1 概述
兩步沉澱法可以測定HDL2及HDL3。第一步是測定HDL-C;第二步是使含脂質較多的HDL2沉澱,測定上清中的HDL3-C即可根據總HDL-C計算得HDL2-C。兩步沉澱最好使用兩種濃度的同一種試劑作沉澱劑。
3 高密度脂蛋白2-膽固醇的醫學檢查
3.1 檢查名稱
3.2 分類
3.3 高密度脂蛋白2-膽固醇的測定原理
以DS50(Mr50000±5000)與Mg2+沉澱血清中含apoB的脂蛋白[LDL、VLDL、LP(a)],測定上清液中的膽固醇,代表總HDL-C。
HDL是顆粒大小及組成很不均一的脂蛋白,主要包括HDL2、HDL3亞組分(HDL1很少),適量增加DS50和Mg2+濃度,可使血清中的HDL2隨含apoB的脂蛋白同時沉澱,離心後上清液中只含HDL3,故可測出HDL3-C。總HDL-C與HDL3-C之差即爲HDL2-C。
3.4 試劑
(4)沉澱劑Ⅰ:95g聚乙二醇20000溶於0.1mol/L磷酸鹽緩衝液(pH 6.5)中並加至1L。
(5)沉澱劑Ⅱ:150g聚乙二醇20000溶於0.1mol/L磷酸鹽緩衝液(pH 7.5)中並加至1L。
(6)標準液:同HDL-C測定用標準參考血清,不包括沉澱步驟。
3.5 操作方法
(1)100μl血清與200μl沉澱劑Ⅰ混合,室溫放置10min後離心,吸上清液100μl與酶試劑1.0ml混合測定膽固醇,即HDL-C。
(2)100μl血清與200μl沉澱劑Ⅱ混合,室溫放置10min後離心,吸上清液100μl與酶試劑1.0μl混合測膽固醇,即HDL3-C。
HDL2-C=HDL-C-HDL3-C
3.6 正常值
HDL2-C約佔總HDL-C的1/3HDL3-C約佔2/3,女性HDL2-C稍高於男性。由於方法不一致,各家報告的數據有較大差異。
3.7 化驗結果臨牀意義
在生理與病理狀態下HDL-C水平的變動大都由於HDL2-C的變化,而HDL3-C水平的變化較小。冠心病人HDL2-C下降要比總HDL-C下降更明顯,因此HDL2可能成爲更好的冠心病危險因素的判別指標。