫腙固體（避光保存期一年）0.0160 g，以三氯甲烷溶解，然後在100 mL棕色容量瓶中加三氯甲烷至刻度。於冰箱中保存，至少可使用2個月。

4.15.2 應用液，0.0160 g/L，使用時，將儲備液（4.15.1）用三氯甲烷稀釋10倍（此時，如用510 nm波長，10 mm比色杯，以三氯甲烷爲參比液，測得其透光度約爲40%）．置棕色瓶於冰箱中，可保存一週以上。

4.16 洗除液，1000 mL水溶液中含有20 g無水亞硫酸鈉（或用100 mL濃度爲200 g/L的溶液），60 mL氰化鉀溶液（4.9）．150 mL氨水（4.5）。

4.17 鉛標準溶液，稱取105 C下烘乾至恆重的硝酸鉛（優級純）0.1598 g於燒杯中，用少量水溶解，定量移入100 mL容量瓶中，加1 mL硝酸（4.2），用水稀釋至刻度。此溶液1 mL=1.0 mg Pb。使用時，以1%硝酸溶液（4.12）逐級稀釋成1 mL=2.0 μg Pb。

4.18 質控樣，用標準尿樣、加標的模擬尿、接觸者混合尿或加標的正常人混合尿作質控樣。5 採樣、運輸和貯存收集一次尿樣至少50 mL於聚乙烯瓶中，常溫下帶回實驗室，測定比重。如不立即分析，置冰箱（4℃）中可存放兩週[亦可按尿體積1%加入硝酸（4.2）防腐]。分析前尿樣須充分搖勻。

7 6 分析步驟

7.1 6.1 樣品處理

取尿樣（5）25 mL置於錐形瓶中（3.2），同時取25 mL水作試劑空白，各加7 mL混合消化液（4.11），混勻，在電熱板（或其他熱源）上消化至無色透明（或有黃白色沉澱物），取下稍冷，趁溫熱時，加入20 mL硝酸溶液（4.12）．搖勻後，移入60 mL錐形分液漏斗中（3.3）。

7.2 6.2 標準曲線的繪製

6.2.1 取7只60 mL分液漏斗，按下表配製標準管。

鉛標準管的配製

6.2.2 各漏斗中加入1滴酚紅指示劑（4.13），滴加氨水（4.5）至溶液呈紅色。然後加入10 mL緩衝液（4.14），搖勻，冷卻後加5 mL雙硫腙三氯甲烷應用液（4.15.2），搖100次，分層，抽棄水相，再加入10 mL洗除液（4.16），搖50次，分層後抽棄水相，重複洗滌一次。將三氯甲烷層經脫脂棉過濾到10 mm比色杯中，於510 nm下以三氯甲烷作參比，測量吸光度。

6.2.3 以鉛含量爲橫座標．吸光度值（扣除試劑空白）爲縱座標，繪製標準曲線。

7.3 6.3 樣品測定

取預處理後的樣品溶液（6.1）按6.2.2條操作，由測得的吸光度值，在標準曲線上查出樣品溶液中鉛含量。在測定前後及每測10個樣品後，測定一次質控樣。

8 7 計算

7.1 按式（1）計算尿樣換算成標準比重（1.020）下的濃度校正係數（k）。

7.2 按式（2）計算尿中鉛的濃度。

式中：X——尿中鉛的濃度，mg/L；

m——由標準曲線上查出的鉛含量，μg;

V——分析時所取尿樣體積，mL。

9 8 說明

8.1 本法的檢測下限，取25 ml.尿樣時爲0.012 mg/L，線性範圍0～0.600 mg/L；精密度：當尿鉛濃度0.080～0.600 mg/L時，CV=1.4%～4.1%（n=6）；準確度：當加標量1.4～5.0μg Pb時，其加標回收率爲93.4%～101.7%（本底尿鉛濃度範圍1.60～3.93 mg/L，n=6）；並對國家一級尿標樣（定值爲0.112±0.009 mg/L Pb）而言爲104%。

8.2 尿樣的採集時間不限，但採樣時，須避免現場環境，工作服和接觸部位等可能產生的鉛塵污染。

8.3 玻璃儀器與塑料容器均用10%（V/V）硝酸浸泡過夜，最後用水沖洗後使用，新的或久置不用的器皿需用50%cv/v）硝酸浸泡一週，沖洗乾淨後再用。

8.4 雙硫腙試劑應作質量鑑定，具體方法見附錄A。

8.5 其他試劑的質量也需經過鑑定，具體方法見附錄A。

8.6 加入10 mL緩衝液至消化後的樣品液中，能保證pH在8.5～11.0之間，所以6.2.2條中省去加酚紅指示劑和滴加氨水操作步驟，對分析結果無影響．

8.7 共存物的影響，在1L尿樣中．Zn，Al，As，Cr，Sn，Se，Cu，Cd，Ni，Mn，V，Hg，Mg，Tl，Fe相應不超過12.0，8.0，2.4，1.0，1.0，1.0，0.60，0.32，0.24，0.20，0.20，0.10.400，0.40，20.0 mg，均不干擾測定。

8.8 標準系列經消化或不經消化操作，所繪製的標準曲線，其結果是一致的，所以繪製標準曲線可不經消化操作直接進行。

8.9 質控樣用標準尿樣或加標的模擬尿時，可考察準確度及精密度。用接觸者尿或加標的正常人尿時可考察精密度。但人尿不易久存。模擬尿只含人尿中大量成分。

10 附錄A 所用試劑的質量鑑定方法（參考件）

10.1 A1 雙硫腙的質量鑑定方法

將0.0160 g／L雙硫腙三氯甲烷溶液用三氯甲烷稀釋1倍，置冰箱中一天後不褪色，表明合格。

10.2 A2 其他試劑的質量鑑定方法

所用的試劑（除8.4外）可根據空白試驗結果，決定是否需要作去鉛處理，如空白試驗的吸光度值明顯高於0.02，可對下述溶液逐一進行檢查：在下述溶液加好後，均加入1滴酚紅指示劑，顯紅色，再加入5 mL 0.0160 g/L雙硫腙三氯甲烷溶液，搖數十次，三氯甲烷層應仍顯綠色，則證明試劑無鉛。

A2.1 緩衝液（不可含氰化鉀）10 mL。

A2.2 氰化鉀（100 g/L）2 mL+緩衝液10 mL。

A2.3 鉬酸銨溶液（5 g/L）1 mL+氰化鉀溶液1 mL+緩衝液10 mL。

11 附加說明：

本標準由衛生部衛生監督司提出。

本標準由上海市勞動衛生職業病防治研究所負責起草。本標準主要起草人唐春元。

本標準由衛生部委託技術歸口單位中國預防醫學科學院勞動衛生職業病研究所負責解釋。